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PAGEPAGE1第五章采购需求一、采购标的需实现的功能或者目标,以及为落实政府采购政策需满足的要求(一)采购标的需实现的功能或者目标:本项目为北京市神经外科研究所二批试点项目-脑干胶质瘤多中心临床大数据研究暨多路径发生机制及精准诊疗转化研究项目-3基础医学研究服务采购项目服务采购,投标人应根据招标文件所提出的技术规格和服务要求,综合考虑,以技术先进的技术、优良的服务和优惠的价格,充分显示自己的竞争实力。(二)为落实政府采购政策需满足的要求促进中小企业发展政策:根据《政府采购促进中小企业发展管理办法》规定,本项目采购服务由小型或微型企业承接的,投标人应出具招标文件要求的《中小企业声明函》给予证明,否则评标时不予认可。投标人应对提交的中小企业声明函的真实性负责,提交的中小企业声明函不真实的,应承担相应的法律责任。(注:依据《政府采购促进中小企业发展管理办法》规定享受扶持政策获得政府采购合同的小微企业不得将合同分包给大中型企业,中型企业不得将合同分包给大型企业。)监狱企业扶持政策:投标人如为监狱企业将视同为小型或微型企业,且所投产品为小型或微型企业生产的,应提供由省级以上监狱管理局、戒毒管理局(含新疆生产建设兵团)出具的属于监狱企业的证明文件。投标人应对提交的属于监狱企业的证明文件的真实性负责,提交的监狱企业的证明文件不真实的,应承担相应的法律责任。促进残疾人就业政府采购政策:根据《三部门联合发布关于促进残疾人就业政府采购政策的通知》(财库〔2017〕141号)规定,符合条件的残疾人福利性单位在参加本项目政府采购活动时,投标人应出具招标文件要求的《残疾人福利性单位声明函》,并对声明的真实性承担法律责任。中标、成交投标人为残疾人福利性单位的,采购代理机构将随中标结果同时公告其《残疾人福利性单位声明函》,接受社会监督。残疾人福利性单位视同小型、微型企业。不重复享受政策。鼓励节能政策:投标人的投标产品属于财政部、发展改革委公布的“节能产品政府采购品目清单”范围的,投标人需提供国家确定的认证机构出具的、处于有效期之内的节能产品认证证书。国家确定的认证机构和节能产品获证产品信息可从市场监管总局组建的节能产品、环境标志产品认证结果信息发布平台或中国政府采购网()建立的认证结果信息发布平台链接中查询下载。鼓励环保政策:投标人的投标产品属于财政部、生态环境部公布的“环境标志产品政府采购品目清单”范围的,投标人需提供国家确定的认证机构出具的、处于有效期之内的环境标志产品认证证书。国家确定的认证机构和环境标志产品获证产品信息可从市场监管总局组建的节能产品、环境标志产品认证结果信息发布平台或中国政府采购网()建立的认证结果信息发布平台链接中查询下载。二、采购标的需执行的国家相关标准、行业标准、地方标准或者其他标准、规范无三、采购标的的数量、采购项目交付或者实施的时间和地点(一)采购标的的数量包号品目号标的名称数量是否接受进口产品11-1空间转录组测序40例否1-2单细胞核转录组测序40例否(二)采购项目交付或者实施的时间和地点:1、采购项目(标的)交付的时间:合同签订后7个日内和相应科室对接;2、采购项目(标的)交付的地点:北京市神经外科研究所指定地点。四、采购标的需满足的服务标准、期限、效率等要求(一)采购标的需满足的服务标准、效率要求(1)配合采购人,完成标本检测工作,满足检测需求;(2)在采购人相关人员的指导下,专人和对接科室完成标本交接工作。(二)采购标的需满足的服务期限要求1.服务期限:自样本收取之日起45日内交付数据(三)采购标的需满足的服务效率要求1.在采购人方要求期限内出具准确的检测报告;2.具备客服部,且一周七天均可对采购人相关人员的问题进行实时响应;3.投标人可提供7*24*365天(含节假日)接收标本服务;4.及时完成项目耗材的配送,不延误采购人使用。五、采购标的的验收标准1.投标人实验操作人员的数量和条件符合采购人要求;2.投标人具备的实验设备符合采购人要求;3.有效处理检测项目问题,不对采购人构成经济和社会声誉影响;4.达到采购人要求的服务和质量标准。六、采购标的的其他技术、服务等要求1.投标人接收标本后,送交报告时间:投标人应在投标文件中清楚表明是否响应采购人报告周期的要求,并需征得采购人相关科室的同意;2.投标人可提供标本冷链运输(冷藏-20至-40℃);3.采购人不定期对投标人进行质量监控;4.投标人可提供7*24*365天(含节假日)接收标本服务;七、采购标的需满足的具体要求:第1包品目1-1空间转录组测序一、供应商具有的硬件配置1.冷冻切片机;2.正置荧光扫描显微镜;3.烤片机;4.深孔PCR仪;5.恒温干燥箱;6.生物安全柜;7.核酸分析仪器;8.测序仪;9.服务器:配置不低于1500的运算核心、15TB的运行内存。二、空间转录组项目详细技术要求1.