鱼氟乳油对黄曲条跳甲成虫触杀活性的影响

鱼氟乳油对黄曲条跳甲成虫触杀活性的影响

黄跳甲是重要的蔬菜害虫。它通常食用各种作物，如十字花科、茄子和豆类，并喜欢吃卷心菜、萝卜、卷心菜和其他蔬菜，以传播植物病害。由于其危害特性、生活方式较特殊,防治较困难,近年来危害呈上升趋势,而常规药剂抗药性不断增强,生产中亟需安全、高效、实用的控制技术和替代药剂。研究表明,植物源杀虫剂印楝素对黄曲条跳甲具有多种作用方式,防治效果明显,而酶抑制剂与某些常用杀虫剂混用可提高对抗性黄曲条跳甲成虫的防治,这有利于寻找该虫综合防治新策略。作者从高效、低毒、安全的植物源杀虫剂和不同类型作用特点的化学杀虫剂中筛选出增效混剂,并研究了其对黄曲条跳甲种群的控制效果。1材料和方法1.1材料表面1.1.1东南角坪山镇石井村制备蔬菜黄曲条跳甲成虫,采集于华南农业大学教学农场、深圳市龙岗区坪山镇石井村附近菜地,无明显抗性,在室内以新鲜无毒芥菜BrassicaalboglabraBailey叶片饲喂5天后供试。1.1.2药品、试剂与检测有机磷类:48%乐斯本乳油(毒死蜱,chlorpyrifos),美国陶氏益农公司;20%辛硫磷乳油(phoxim),安徽省毫州市康达化工厂;80%敌敌畏乳油(dichlorvos),河北新丰农药化工股份有限公司;25%爱卡士乳油(喹硫磷,quinalphos),瑞士山德士化工农药有限公司;3%米乐尔颗粒剂(氯唑磷,isazofos),先正达(中国)投资有限公司。拟除虫菊酯类:2.5%敌杀死乳油(溴氰菊酯,deltamethrin),艾格福(天津)有限公司;4.5%高效氯氰菊酯乳油(beta-cypermethrin),上海中西药业股份有限公司;20%氰戊菊酯乳油(fenvalerate),上海中西药业股份有限公司;10.8%凯撒乳油(四溴菊酯,tralomethrin),艾格福(天津)有限公司。氨基甲酸酯类:98%巴丹可溶性粉剂(cartap),日本武田药品工业株式会社。沙蚕毒素类:18%杀虫双水剂(bisultap),江苏省常州市丰登农药厂。新型杂环类:10%大功臣可湿性粉剂(吡虫啉,imidacloprid),南京第一农药厂;5%锐劲特悬浮剂(氟虫腈,fipronil),安万特杭州作物科学有限公司;94%氟虫腈原粉(fipronil),浙江海正药业股份有限公司。植物源杀虫剂:2.5%鱼藤酮乳油(rotenone),广西施乐农化科技开发有限责任公司;98%鱼藤酮原粉(rotenone)、纯度90%以上闹羊花素(rhodojaponinIII)和印楝素(azadirachtin),均由作者课题组提取、配制供试。6%鱼氟(rotenone-fipronil)乳油:将98%鱼藤酮原粉和94%氟虫腈原粉分别以丙酮和N,N-二甲基甲酰胺溶解,按所确定的混用增效配方,加入适当助剂配制而成。采用HPLC法测定制剂有效成分含量。检测条件:色谱柱:Φ4.6mm×250mm(id)不锈钢柱,内装C18填充物5μm;流动相:甲醇/水=70/30(v/v);流速:1.0mL/min,进样量10μL。氟虫腈检测波长为254nm,保留时间6.62min;鱼藤酮检测波长为280nm,保留时间8.8min。根据GB1603-1979、GB1600-1979和GB601检测,均符合制剂质量标准。1.2方法1.2.1试虫的浸提与测定采用浸渍法测定供试16种药剂对黄曲条跳甲成虫的触杀活性。