非洛地平固体分散体的制备及体外溶出度考察

非洛地平固体分散体的制备及体外溶出度考察

非洛比妥（feli）是一种新型的钙抗剂，是二羟吡啶药物的第三代产品。它主要用于抑制外伤性小动脉平滑肌细胞的内流，以及减少血管管的阻力，以治疗高血压。由于它对心脏收缩和心脏传导没有直接影响，因此没有导致体重性低血压。现在它被广泛应用于各种高血压和相关心脑血管疾病的治疗。该药亲脂性强(LogP=4.9),水中溶解度极低(约0.6ng·L-1),故提高药物的溶解度和溶出速度常是改善其口服吸收的首要步骤。固体分散技术在解决难溶性药物制剂的困难方面,受到了人们的特别关注,在难溶性药物与适宜的载体形成的固体分散物中,药物以微晶态、无定型态、胶体分散态或分子分散态存在,具有很大的分散度,当与胃肠液接触后,药物的溶出速度加快,可以促进药物的吸收,提高生物利用度。目前国内尚无有关非洛地平固体分散体的报道,国外已有研究人员采取该技术来提高非洛地平的溶出度,多利用亲水性聚合物,如羟丙甲纤维素(hydroxypropylmethylcellulose,HPMC),醋酸羟丙甲基琥珀酸脂(hydroxypropylmethylcelluloseacetatesuccinate,HPMCAS);或水溶性载体材料,如聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone,PVPk30)为载体制备分散体。其中,以纤维素类为载体,药物的溶出度是原料药的7倍左右,但由于该载体的溶胀作用,药物溶出速度缓慢;以PVP为载体制备的固体分散体,由于载体的水溶性,药物的溶出速度虽有较大提高,但由于载体本身对提高药物溶解度作用相对较小,而导致溶出程度受限。故如何制备更有效的固体分散体,能同时提高药物溶出的速度和程度,是提高非洛地平生物利用度的关键。近年来,表面活性剂由于具有对药物良好的溶解性能及促进吸收的特点,在固体分散体研究中越来越多地出现了载体与表面活性剂合用的报道。但随着表面活性剂用量的增加,制备的分散体流动性越来越差,不利于下一步的制备。本文采用固体分散技术,分别以PVPk30、泊洛沙姆(LutrolF68)、吐温-80(Tween80)与吸附剂为载体制备了非洛地平固体分散体,体外释放度实验考察了不同载体对药物溶出度的影响,并借助差示扫描量热法(differentialscanningcalorimetry,DSC)和X射线衍射对非洛地平在载体中存在的状态进行了研究。结果发现,所有固体分散体均能提高非洛地平的体外溶出度,特别是采用液态表面活性剂为增溶剂的分散体,通过加入具有吸附性能的载体,药物的溶出速度和程度都得到了极大的提高,同时分散体的流动性也有很大改善,适合于片剂,胶囊剂等固体剂型的进一步制备。该方法扩大了表面活性剂在固体分散体技术中的应用范围,为该技术提供了新的思路。1聚乙烯吡咯烷酮合成化合物ZRS-8G型智能溶出仪(天津大学无线电厂),TDP单冲压片机(上海第一制药机械厂),DSC-60差示分析仪(日本Shimadzu公司)。非洛地平(felodipine,批号20070901,浙江可思安制药厂),聚乙烯吡咯烷酮(PVPk30,德国BASF公司),泊洛沙姆188(LutrolF68,德国BASF公司),二氧化硅(SiO2,德国BASF公司),吐温-80(Tween80,北京益利精细化工有限公司),微晶纤维素(avicelPH101,日本AsahiKASEI公司),乳糖(lactose,德国Meggle公司),交联聚乙烯吡咯烷酮(crospolyvinylpyrrolidone,PVPP,德国BASF公司),无水乙醇(分析纯,沈阳市远航化工有限公司)。2方法和结果2.1罗地平含量测定的建立2.1.1检测波长的确定分别配制非洛地平、所用增溶剂、载体材料的无水乙醇溶液,在200~400nm紫外扫描,非洛地平在362nm处有最大吸收,且辅料没干扰,故选择362nm为检测波长。2.1.2标准曲线方程精密称取非洛地平对照品50.0mg置于容量瓶中,用无水乙醇配制成10.0ng·L-1的储备液,分别精密量取0.5、1.0、3.0、5.0、7.0、10.0mL置10mL量瓶中,无水乙醇定容至刻度,在362nm波长处测定其吸光度值,以吸收度值A对质量浓度ρ做线性回归,得标准曲线方程:ρ=61.1320A-0.5656(r=0.9993),线性:0.5~10.0ng·L-1。