饲料中添加己烯雌酚的研究进展

饲料中添加己烯雌酚的研究进展

二苯基乙醇（de）是一种合成雌花。它的化学名字为1、2-双醇（4-羟基苯基）-1、2-二乙基烯，以及无色结晶或白色结晶性粉末。这是脂肪性材料。在兽医临床上,己烯雌酚主要被用于诱导发情,促生长(育肥)等,但它具有导致畸胎、癌瘤等严重的毒负作用,所以在70年代末许多国家纷纷禁止使用。但鉴于种种原因,社会上仍有人非法使用或滥用己烯雌酚,因此,必须建立一套健全的己烯雌酚残留检测方法,以确保动物性食品的安全。本文就己烯雌酚的临床应用、毒负作用、残留检测方法等作综述,并对未来的研究提出一些建议。1治疗脏器肺癌早在20世纪40～60年代,人类就已把己烯雌酚当作安胎药,用于预防妊娠妇女自发性流产,后来研究表明,产前使用己烯雌酚,会使后代雌性个体发生阴道腺癌;在人医上,己烯雌酚还被用于治疗前列腺癌。在兽医临床上,己烯雌酚主要用于治疗母猪乏情不孕、诱导母兔发情、治疗产蛋鸡停产、山羊育肥等;在国外,除欧盟以外的许多国家:美国、加拿大、澳大利亚、新西兰等都曾把人工合成雌激素(包括DES)用作促生长剂;据报道美国大约有63%的肉牛埋植了促生长激素;Martindale也曾报道己烯雌酚用于家畜育肥;但是,己烯雌酚用于促生长已引起争议,一些国家已禁止DES用作促生长剂,如美国食品药物管理局(TheUSFoodandDrugAdministration,FDA)早在1979年就已禁止己烯雌酚用于催肥。2己烯成虫的毒负作用己烯雌酚是人工合成雌激素中作用较强的一种,据报道己烯雌酚的药效约为17-β雌二醇的10倍。有关己烯雌酚的毒负作用,国内报道很少,国外则较多。其毒负作用大致有:致畸、致癌、干扰内分泌、影响生殖、性别分化及生长发育等。2.1树立精子增殖或复配Giusti等报道:妊娠期服用己烯雌酚,下一代(不管是雄性还是雌性)的生殖器官都会发生畸变;GeorgeP.Daston等报道:有意或无意使用高或低剂量的人工合成雌激素己烯雌酚,对人或动物的繁殖机能和生长发育会带来不利的影响,还会降低精液的品质、增加泌尿生殖系缺陷的发生概率;Toppari等报道:妊娠期应用己烯雌酚治疗疾病,会影响后代雄性个体精子的数量和质量;Halldin等和CeciliaBerg等分别报道:将己烯雌酚注入鹌鹑胚蛋的蛋黄中,结果发现后代雄性个体出现雌性化。2.2认识己烯成虫是经睾丸污染的人体性研究Herbst及Hatch等分别报道:妊娠期使用己烯雌酚,后代雌性个体会发生阴道腺癌和子宫颈鳞状瘤;国际癌症研究机构也已确认己烯雌酚是经胎盘致癌的,并且把它列为人类致癌物质;Marselos和Tomatis对大鼠和小鼠分别进行试验,在产前使用己烯雌酚,结果发现,后代成年后均发生癌变,证实了己烯雌酚可以经胎盘使后代致癌;GerardoPiroli等报道:慢性接触己烯雌酚的F344大鼠会导致垂体瘤(DES-T)的发生。2.3己烯成虫对c6大鼠免疫指标的影响Migliaccio等报道:对妊娠9～16天母鼠注射己烯雌酚100μg/kg·wb或产后1～5天仔鼠注射己烯雌酚2μg/只,结果发现,雌仔鼠成年后的破骨细胞数量及抗酒石酸磷酸酶的活性明显降低;Tas等和Jan等分别报道:己烯雌酚会使C6大鼠的神经胶质瘤细胞内的钙离子水平升高及影响肾小管细胞内的钙离子水平;Tsutaui等报道:应用己烯雌酚治疗,会导致动物机体细胞的非整倍体变异及变形,这可能也是己烯雌酚致癌的原因;Colerangle等报道:应用己烯雌酚处理大鼠,结果发现,大鼠的乳腺细胞显著增生,乳腺细胞结构由不成熟向成熟分化也明显增多,乳腺上皮细胞的周期性动力学发生紊乱;Luster等报道:己烯雌酚会对试验动物(小鼠)的免疫系统功能产生影响;Piersma等试验表明:产前应用己烯雌酚处理大鼠,随着己烯雌酚剂量的加大,对胎儿生长发育的毒负作用呈增强趋势,表现为胎儿的成活率降低和初生重减小,但对免疫系统没有发现明显的毒负作用。