取两端开口、直径(d)3cm、高度(h)10cm的指形管,放入10头CO2麻醉的试虫,两端用纱布封口,橡皮筋扎牢。每处理重复4次。供试药剂分别以蒸馏水稀释至100μm/mL,置于1L烧杯中,并在26℃水浴中保持50r/min往复振荡。将同一处理4次重复试虫同时浸入供试药液(烧杯中药液完全浸过指形管),30s后取出,立即用细毛笔将试虫全部挑入干燥的同等大小的指形管,管内放置5cm×6cm单层纸巾和新鲜无毒芥菜叶碟(d=1.3cm)2片。全部挑入后,纱布封口,橡皮筋扎牢。CK浸渍蒸馏水。处理后24、48h调查死亡虫数,按Abbott公式计算死亡率和校正死亡率。采用药膜法测定自制鱼氟乳油对黄曲条跳甲成虫的触杀活性。吸取一定量的鱼氟乳油,以丙酮为溶剂配制至设计浓度。吸取稀释药液0.3mL至一端封闭的指形管(d=3cm,h=10cm),迅速旋转使药液均匀接触到全部管壁内面,并将封口的纱布也以药液浸透,丙酮完全挥发后待用。根据管内壁表面积和药液量计算管壁涂布药量分别为0.45μg/cm2和0.75μg/cm2。放入试虫20头,CK以丙酮处理,每处理4次重复。计算处理后24、48h试虫死亡率和校正死亡率。1.2.2混合液剂配比的确定在预试验基础上,将98%鱼藤酮原粉与94%氟虫腈原粉先以丙酮溶解后,再配制成水溶液(丙酮含量<1%)溶解后,按不同配比混合,每种配比稀释5～7个梯度浓度。以上述浸渍法测定各配比对试虫LC50,按“共毒系数法”(co-toxicitycoefficient,CTC)判断增效作用。1.2.3试虫处理试验以点滴法测定鱼氟乳油对黄曲条跳甲成虫的LT50。以丙酮(含5%蒸馏水)配制鱼氟乳油50μg/mL药液,以昆虫微量点滴仪点滴药液至试虫中胸腹面,每虫点滴药液1μL,每处理重复5次,每重复试虫10头。CK点滴丙酮。试虫处理后放置于指形管,饲以新鲜无毒芥菜叶碟,处理后前2h每隔10min观察1次,此后每隔1h调查试虫死亡情况,直至处理后12h。根据处理时间与校正死亡率关系拟合回归直线,计算致死中时LT50(min)。1.2.4试虫液浓度的测定以丙酮为溶剂,配制鱼藤酮、氟虫腈以及鱼氟乳油相应浓度的药液,将新鲜、无毒的芥菜叶碟(d=1.1cm)浸入相应药液3s,CK以丙酮处理。晾干后,放入氧电极气室。将试虫100头(以CO2气体麻醉)立即放入氧电极气管中,并将气室遮光,测量观察电压值。每处理重复3次。氧电极测量的电压值代表呼吸熵,即整个体系中CO2与O2的体积比,呼吸熵的变化表征了对试虫呼吸作用的抑制效果,呼吸熵越大,电压值越高,说明体系中CO2浓度越高,呼吸抑制作用越强。1.2.5实验设计与施肥试验地点设在深圳市龙岗区坪山镇农业科技园,选取半年以上未使用任何农药的地块,整成每畦1.0m×5.0m的菜地,每畦用网纱围严(离地约1.0m),畦与畦之间垄沟间隔,垄沟内灌水。每畦芥菜约40株,长至6～8叶时试验。采用随机区组设计,每处理3次重复。以“Z”形取样法调查每株芥菜的黄曲条跳甲成虫数,调查中注意减少对试虫的惊扰。以没得比(Super-Green)-16型背负式喷雾器进行喷雾,喷药量按750kg/hm2计算,对照用清水喷雾。试验期间正常施肥、浇水。分别于施药前和施药后第1、3、5、7、10、14天调查每株芥菜存活虫数,按Abbott公式计算虫口减退率和防治效果。2结果与分析2.1死亡率和稳定性不同药剂对试虫的触杀活性差异很大,供试药剂以100μg/mL浓度处理后24h,辛硫磷、氯唑磷、喹硫磷、氟虫腈和鱼藤酮处理的试虫死亡率均为100%,毒死蜱和闹羊花素处理的校正死亡率分别为87.18%和79.49%(表1)。