2.1.3超乙醇溶液配制精密称取非洛地平固体分散体(约相当于非洛地平5mg),于50mL容量瓶中,加无水乙醇适量,超声使非洛地平充分溶解,摇匀并定容至刻度。过滤后,取续滤液并稀释一定倍数,在362nm波长处测定其吸收度值,代入“2.1.2”条下标准曲线方程求得非洛地平的浓度,并计算含量质量分数。2.2物理混合物的制备药物与PVPk30、LutrolF68分别按照质量比1∶4混合,药物与Tween80,PVPP按照质量比1∶2∶5混合。2.3固体分散体的制备2.3.1无水乙醇溶液制备称取处方量的主药与载体PVPk30,将二者混合均匀,置于蒸发皿中,用适量无水乙醇溶解后,于80℃水浴中加热,搅拌,使乙醇挥发,待混合物至黏稠状态时,于冰浴中固化1h,然后置于真空干燥箱中干燥24h,取出,粉碎,过210μm筛后备用。2.3.2水浴加热加热称取处方量的主药与载体LutrolF68,先将载体置于蒸发皿中,于80℃水浴中加热。待完全熔化后,加入主药,长时间搅拌至药物颗粒消失,将熔融物倒入预冷的培养皿中,至冰浴中搅拌固化1h,然后置于真空干燥箱中干燥24h,取出,粉碎,过210μm筛后备用。2.3.3溶解溶液为单一称取处方量的主药与Tween80于蒸发皿中,加入适量的无水乙醇,超声,使溶解至澄清。分别以PVPP、胶态二氧化硅、微晶纤维素为吸附剂,按一定比例加到上述溶液中,磁力搅拌均匀后,将混合物转移到100mL梨形瓶中,旋转蒸发挥干溶剂,再转移到真空干燥箱中干燥24h,取出,粉碎,过210μm筛后备用。2.4溶出介质的选择预实验证明,按照USP30,以质量分数为1%的Tween80-水为释放介质,能够满足漏槽条件,但是药物释放较快,不同种类固体分散体之间的溶出行为差别并不明显,而以水为溶出介质,虽然不能满足漏槽条件,但可以明显区别各固体分散体之间的溶出差异,故本研究中,作者采用水作为溶出介质。取各处方固体分散体适量(相当于主药5mg),照《中华人民共和国药典》2005年版二部附录XC第一法,以500mL水为溶出介质,在37℃、100r·min-1条件下,分别于0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0h取样10mL(同时补充同温等量介质),经0.45μm滤膜过滤,续滤液于362nm波长处测定吸光度,测定结果代入标准曲线计算质量浓度,并换算成累积溶出率。2.4.1固体分散体的溶出情况以PVPk30为载体的物理混合物(质量比为1∶4)和固体分散体[m(Fel)∶m(PVP)=1∶4、1∶6、1∶8、1∶10、1∶12]的溶出情况如图1所示。非洛地平从固体分散体中的溶出速率和程度明显大于其物理混合物,且随着载体比例增大,溶出速度加快。当m(Fel)∶m(PVP)=1∶10时,1h内非洛地平在介质中的累积溶出量是相同溶出条件下其原料药的10倍左右。但继续增加载体的量时,对提高溶出速度改善不大。2.4.2不同载体的溶出情况以LutrolF68为载体的物理混合物(质量比为1∶4)和固体分散体[m(Fel):m(LutrolF68)=1∶4,1∶8,1∶10]的溶出情况如图2所示。非洛地平从固体分散体中的溶出速率和程度明显大于其物理混合物,且在药物与载体比例相同的前提下,以LutrolF68为载体的累积释放量高于以PVPk30为载体的分散体。药物与载体LutrolF68的质量比达到1∶8时,1h内药物累积释放量达到70%以上,是相同溶出条件下其原料药的12倍左右。与PVPk30相似,当m(Fel)∶m(LutrolF68)=1∶4时,继续增加载体的量时,对提高溶出度改善不大。2.4.3固体分散体的溶出固定主药与Tween80、吸附剂的质量比为1∶2∶5,考察吸附剂种类对分散体流动性以及药物释放的影响。分别采用如下吸附剂:微晶纤维素、胶态二氧化硅、乳糖、PVPP。从吸附性能角度讲,胶态二氧化硅>PVPP>微晶纤维素>乳糖。以乳糖为吸附剂所得分散体粉末粉体学性质很差,似有油状物附于表面,其他吸附剂所得粉末流动性较好。固体分散体的溶出情况如图3,根据溶出速率判断,使用微晶纤维素、胶态二氧化硅做吸附剂时,所得分散体溶出度较差,而使用PVPP时,溶出度有很大提高。