丙烯酰胺液相色谱-质谱法测定化妆品安全技术规范

——1—丙烯酰胺范围

Acrylamide本方法规定了液相色谱-质谱法测定化装品中丙烯酰胺的含量。本方法适用于化装品中丙烯酰胺含量的测定。方法提要样品经过提取后，用液相色谱-质谱法测定，以多反响离子监测模式进展监测，承受特征离子丰度比进展定性，丙烯酰胺与内标峰面积比定量。0.00005µg，定量下限为0.0002µg；取样量为0.2g时，检出浓0.1mg/kg0.4mg/kg。试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T6682规定的一级水。99.0%。氘代丙烯酰胺2,3,3-D，纯度大于等于98。醋酸铵。乙腈，色谱纯。甲醇，色谱纯。空白化装品样品：选择不含丙烯酰胺的化装品作为空白样品。〔乙腈=10%：量取10mL乙腈〔3.〕置100mL混匀。醋酸铵溶液[c〔醋酸铵〕=0.02mol/L]0.08g50mL量瓶中，加水溶解并定0.02mol/L的醋酸铵溶液。丙烯酰胺标准储藏溶液[〔丙烯酰胺〕=0.5g/L]：称取丙烯酰胺标准品〔3.1〕50mg〔准确0.1mg〕100mL量瓶中，加乙腈溶液〔3.7〕使溶解并定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为0.5g/L的丙烯酰胺标准储藏溶液。仪器和设备液相色谱-三重四极杆质谱联用仪。天平。超声波清洗器。高速离心机。周密移液器。涡旋振荡器。分析步骤标准系列溶液制备丙烯酰胺标准溶液1操作，分别周密量取肯定体积的丙烯酰胺标准储藏溶液〔3.9〕10mL量瓶中，以乙腈溶液〔3.7〕稀释并定容至刻度，得不同浓度的丙烯酰胺系列标准溶液。内标溶液10mg〔0.0001g〕100mL量瓶中，加乙腈溶液〔3.7〕使溶解并定容至刻度，摇匀，即得浓度为100µg/mL的氘代丙烯酰胺储藏溶液，然后周密量取氘代1mL50mL量瓶中，加乙腈溶液〔3.7〕使溶解并定容至刻度，摇匀，即得浓2µg/mL的氘代丙烯酰胺内标溶液。丙烯酰胺参加空白样品标准溶液60.20g〔0.001g〕5mL塑料离心管中，分别加浓度2µg/mL50μL30s，再分别加丙烯酰胺系列标准溶液50μL30s；然后0.15mL0.02mol/L的醋酸铵水溶液〔3.8〕，30s2.0mL乙腈〔3.4〕，60s后，10000rpm10min2mL色谱流淌相复溶，涡旋60s，10000rpm5min0.45μm微孔滤膜过滤后，滤液作为待测溶液，备用，0.025µg、0.05µg、0.25µg、1.25µg、12.5µg、25µg。样品处理0.20g〔0.001g〕，5mL2µg/mL的内标溶液50μL30s0.15mL0.02mol/L的醋酸铵水溶液〔3.8〕，涡旋30s2.0mL乙腈〔3.4〕，涡旋60s后，以10000rpm10min，取上清液，氮气吹干，残渣加2mL色谱流淌相复溶，涡旋60s，以10000rpm5min0.45μm微孔滤膜过滤后，滤液作为待测溶液，备用。参考仪器条件色谱色谱柱：WatersAtlantisT3〔3.5μm,2.1mm×100mm〕或具有同等柱效的色谱柱；流淌相：甲醇+0.1%甲酸水溶液=1.5+98.53min；流速：0.3mL/min；柱温：25℃；进样量：5μL。质谱离子源：电喷雾离子源ESI源；监测模式：正离子监测模式；监测离子对及相关电压参数设定见表2；雾化气压力：50psi；枯燥气流速：12L/min；枯燥气温度：350℃；毛细管电压：4000V；0min～1min：不进入质谱仪分析,1min～2.5min：进入质谱仪分析。测定定性用液相色谱-且所选择的监测离子对的相对丰度比与标准样品的离子对相对丰度比相全都〔见表3，则可以推断样品中存在丙烯酰胺。定量在“5.3”分析条件下，用丙烯酰胺参加空白样品的系列浓度的标准溶液〔5.1.3〕分别进样，以丙烯酰胺参加空白样品的系列浓度为横坐标，丙烯酰胺与内标的峰面积比为纵坐标，进展线性回0.99。取“5.2”5μL，将丙烯酰胺与内标的峰面积比代入标准曲线，计算丙烯酰胺的质量浓度，按“6”计算，得出样品中丙烯酰胺的含量。计算m= 1m式中：——化装品中丙烯酰胺的含量，mg/kg；m——样品取样量，g；m1——代入回归方程计算得到的样品待测溶液中丙烯酰胺的质量，g；在重复性条件下获得的两次独立测定结果确实定差值不得超过算术平均值的15%。溶液表1溶液初始浓度丙烯酰胺系列标准溶液的配制量取体积 定容终体积标准溶液终浓度1〔0.5mg/mL〕2mL 10mL100µg/mL2〔0.5mg/mL〕1mL 10mL50µg/mL3〔50µg/mL〕1mL 10mL5µg/mL4〔5µg/mL〕2mL 10mL1µg/mL5〔1µg/mL〕2mL 10mL0.2µg/mL6〔1µg/mL〕1mL 10mL0.1µg/mL表2三重四级杆离子对及相关电压参数设定表编号 物质名称1 丙烯酰胺

〔m/z〕72

Frag.(V)40

〔m/z〕55

CE〔V〕82 氘代丙烯酰胺〔内标〕 75 40 58 84表3监测离子和离子相对丰度比监测离子对〔