技术要求:▲1.1超高分辨率:两个检测Spot点中心距离不高于1um,达到单细胞(直径10um)级分辨率。1.2高组织兼容性:对人、鼠等多物种多组织类型均适用。▲1.3整个切片转录本信息捕获:标准芯片可对10×10mm内整个切片的转录本原位信息捕获,且可申请30×40mm面积以内的切片进行定制化实验。1.4对合格样本的冷冻切片进行转录本信息捕获、文库构建并完成测序,数据量不少于3Greads/样本。2.测序分析:2.1通过使用BarcodeMap工具将存储在FASTQ文件中的原始测序reads的CID与STOmicsChipMask文件包含的CID进行匹配,为CID能够匹配的reads添加坐标信息。ValidCIDReads过滤接头后,得到CleanReads;2.2使用STAR工具将CleanReads与相应物种的参考基因组进行比对,并使用Bam2Gem工具对比对结果进行基因注释和基因表达定量分析,得到基因表达矩阵。表达矩阵经TissueCut工具处理,勾画组织轮廓,并提取组织区域内的表达数据,生成样本组织覆盖区域基因表达矩阵;2.3表达矩阵经Gem2Gef工具处理后在StereoMap可视化系统展示基因表达热图,查看基因在组织上的空间位置和表达情况;2.4得到样本组织覆盖区域的基因表达矩阵后,使用Stereopy或者Seurat工具的聚类模块进行降维聚类,筛选差异高表达基因;2.5基因注释分析:GO注释分析;KEGG注释分析;Reactome富集分析;2.6通过SingleR数据库进行细胞类型自动化注释;2.7通过CellphoneDB工具进行细胞网络互作分析;2.8拟时序分析及基因表达量动态变化;2.9通过单细胞转录组数据注释空间转录组细胞类群(需要单细胞分析结果*.rds文件);2.10通过已知Marker基因校正细胞类群(需提供Marker基因);2.11GSEA富集分析,对特定的类群表达基因进行富集分析;2.12各簇细胞组分分析,对比不同类群细胞组成比例的差异(需要在细胞注释的基础上展开);2.13基因表达量动态变化分析(针对特定需求的基因分析);2.14细胞周期分析(需要提供相关Marker基因);2.15组间差异表达基因分析(需要有实验组对照组设计);2.16细胞类型人工校正;▲2.17空间转录组+单细胞核转录组联合分析;2.18单细胞转录组+ATAC分析;2.19跨物种分析(单细胞水平上的物种差异和进化关系);▲2.203D重构(整合多张空间切面,使用计算机的方法对他们进行配准,构建组织的3维空间表达模型)。第1包品目1-2单细胞核转录组测序一、供应商具有的硬件配置1.水平离心机;2.荧光显微镜;3.倒置显微镜;4.PCR仪;5.核酸分析仪器;6.生物安全柜;7.测序仪。二、单细胞核转录组测序项目详细技术要求1.技术要求:1.1单细胞核转录组应基于液滴微流控体系;1.2单样本实验可获细胞核数>6000;标准细胞系样本捕获基因数>4000/细胞,细胞回收率>30%,双胞率<5%;1.3对合格的单个样本进行单细胞核捕获、文库构建并完成测序,数据量不少于100G。2.测序分析:2.1数据质控:通过scRNA_parse,STAR,PISA进行数据的质量控制;2.2数据标准化:单细胞采样具有dropout,使用normalization的方法消除测序不均匀给基因表达丰度带来的影响;2.3高变基因选择和PCA降维:计算出在数据集中表现出细胞间高差异特征的子集和确定用于进行聚类分析的PCA维度;2.4细胞聚类:将细胞类别进行分组成簇;2.5maker基因鉴定:每个cluster细胞中表达比例高,且表达量高的基因;2.6marker基因分析:对每个cluster的marker基因,利用不同形式进行展示(山脊图,小提琴图,气泡图和点阵图等),并对每个cluster中最显著的20个marker基因,进行kegg和GO富集分析,进行表达量热图绘制;2.7细胞类型注释:确定每簇细胞的类型;2.8功能富集分析:每个cluster的差异基因的GO,KEGG功能富集;2.9蛋白互作分析:对差异表达基因进行编码蛋白间的互作关系;2.10多样本整合分析:整合多个样本的单细胞数据,默认使用使用MNN+CCA提供的方法;2.11多样本整合后细胞聚类:将细胞类别进行分组成簇;2.12多样本整合后细胞类型注释:确定每簇细胞的类型;2.13多样本整合后marker基因鉴定:每个cluster细胞中表达比例高,且表达量高的基因;2.14多样本整合后marker基因分析:对每个cluster的marker基因,利用不同形式进行展示(山脊图,小提琴图,气泡图和点阵图等),并对每个cluster中最显著的20个marker基因,进行kegg和GO富集分析,进行表达量热图绘制。同时,进行样品中各个细胞cluster分类比例

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