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文档简介
10十一月202316-1紫外-可见分光光度计一、主要部件
Primaryassembly二、仪器类型和光学性能
TypesandperformanceUV-Visspectrophotometer10十一月202316-2一、仪器的主要部件光源碘钨灯氘灯单色器测量池参比池样品池光电倍增管数据处理和仪器控制光源样品池单色器检测器数据处理仪器控制10十一月202316-3光源的基本要求:光强、稳定、连续辐射、波动小。钨和卤钨灯:340~2500nm,用于可见光区;氢灯和氘灯:150~400nm,多用在紫外区。1、光路设计的特点和光源光路特点:光源、单色器、吸收池、检测器在同一光路上10十一月202316-42、单色器(Mnochromator)通常置于吸收池的前面!(可防强光照射引起吸收池中物质分解)其性能直接影响出射光纯度,进而影响灵敏度、选择性和标准曲线的线性范围。(1)棱镜(2)光栅:(全息光栅)(3)干涉仪?10十一月202316-53、吸收池(Cell,Container):玻璃:只适于可见光区。石英:适于紫外区和可见光区;空白+试样吸收池要匹配:同厚度与通透性10十一月202316-6光电池:硒光电池-可见光硅光电池-紫外、可见光光电管:紫敏光电管:铯阴极,200-625nm
红敏光电管:银氧化铯阴极,625-1000nm光电倍增管:PMT光多道二极管阵列检测器:DAD4、检测器10十一月202316-7光多道二级管阵列检测器10十一月202316-8信号放大数据转换、处理打印输出基于光电子技术基于化学计量学理论和方法基于计算机、软件与网络技术5、讯号处理和显示器10十一月202316-9二、仪器类型和光学性能
1、主要的仪器类型(1)单波长分光光度计
单光束型特点:一束单色光,给定波长处测量,不能全波扫描。双光束型(空间分隔、时间分隔)特点:自动记录,快速全波扫描。光束几乎同时通过样品池和参比池,可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响,适合于结构分析。10十一月202316-1010十一月202316-11(2)双波长分光光度计切光器使双波长光(Δλ=1~2nm)交替通过同一吸收池,并测得吸光度差ΔA。ΔAB1和ΔAB2分别为在λ1和λ2处的背景吸收,当λ1和λ2相近时,背景吸收近似相等。特点:混合、混浊试样、无需参比液10十一月202316-12三种紫外分光光度计的对比10十一月202316-132、仪器的光学性能波长范围:波长准确度:波长重现性:透光率和吸光度测量范围:光度准确性:透光率测量误差值光度重现性:分辨率:单色器分辨2条靠近曲线的能力。260nm处△λ=0.3杂散光:测光信号较弱的波长处所好杂散光的强度百分比(220nm1%NaI≤0.5%)10十一月202316-14(1)波长标度校正:使用镨-钕玻璃(可见区)和钬玻璃(紫外光区)进行校正。利用某些元素辐射产生的强谱线进行校正;利用苯蒸气在紫外区有很特征的吸收进行校正。3、仪器的校正和检验10十一月202316-15(2)吸光度标度校正:通常采用K2CrO4
标准液校正(25℃,于不同波长处测定0.05mol/L的硫酸溶液)的吸光度A,调整光度计使其A达到校正表指定的吸光度。(我国药典标准)(3)吸收池的校正(配对):
将吸收池A、B内分别装入试样和参比溶液测量吸光度,倾出液体洗净后对调装入参和比试样再次测定。要求前后测定小于1%。10十一月202316-16(4)杂散光的检验:在较短波长下测定选定溶液的透射比T。药典标准采用一定浓度的NaI(220nm)或NaNO2(380nm)溶液检查,透射比应小
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