分光光度法测定对乙酰氨基酚

分光光度法测定对乙酰氨基酚

乙酰氨酚（app）也被称为醋氨酚，是一种抗热和疼痛的化学成分。这种化学被称为n-（4-羟基苯基）乙酰胺（图1）。它是一种白色结晶或结晶性粉末,无臭,味微苦,在热水或乙醇中易溶,在丙酮中溶解,几乎不溶于冷水或石油醚。对乙酰氨基酚是一种常用的解热镇痛药,其解热作用缓慢而持久,与阿司匹林相比,具有刺激性小、极少有过敏反应等优点。此外,它用途广泛,可用于药物扑炎痛的合成、作为有机合成中间体如:新型祛痰药盐酸氨溴索,镇痛药丙帕他莫等、照相用化学药品和过氧化氢的稳定剂等。目前,对乙酰氨基酚是已成为全世界应用最广泛的药物之一,是国际医药市场上头号解热镇痛药。APAP的合成方法很多,一般可分为二步法和一步法,传统的二步法是将对硝基苯酚(简称PNP)等原料还原成对氨基苯酚(简称PAP),再酰化成APAP。一步法是在同一反应器中,不分离出还原产物PAP的情况下直接进行酰化合成APAP,还原与酰化同时进行的合成路线。近年来,随着APAP的新用途的开发,其需求量相应的增加,原有的生产工艺和生产规模已经不能满足当前的需要。因此开发新的工艺提高其产量,减少环境污染成为亟待解决的问题。对于二步法无论如何改进PAP的生产方法,都难以克服其生产过程中以及精制PAP所产生的大量三废污染。此外分离出来的PAP极易被氧化,这将降低APAP的产率。采用一步法,在不分离出PAP的情况下直接进行酰化是解决上述问题的理想方法。我国现在生产APAP大都采用PNP铁粉还原,酰化而得。发达国家采用了加氢工艺代替铁屑还原。特别是催化加氢一步合成工艺,具有生产工序少,产品收率高,节省能源,环境污染小,生产成本低等特点。但由于Pt、Pd等催化剂昂贵,无疑将提高生产成本。若能用较廉价的催化剂(如镍等)进行一步合成势必成为最有发展前途的合成工艺。此外还有重排法和生化合成等其它路线。对羟基苯乙酮肟重排法是一个环境友好的新型合成工艺,没有副产物产生,产品后处理简单,生产成本低,对于提高对乙酰胺基酚生产企业工艺水平,降低成本,减少污染,促进发展具有重要意义,因此,极具推广和应用价值。本实验采用的药片是对乙酰氨基酚片,对乙酰氨基酚片是一种解热镇痛类的非处方药药品。对乙酰氨基酚作为对乙酰氨基酚片药品中含量的一种重要活性成分,极具有研究意义。本次研究对该药品中对乙酰氨基酚含量的测定做一个方法考察,目的是寻找出一种简便、快速、高效、经济测定对乙酰氨基酚片中对乙酰氨基酚含量的方法。从而让人们更加了解该药品,更好地使用对乙酰氨基酚片。目前普遍应用的测定对乙酰氨基酚含量的方法有很多种,如分光光度法、亚硝酸钠法、高效气相色谱法、电化学方法等,但除了分光光度法外,其他操作方法麻烦、测定时间长。本实验在这些测定方法的基础上,利用亚硝基铁氰化钠试液为显色剂,将分光光度法应用于“对乙酰氨基酚片”中对乙酰氨基酚含量的测定。1实验部分1.1试剂:酚、apap721可见光分光光度计,上海菁华科技仪器有限公司;电子分析天平;对乙酰氨基酚/APAP(AR);盐酸(AR,36%～38%),廉江市爱廉化试剂有限公司,500mL;亚硝基铁氰化钠(化学纯),广州化学试剂厂,25mg;无水碳酸钠(AR),中国,天津市巴斯夫化工有限公司,500g;对乙酰氨基酚片。1.2溶液的制备1.2.1na2co3溶液的制备准确称取Na2CO35.3035g,置于1000mL容量瓶中,加纯水标定至刻度,摇匀。1.2.2解液的制备。在联通的基础上,把解水床打造成水浴用水浴热。在添加盐酸7.准确称取对乙酰氨基酚0.1023g,置于100mL的烧杯中,加浓盐酸10mL,纯水10mL,在70℃水浴加热75min,冷却至室温,将水解液转移到1000mL的容量瓶中。用Na2CO3溶液稀释至刻度,摇匀。1.2.3显色剂1%亚硝基铁氰化钠的制备准确称取Na2CO31.0019g,亚硝基铁氰化钠1.0043g,置于100mL容量瓶中加纯水标定到刻度,摇匀。1.3对氨基酚溶液先以一定浓度的对乙酰氨基酚溶液充分水解全部生成对氨基酚溶液,对氨基酚溶液在碱性条件下与亚硝基铁氢化钠试剂作用,生成蓝色配位化合物。