脾虚型肠易激综合征模型whbe兔环核苷酸水平的变化

脾虚型肠易激综合征模型whbe兔环核苷酸水平的变化

肠易激综合征（ibs）是临床上常见的一种具有特定病理和生理基础的肠道功能性疾病。临床表现为腹痛、腹泻、便秘、排便习惯变化等。中医本身无IBS这个病名,依其表现当属“泄泻”、“滞下”、“便秘”、“腹痛”等范畴,其本质是脾虚。近年来不少学者对环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)两种环核苷酸随阴阳盛衰而变化的现象作了大量研究,表明它们之间存在着类似中医阴阳学说的相互矛盾及对立统一的关系。已有研究显示,不同中医证型肠易激综合征患者环核苷酸水平有相应的变化。为此,本实验对脾虚型肠易激综合征模型WHBE兔环核苷酸的水平进行了研究,以探讨他们在IBS疾病发生发展中所起的作用。1材料和方法1.1雄各半pqWHBE兔18只和日本大耳白兔18只,体重为1.8～2.1kg,普通级,雌雄各半,由上虞市星火兔业养殖场提供[SCXK(浙)2005-0022]。将WHBE兔和日本大耳白兔随机分成2组,其中正常对照组6只,脾虚型肠易激综合征模型复制组(造模组,12只),模型复制成功后处理6只,剩下6只自然恢复10d。1.2仪器和试剂SN-682型放射免疫γ测量仪;cAMP、cGMP试剂盒由上海中医药大学同位素室提供。1.3模型兔的饲养实验兔进入本中心后,预养3d,期间观察兔的一般情况,若有拉稀、肛温不正常者剔除。观察期间第2～3天,给每只兔子称重,测温2次,并观察记录各兔子的饮水量和饮食量。观察期结束后,确定合格者,进入实验。将WHBE兔和日本大耳白兔各随机分成2组,即正常对照组6只,模型对照组12只。将正常对照WHBE兔和日本大耳白兔组放入另一个房间中正常饲养。模型对照组WHBE兔和日本大耳白兔在同一环境中饲养。除正常对照组外,其余各组实验兔上午8:30开始在温度(37～39)℃,相对湿度为100%的环境下湿热应激连续7d,每天湿热处理4h,作为预处理,然后第7天下午开始给模型对照组和自然恢复组灌胃给予番泻叶3g/kg,灌胃量为10mL/kg,连续灌胃番泻叶7d,期间正常对照组每天灌胃给予生理盐水10mL/kg。造模期间模型对照组饲喂减半,但不限水。连续灌胃番泻叶7d后,处理模型对照组实验兔6只,留6只模型对照组使其自然恢复10d,正常饲养,并于恢复10d后,处理正常对照组和自然恢复组实验兔。实验期间观察动物的临床症状。1.4edta-na2和抑肽酶活性测定分别在造模后及自然恢复10d后,从耳中动脉取血,放入加有适量10%EDTA-Na2和抑肽酶的预冷离心管中,立即混匀,离心,分离血浆,以放免法测定各指标。对照组与模型对照组同步取血,测定cAMP和cGMP指标。1.5统计方法所有数据均采用表示,并用SPSS12.0软件进行统计,采用方差分析,确定差异显著性。2结果2.1模型兔的一般情况与正常对照组比较,脾虚证IBS模型兔湿热应激7d后体重略有降低趋势,第7天开始灌胃番泻叶后实验兔4h出现粪便稀软,饮食下降,灌胃第3天实验兔出现便溏、水样便、摄食量减少,灌胃第7天时所有模型对照组均出现上述症状,且形体消瘦,活动减少,体重减轻,体温略有下降,蜷缩,毛色粗乱,拱背,腹胀,应激反应警觉性降低,暴躁易怒等,个别家兔出现脱肛。而正常对照组无上述症状,且体重增加。造模成功后,部分自然恢复模型兔也逐渐恢复,体重有所增加,但所需时间较长。2.2whbe兔模型大鼠心肌组织中ph值的变化由表1、表2和表3结果显示,与正常对照组比较,造模结束及自然恢复10d后,模型兔的cAMP和cGMP水平均有所升高,而cAMP/cGMP比值却有所下降,其中WHBE兔模型对照组及自然恢复组cAMP和cGMP水平均显著高于正常对照组(P<0.05,P<0.01);而日本大耳白兔模型对照组及自然恢复组均差异不显著(P>0.05)。3神经证型及证候变化的关系IBS是一种以腹痛或腹部不适和排便习惯改变为特征的慢性功能性肠病,在祖国医学中属“泄泻”“腹痛”“郁证”等范畴,临床以脾虚型多见。IBS的病因和发病机制尚不清楚,一般认为,不存在器质性病变,而是一种与精神、饮食因素有关的胃肠功能紊乱性疾病。本研究根据IBS的病因及临床特征,采用湿热应激加灌服番泻叶的方法复制脾虚型实验兔,这种造模方法既符合了现代医学认为IBS是一种心身性疾病的认识,又符合了中医情志致病、肝郁乘脾的学说,是目前研究IBS发病机制及其治疗较为理想的实验动物模型。本实验结果表明,湿热应激加灌服番泻叶的造模方法可引起实验兔性情改变,形体消瘦,活动减少,体重减轻,体温略有下降,蜷缩,毛色粗乱,拱背,腹胀,稀便增多,应激反应警觉性降低,暴躁易怒等,与IBS的临床表现相吻合,类似中医脾虚型的表现,说明造模是成功的。环核苷酸是机体内一种具有广泛调节作用的物质,尤其是cAMP和cGMP在体内相互拮抗相互制约,控制多种代谢,是细胞内体现阴阳平衡的关键物质。而祖国医学认为,人是阴阳对立统一的有机整体,在正常情况下,阴阳是相互依存和相互制约的,从而保持机体的相对平衡和功能的稳定。在病态下,阴阳失去平衡,表现一方面偏盛或偏衰,就会构成虚或实的病症。本实验结果表明,脾虚证IBS模型兔血浆cAMP含量明显升高,cGMP的含量也同样升高,而cAMP/cGMP比值则低于正常对照组,说明本实验脾虚证IBS模型具有双重特点:既有阴虚特点,又有阳虚特点,进一步表明脾虚证IBS患者可能有表现为阴虚特征者,又有表现为阳虚特征者,说明在本质上有向阴虚或阳虚及其他证型转化的倾向性。因此,在临床治疗中必