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文档简介

BCA法测蛋白浓度本课件将介绍BCA法测蛋白浓度的原理、步骤、实验器材、实验步骤、结果分析、优缺点和总结,帮助您更好地理解实验过程和数据分析。BCA法测蛋白浓度的原理还原铜离子BCA试剂中含有Cu2+离子,和还原剂NaBH4反应后形成Cu+。和蛋白质反应在碱性条件下,Cu+和蛋白质中的酪氨酸、半胱氨酸等离子体发生还原反应并生成紫色络合物。测定吸光度采用光度计,在562nm处测定紫色络合物的吸光度,与标准曲线进行比对即可得到蛋白质浓度。BCA法测蛋白浓度的步骤制备标准品用卵清或白蛋白制备不同浓度的标准品。加样将待测样品和标准品加入微孔板中,每个孔均加入BCA试剂。反应在高温下盖上微孔板盖,使用振荡器震动反应。测定吸光度测定反应溶液吸光度,与标准曲线对照得出样品蛋白质浓度。BCA法测蛋白浓度的实验器材1BCA试剂盒包括BCA试剂、还原剂、蛋白标准品等。2微孔板用于加样和反应过程。3移液器用于准确地移取少量液体。4光度计用于测定反应液的吸光度。BCA法测蛋白浓度的实验步骤1制备标准品用卵清或白蛋白制备不同浓度的标准品。2添加BCA试剂将待测样品和标准品加入微孔板中,每个孔均加入BCA试剂。3反应在高温下盖上微孔板盖,使用振荡器震动反应。4测定吸光度测定反应溶液吸光度,与标准曲线对照得出样品蛋白质浓度。BCA法测蛋白浓度的结果分析优点检测灵敏度高线性范围广精度好缺点对氧化还原剂敏感有干扰物质存在时误差大不适用于测定含有3个或更多组胺基酸的蛋白质BCA法测蛋白浓度的优缺点优点BCA法与Lowry法相比,敏感度更高,能够快速准确地检测蛋白质浓度。缺点BCA法对氧化还原剂敏感,有干扰物质存在时误差大,不适用于测定含有3个或更多组胺基酸的蛋白质。总结通过本课件的介绍,您已经了解了BCA法测蛋白浓度的原理、

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