以PVPP为吸附剂,改变Tween80用量,物理混合物和固体分散体[m(Fel)∶m(Tween80)∶m(PVPP)=1∶2∶5、1∶3∶5、1∶4∶5]的溶出情况如图4所示,随着Tween80用量的不断增加,药物的溶出度逐渐提高,当m(Fel)∶m(Tween80)∶m(PVPP)=1∶4∶5时,1h内药物累积释放量可以达到90%以上,极大的提高了药物的溶出度。2.5固体分散体的检测采用差示扫描量热法(DSC)测定药物在分散体中的状态。测试条件:以空铝坩为参考池,另一空铝坩埚为样品池,分别放入原料药、物理混合物、固体分散体(比例同物理混合物)各5mg~10mg,按程序升温加热(扫描速度:10℃·min-1,温度:20~300℃),记录曲线,判定固体分散体的形成。结果见图5-7。2.5.1药物与载体pvk30物理混合物pvk30的dsc曲线比较由DSC曲线图5可知,非洛地平原料药吸热峰为142.78℃,为非洛地平的熔点峰,PVPk30吸热峰为67.99℃,在药物与载体PVPk30物理混合物的DSC曲线中,均存在非洛地平,PVPk30吸热峰,而在二者形成的分散体DSC曲线中,药物的吸热峰消失,在72.59℃处出现一吸热峰,表明药物在分散体中的晶型发生了改变,可能是形成非结晶性无定形物。2.5.2药物与载体pv物理混合物pv-f65的dsc曲线由DSC曲线图6可知,非洛地平原料药吸热峰为142.78℃,为非洛地平的熔点峰,F68吸热峰为53.70℃,在药物与载体PVP物理混合物的DSC曲线中,均存在非洛地平,F68吸热峰,而在二者形成的分散体DSC曲线中,药物的吸热峰消失,在55.08℃处出现一吸热峰,表明药物在分散体中的晶型发生了改变,可能是以非结晶性无定形或分子状态存在。2.5.3dsc曲线检测药物的吸热峰由DSC曲线图7可知,在药物与载体物理混合物的DSC曲线中,药物存在吸热峰,空白辅料无吸热峰,而在分散体的DSC曲线中,吸热峰消失,表明分散体中药物可能以无定形或分子形式存在。2.6固体分散体的表征通过制备工艺、溶出度结果的比较,以Tween-80与吸附剂PVPP为载体制备的固体分散体,均优于以PVPk30、LutrolF68为载体的分散体,故选择此种分散体进行X射线衍射分析,以进一步了解固体分散体的分散性质。分别取非洛地平,空白辅料,物理混合物,固体分散体,采用Cu靶Kα射线,扫描速度:1.2°·min-1,加速电压:40kV,加速电流:200mA,2θ(°):3.0~45.0°,结果见图8。由图可知,非洛地平在10.209°和23.258°处吸收强度最大,另外在10.824°、26.441°处也有较强吸收;空白辅料无结晶峰;物理混合物谱图中,9.774、23.227、10.170、26.543°有吸收,与原料药的结晶峰位置很接近,但峰强度变化较大,且略有位移,可能是辅料与药物发生了一些相互作用;而从固体分散体图谱来看,药物结晶衍射峰消失,证明药物以无定形状态存在,固体分散体形成。3表面活性剂的选用a.采用溶剂法制备以PVPk30为载体的分散体过程中,由于溶剂的蒸发,溶液黏度不断增大,可以抑制药物晶粒的形成和长大,由DSC图知,药物在分散体中晶型发生转变,故溶出所需能量降低,溶出度较原料药显著提高;溶出溶液为过饱和溶液,故随着时间的延长而溶出率下降,曲线为过饱和曲线。泊洛沙姆188(LutrolF68)为非离子型表面活性剂,易溶于水,能与多种药物形成孔隙固溶体,从而加大药物的溶出,对药物的增溶效果好于PVPk30。以上述两者为分散体载体的不利因素在于,在用PVP制备共沉淀物的过程中,所得物粘稠,而F68为蜡状物,不易粉碎,损失较大,均不利于工业生产。b.熔融法制备分散体时,主药很难溶解于熔融的LutrolF68中,经过长时间搅拌,肉眼看不到药物颗粒,推测药物溶解于LutrolF68中,以分子形式存在,但在冷却固化的过程中,药物可能以无定形的形式析出,因为从溶出度结果来看,LutrolF68与Tween80虽同为表面活性剂,然而与以F68为载体制备的分散体相比,以Tween80与吸附剂作为载体的分散体对提高药物的溶出度有更好的效果。故本文选用表面活性剂Tween80为增溶剂。c.在分散体制备过程中加入表面活性剂Tween80,能增加药物溶解度,使其以分子形式存在于固体分散体中,可进一步提高溶出度。但由于常温下Tween80为液态,制得分散体