利用721-分光光度计测定其波长确定最大吸收,并通过分光光度计进行条件优化,依据比尔定律绘制标准曲线。2结果与讨论2.1显色剂的选择精确吸取对乙酰氨基酚溶液100mL,放入1000mL的容量瓶中,加水至刻度线,摇匀,定为溶液(Ⅰ)。精确吸取溶液(Ⅰ)各5mL,分别放入两支25mL的比色管中,在一支比色管中加入0.7mL的显色剂使溶液由淡黄色变成靛蓝色,加水标定至刻度,此为样品溶液。另一支未加显色剂的溶液,加水标定至刻度为空白。在721-分光光度计上测定波长范围,选择出最大波长,如图2所示。由图2可看出对氨基酚显色液在700nm有最大吸收峰,因此本实验选择700nm为测定波长。2.2加标回收、摇匀精确吸取溶液(Ⅰ)各5mL,依次放入10支25mL的比色管中。分别加入显色剂0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0mL,再分别加水至刻度线,摇匀。再吸取溶液(Ⅰ)5mL放入比色管加水至刻度作为空白对照。利用721-分光光度计于700nm波长处测定其吸收度以确定显色剂的用量,结果见图3。由图3可知,当显色剂的用量为0.7mL并继续增加时,其吸收光度变化不大,并维持在一定小范围的数值上。本实验选择显色剂的加入量为0.7mL。2.3静置时间的影响精确吸取溶液(Ⅰ)各5mL分别放入两支25mL的比色管中,在一支比色管中加入0.7mL的显色剂,使溶液由淡黄色变成靛蓝色,并加入纯水标定至刻度线,此靛蓝色溶液为样品溶液,另一支未加显色剂的溶液加水至刻度线为空白,用721-分光光度计测定其样品溶液不同时间下(在5～40min内)的吸光度,结果见图4。由图4可知,当静置时间到25min并继续延长时,吸光度值将不会有再大的增长,并维持稳定。结果表明,加入显色剂后静置25min,其测定结果较为理想。2.4测定氨基酚含量时比对在上述最优化条件下,按实验方法改变溶液中对氨基酚的加入量,测定吸光度并绘制标准曲线,其测定结果见图5。实验表明对氨基酚含量在3～23μg/mL时符合比尔定律,吸光度与浓度呈良好的线性关系。线性方程:A=0.1094×C[SA]+0.0077,R2=0.9973。2.5碳酸钠溶液配制取药品“对乙酰氨基酚片”一片,将药品碾碎,精确称取其质量(2.3759g),放入100mL烧杯中,加10mL浓盐酸,加10mL水,水浴加热75min,置于1000mL容量瓶中,用按1.2.1的方法配制的碳酸钠溶液标定至刻度线。精确吸取溶液各5mL依次放入5支比色管中,加入显色剂0.7mL,加水至刻度线,另做一份空白溶液,静置25min后,利用721-分光光度计于700nm处,测定吸光度,其测定结果表1。由表可知,该药品“对乙酰氨基酚片”的对氨基酚平均浓度为12.7μg/mL,最大相对标准偏差为0.6%。2.6重现性及溶液稳定性精确吸取3.5配置的溶液各5mL,分别放入两支比色管中,一支加入0.7mL的显色剂,加水稀释至刻度线,另一只加蒸馏水稀释至刻度线做空白,静置25min,在最大吸收波长700nm处,利用721-分光光度计测定其吸光度,结果见表2。由表2可知,其相对标准偏差为0.7%,实验表明该方法的重现性及溶液稳定性良好。可以进入下一步实验,回收率实验。2.7显色剂用量的测定由1.2.2溶液配制出浓度为0.004mg/mL的对乙酰氨基酚溶液a,并测定其吸光度,再以2.5的溶液配制出浓度为0.005、0.01、0.015mg/mL并标记为A,B,C三组溶液。精确吸取a溶液各5mL分别放入6支25mL的比色管中,另取A溶液各5mL加入比色管中,再取显色剂各0.7mL置于5支比色管中,分别以蒸馏水标定至刻度线,另外一支做空白对照,静置25min,在波长700nm处测定其吸光度。分别对B,C溶液做以上步骤,根据线性方程求出测得量,结果如表3。由表3可知,各个浓度的回收率在98.5%～99.5%之间,其结果表明此方法的回收率良好。3吸光度的测定