食品安全快速检测技术进展

食品安全快速检测

技术进展汇报内容1食品安全检测技术概要

免疫快速检测技术进展生化显色检测技术23食品筛查确证检测报告仪器检测技术GC/GC-MSLC/LC-MSHPLC/HPLC-MSGC-AAS/HPLC-AASHPIC/AAS

（一）食品安全检测技术概要快速检测技术免疫检测技术分子生物学技术生物传感器技术生化检测技术（二）免疫快速检测技术进展放射免疫分析酶免疫分析化学发光免疫分析荧光免疫分析法时间分辨法荧光偏振法荧光吸收法荧光淬灭法等胶体金免疫分析法

1、酶联免疫分析（ELISA）原理：待测物酶标二抗底物显色反应读数读数包被抗体包被抗原待测物酶标抗体底物显色反应双抗体夹心法测定大分子物质（微生物）竞争法测定小分子物质（农兽药）1、酶联免疫分析（ELISA）特点：灵敏（ng/mL），快速（30-90min），简便（前处理简单）等应用范围：化学有害物及部分致病微生物发展趋势：将快速发展，单残留→多残留克伦特罗ELISA试剂盒呋喃它酮ELISA试剂盒苏丹红ELISA试剂盒2、胶体金免疫分析（GICA）原理：2、胶体金免疫分析（GICA）特点：快速（3-10min），简便，成本低，无需设备应用范围：化学有害物及部分致病微生物发展趋势：成为快速筛查的主要手段之一克伦特罗胶体金试纸条阴性阳性3～5min3、时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）原理：利用具有独特荧光特性的镧系元素(如铕Eu、铽Tb、钐Sm等)及其螯合物为示踪物，标记抗体、抗原、激素、多肽、蛋白质、核酸探针及生物细胞。ELISATRFIA3、时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）特点：超灵敏（pg/mL），快速（30-90min），简便（前处理简单）等应用范围：化学有害物及部分微生物发展趋势：随着配套仪器价格降低，将迅速发展瘦肉精TRFIA试剂盒

检出限：0.01ng/mL检测时间：60-75min变异系数<10%回收率105%4、荧光偏振免疫分析（FPIA）原理：无示踪物，无荧光抗体示踪物荧光偏振强度大特异性结合小分子抗原荧光偏振强度小F

抗原

抗体F

抗原

抗体荧光标记的小分子抗原在溶液中旋转速度快，荧光偏振光强度小。当荧光标记的小分子抗原与其相应抗体结合后，所形成的大分子在溶液中旋转速度变慢，荧光偏振光强度增大。4、荧光偏振免疫分析（FPIA）原理：抗体抗体抗体抗体荧光偏振检测原理示意图荧光比标记抗原待测样品抗原偏振光4、荧光偏振免疫分析（CLIA）特点：均相反应，无需洗涤，检测时间短（10-30min），无需特殊前处理，易于自动化应用范围：化学有害物发展趋势：近年将被实际应用呋喃西林FPIA沈玉栋等，分析测试学报，2009，28，27-31

检出限：8.3ng/mL检测时间：<10min变异系数<10%5、化学发光免疫分析（CLIA）化学发光免疫分析检测原理示意图5、化学发光免疫分析（FPIA）特点：检测限低，比ELISA方法低一个数量级。操作步骤与ELISA方法相同。应用范围：化学有害物发展趋势：近年将被实际应用，替代现有ELISA试剂盒（三）生化显色检测技术酶法生物法其他1、酶抑制法（检测农药）原理：基于有机磷农药和氨基甲酸酯农药可以抑制胆碱酯酶活性，通过催化胆碱酯酶底物进行比色测定。产品：农药残留酶法速测卡与试纸条

1、酶抑制法（检测农药）特点：简便，快速，同时检测有机磷和氨基甲酸酯农药残留（多残留）；但灵敏度及准确度不如免疫分析发展趋势：因其优点，此法还将普遍使用，且将利用新技术手段生产高灵敏度抗干扰的胆碱酯酶2、微生物快速测试片原理：以选择性培养基为基础，添加特异性显色物质和抗生素，有利于目标菌在培养基上生长，并利用其细菌特有的生理生化反应，使培养基中指示剂产生颜色变化，将目标菌菌落与其他菌菌落区分，便于识别。应用范围：部分微生物操作示意图2、微生物快速测试片产品：美国3M公司petrifilmTMPlate系列微生物测试片2、微生物快速测试片产品：特点：快速（由原来的72h缩短到15h），可直观判断（三）分子生物学方法——聚合酶链式反应（PCR）原理：根据待测物的DNA特征保守序列，设计引物，PCR扩增，再通过荧光定量（荧光PCR）或免疫检测定量（免疫PCR）。PCR扩增示意图（三）分子生物学方法——聚合酶链式反应（PCR）特点：高度敏感性和特异性、操作简便快速、适用样品广泛/无需特殊前处理应用范围：食源性微生物快速检测：致病菌、病毒…动物疫病快速检测：支原体、衣原体…转基因食品快速检测：大豆、花生…（四）生物传感器原理：化学物质热光质量介电性质电极、半导体等热敏电阻光纤、光度计压电晶体表面等离子共振电信号分子识别信号转换器生物功能性膜生物传感器的工作原理固定化酶：酶传感器固定化抗体：免疫传感器固定化微生物：微生物传感器固定化寡链核苷酸：基因传感器（四）生物传感器特点：选择性好，灵敏度高，分析速度快，成本低，在线连续检测应用：环境水质检测：微生物传感器；抗生素残留：免疫传感器；食品分析（鲜度等）：酶传感器；生物医药：基因传感器。发展趋势：新材料、新工艺、多功能集成、智能化、仿生传感器（五）生物芯片技术——免疫芯片原理：包被在固相载体上的高密度抗原或抗体的微点阵，原理与ELISA基本一致。（五）生物芯片技术—