维生素c测定方法

维生素C的测定办法郑世豪{摘要}：维生素C亦称抗坏血酸，含有氧化还原功效，广泛参加细胞间质的合成及解毒过程等作用，它能协助减低臭氧、二氧化碳等空气污染毒性克制膳食中有致癌作用的亚硝胺的合成，还含有减少血铅浓度的作用，既能保持皮肤弹性，延缓衰老，又有助于消除人体不可缺少的营养素之一，故许多人把它作为防病治病的灵丹妙药，殊不知应用合理与否，会产生不同的作用。{核心词}：维生素C测定原理、检测办法引言维生素C是可溶于水的无色结晶，是一种分子构造最简朴的维生素。维生素C有防治坏血病的功效，因此在医药上常把它叫做抗坏血酸。维生素C在水溶液中易被氧化，在碱性条件下易分解，在弱酸条件中较稳定，维生素C开始氧化为脱氢型抗坏血酸(有生理作用)。维生素C能保持巯基酶的活性和谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。其广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为丰富。精确测定维生素C的含量，对饮食健康、医疗保健都含有十分重要的意义。本文总结近年来的文献报道维生素C测定办法重要有滴定法、荧光法、光度分析法、高效液相色谱法。滴定法测定维生素C测定原理2，6一二氯靛酚法和碘量法是较常见的滴定测定维生素C的办法。还原型抗坏血酸还原染料2，6一二氯靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2，6一二氯靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原原则2，6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。碘量法的原理：维生素C涉及氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种，当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子，随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子能够使含批示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。测定操作2，6一二氯靛酚法：取适量的样品可食部，加入100mL2%草酸溶液，制成匀浆。取同同样品匀浆10g，加入1%草酸溶液20mL，摇匀，用滤纸过滤，取5mL过滤液于锥形瓶中，用2，6一二氯靛酚钠盐溶液滴定(1mL≈mgVitC)，以淡红色存在30s内不褪色为滴定终点。统计2，6-二氯酚靛酚钠盐溶液的消耗量，根据成果计算出样品中维生素C含量(mg/100g)。碘量法的原理：维生素C涉及氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种，当用碘滴定维生素C时，所滴定的碘被维生素C还原为碘离子，随着滴定过程中维生素C全被氧化，所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子能够使含批示剂（淀粉）的溶液产生蓝色，即为滴定终点。荧光法测定维生素C测定原理：Deutsch和Weeks曾经报道过一种检测维生素C的荧光分析法(OPDA)，并被指定为维生素C的典型荧光分析法。在该办法中，维生素C先被活性炭(Norit)氧化为脱氢抗坏血酸(DHAA)，DHAA再与荧光底物邻苯二胺(OPDA)结合生成荧光产物，通过对该荧光产物的检测实现对维生素C的定量分析。孙振艳等[1]提出了一种新的测定维生素C的荧光分析办法。基于维生素C被Cu2+氧化为DHAA，DHAA进一步与苯甲酸及十六烷基三甲基溴化铵产生荧光协同增敏作用，通过对体系荧光强度的测定进行维生素C的定量分析。测定操作：荧光分析法(OPDA)的测定办法：称取一定量样品，研磨后用水浸泡，取清液加入适量1%草酸溶液，振摇约3min，加入0.2g已解决好的活性炭再充足振摇约3min后过滤，滤液加于两个25mL比色管再加入缓冲溶液,，其中一管加入硼酸溶液(即空白)摇匀，放置15min后，两管均加入邻苯二胺溶液10mL，避光放置30min待测。