3非人体药残留检测雌激素分为天然雌激素和人工合成雌激素,多数天然雌激素在动物体内存在时间短,易被肝脏分解,不易残留;而人工合成雌激素(如DES)通常稳定,在体内滞留时间长,因为是亲脂性物质,易在人和动物的脂肪及组织中残留。20世纪70年代后期,许多国家都不允许在可食性肉制品及相关的畜产品中使用己烯雌酚,但社会上仍有非法使用现象。因此,必须建立一套灵敏、精确、特异性的检测方法,确保畜产品食用安全。目前国内外常用的己烯雌酚残留检测方法有:放射免疫法(RIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、气相色谱-质谱联机法(GC-MS)等。下面就几种常用的检测方法作介绍。3.1免疫分析法用于筛选性检测己烯雌酚的免疫分析法有放射免疫法、酶联免疫吸附法。其中RIA是较早用于己烯雌酚残留的筛选性检测方法。Hoffmann等报道应用RIA检测猪肌肉、肝脏、肾脏组织中的己烯雌酚残留,检测限为0.029×10-10～0.069×10-10。RIA具有高度灵敏性,适合于批量检测,但由于它是用放射性同位素作标记物,要求实验条件较苛刻,同时放射性同位素对实验员也存在一定的伤害。因此,随着免疫分析技术的进步,ELISA已取代RIA用于己烯雌酚的残留检测。WajinN.Sawaya等用ELISA对绵羊尿液和鸡肉中的己烯雌酚残留进行检测,检测限分别为0.2×10-10和0.1×10-10,而且对呈阳性的尿样和肉样用GC-MS作确证检测,结果没有发现假阳性。3.2高效液相色谱法HPLC具有特异性好、选择性高和灵敏度高等优点,是一种常见的残留检测方法。HPLC用于己烯雌酚残留的检测,国内外均有不少报道。陈永红等应用HPLC检测保健口服液中的20种甾体激素,其中己烯雌酚的检测限为0.02μg/ml;赵惠兰等应用HPLC检测猪肉及罐头中的己烯雌酚,最小检出量为0.02μg,回收率在97.0%～101.5%之间;林奕芝等报道用HPLC法同时测定肉与肉制品中五种雌激素残留,其中己烯雌酚的检出限为1.5μg,平均回收率为86.2%;李薇等应用高效液相色谱法测定儿童保健品中己烯雌酚,最低检出限为0.06μg,平均回收率为93.1%;在国外,Reuvers等报道应用HPLC电化学检测器对残留在可食性动物组织中的己烯雌酚进行检测,其检测限为0.10～0.20μg/g,平均回收率为66%。3.3气相色谱法GC也是一种有效的己烯雌酚残留检测方法。而GC-MS由于具备灵敏度高、特异性强和精确度高之优点,通常被用作己烯雌酚残留检测的最终确证分析方法。在我国,郭志峰等人报道用GC-MS对鸡蛋中残留的己烯雌酚进行检测,其检测限为0.05×10-10,回收率为86.3%。基于对己烯雌酚的临床应用、毒负作用及其残留检测方法的认识笔者提出如下建议:3.4己烯雌酚治疗疾病的临床应用,应严格控制剂量。同时必须加强管理,提高认识,杜绝滥用和非法使用。3.5国外对己烯雌酚的毒负作用进行了大量的相关实验,已有较为深入的研究;但是,对于己烯雌酚产生毒负作用的内在机制或分子生物学机制,还只处于种种猜测,有待于进一步研究。3.6本人认为如何准确快速有效地检测己烯雌酚残留,也有待于进一步完善。酶联免疫吸附法具有简便、快速、灵敏、高特异性等优点,是筛选性检测可食性动物食品中己烯雌酚残留的有效方法,但由于ELISA法是基于抗原抗体竞争性结合这一原理,当代谢中部分己烯雌酚代谢产物抗原决定簇未变化而被当