样品荧光强度减去空白荧光强度值即为样品相对荧光强度值。孙振艳等的荧光分析法：在25mL比色管中依次加入0.6mLCuSO4溶液，2.0mL十六烷基三甲基溴化铵溶液，2.0mL苯甲酸溶液，一定体积的维生素C原则溶液，，5.0mLNaOH-邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液，用蒸馏水定容，摇匀。在35℃恒温水浴中加热30min，将溶液流水冷却至室温，激发波长为308nm，在发射波长408nm处，测量荧光强度F，以不含维生素C的试剂空白为F0，计算Δ光度分析法测定维生素C测定原理2，4-二硝基苯肼法和钼蓝比色法是常见测定维生素C的一种光度分析法。2，4-二硝基苯肼法的原理是总维生素C涉及还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸，样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。钼蓝比色法是测定果蔬中还原型维生素C含量的一种惯用办法，因偏磷酸和钼酸铵反映生成的磷钼酸铵经还原型的维生素C还原后生成亮蓝色的络合物，通过分光比色能够测定样品中还原型维生素C的含量。测定操作2，4-二硝基苯肼法：取适量的样品可食部，加入100mL2%草酸溶液，制成匀浆。取匀浆20g(含1~2mg抗坏血酸)置入100mL容量瓶中，用1%草酸溶液定容，混匀后过滤。取25mL过滤液放入有2g活性炭的25mL比色管中，振摇1min，过滤。然后取10mL此氧化提取液，加入10mL2%硫脲溶液，混匀。按照GB12392-90中呈色反映办法，用分光光度计进行比色，根据成果计算出样品中抗坏血酸含量。按下式计算样品中Vc的含量:X=c·Vm×F×1001000。X—样品中总抗坏血酸含量，mg/100g；c—由原则曲线查得或回归方程算得“样品氧化液”总抗坏血酸的浓度，μg/mL；V—试样用1%草酸溶液定容的体积，mL；F—样品氧化解决过程中稀释倍数；m—试样质量，g。钼蓝比色法：精确称取100g样品，加入草酸－EDTA溶液，经捣碎后移入100mL容量瓶，定容，过滤，吸取2mL上清液于50mL容量瓶中，加入1mL的偏磷酸－醋酸溶液，5％的硫酸2．0mL，摇匀，加入4mL钼酸铵，以去离子水定容至50mL，20min后测定吸光度。参考文献:[1]. 陈晓红,碘量法测定维生素C含量微型实验研究.广东微量元素科学,(03).[2]. 肖彦春等,测定蔬菜中还原型维生素C两种办法的比较.湖北农业科学,(05).[3]. 刘军凯等,常见蔬菜中维生素C含量的研究.广东微量元素科学,(04).[4]. 张冬梅等,对新鲜果蔬中维生素C的测定成果影响因素研究.江西化工,(01).[5]. 张秀梅等,高效液相色谱法测定菠萝果实维生素C含量.福建果树,(01).[6]. 薛萍,果蔬中维生素C测定办法的比较研究.广东轻工职业技术学院学报,(04).[7]. 刘荣森与刘建超,果蔬中维生素C含量的测定办法.河南农业,(02).[8]. 刘绍俊等,钼蓝比色法测定沙田柚果肉中还原型维生素C含量的研究.北方园艺,(01).[9]. 孙振艳等,荧光分析法测定维生素C.化学分析计量,(04).[10]. 陈昌云,李小华与刘莉莉,高效液相色谱法测定蜜柚中维生素C的含量.化工时刊,(08).[11]. 王爱月,张向兵与李发生,高效液相色谱法测定食品及保健品中维生素C含量的研究.中国卫生检查杂志,(10).[12]. 凌育赵与刘经亮,猕猴桃果酱中维生素C测定办法的比较研究.中国调味品,(02).[13]. 刘长建,青椒中维生素C的高效液相色谱分析.大连轻工业学院学报,(03).[14]. 吴春艳,水果中维生素C含量的测定及比较.武汉理工大学学报,(03).[15]. 李秋菊,王亚红与刘秀萍,维生素C的测定办法.太原师范学院学报(自然科学版),(01).[16]. 崔香与寇雪玲,荧光分析法测定枸杞中维生素C.青海师范大学学报(自然科学版),(02).[17].