处理后48h与24h结果相似,变化不大。鱼藤酮与闹羊花素相比,原料较易得,应用更成熟;氟虫腈比辛硫磷、氯唑磷和喹硫磷、毒死蜱等4种有机磷类杀虫剂安全性更高,环境相容性较好,更适合于无公害蔬菜生产。综合考虑经济效益、社会效益和生态效益,选用氟虫腈和鱼藤酮,研究其对防治黄曲条跳甲的混用增效作用。2.2标准药剂配比处理后24h,鱼藤酮与氟虫腈对黄曲条跳甲成虫的LC50分别为14.01μg/mL和18.35μg/mL,当两者分别按有效成分4∶1、3∶2、2∶3和1∶4混用时,LC50分别为20.26、9.60、12.97和18.71μg/mL,以鱼藤酮为标准药剂,上述4个配比的共毒系数(CTC)分别为117.24、230.14、159.66和103.98(表2)。结果表明,鱼藤酮与氟虫腈以3∶2配比混用时,LC50值最低,CTC最大,增效作用最明显。2.3校正死亡率测定药膜法测定结果表明,以0.45μg/cm2和0.75μg/cm2剂量处理后24h,试虫校正死亡率分别为75.97%和94.94%,处理后48h校正死亡率分别为83.72%和98.70%。以微量点滴法处理结果表明,以50μg/mL处理时,试虫校正死亡率与处理后死亡时间回归直线方程为:Y=4.4614+0.5358X,相关系数r=0.9866,试虫致死中时LT50为10.12min,95%置信区间7.35～13.94min。以上结果表明,鱼氟乳油对黄曲条跳甲成虫触杀活性强,作用迅速。2.4鱼藤酮和鱼氟乳油对呼吸影响各药剂处理黄曲条跳甲成虫,放回氧电极气室后,电压值迅速发生明显变化,鱼氟乳油和鱼藤酮30μg/mL处理体系中CO2浓度迅速增加,电压增高值显著高于CK增加程度。表明增效配方鱼氟乳油可能与鱼藤酮具有相似的呼吸抑制作用机制。鱼氟乳油处理后10min起,电压值一直明显高于鱼藤酮处理,反映出体系中的CO2浓度从10min起就一直高于鱼藤酮处理。从表3所拟合的回归线性方程可知,鱼氟乳油和鱼藤酮处理的斜率分别为21.662和27.032,均显著大于CK处理斜率14.971,这说明鱼氟乳油处理对试虫的呼吸抑制作用时间小于鱼藤酮,作用更加迅速。2.5黄曲条跳甲防治手段田间小区试验结果表明,鱼氟乳油对黄曲条跳甲具有良好的控制作用,以300mL/hm2浓度处理后7天,试虫虫口减退率为72%～96%,防治效果均在90%以上,以450mL/hm2处理后7天,虫口减退率和防治效果与300mL/hm2处理差异不显著(处理后3天显著高于300mL/hm2),但其持效期更长,处理后10天和14天,虫口减退率分别保持在77.24%和53.78%,防治效果分别为93.22%和88.73%,显著优于300mL/hm2及其他各处理(表4)。2.5%鱼藤酮EC1500mL/hm2处理对黄曲条跳甲控制作用较好,处理后5天内,虫口减退率为67.63%～87.92%,防治效果为85.15%～90.74%,但虫口减退率均显著低于6%鱼氟乳油300、450mL/hm2处理。5%氟虫腈SC270mL/hm2处理后5天内虫口减退率为54.13%～74.08%,均显著低于6%鱼氟乳油和2.5%鱼藤酮EC处理,防治效果只有78.95%～81.74%,对黄曲条跳甲成虫的控制作用较差。处理后7～14天,2.5%鱼藤酮EC和5%氟虫腈SC处理的虫口减退率均低于35%,甚至是负值(表4),已经不符合防治的要求。目前蔬菜生产中防治黄曲条跳甲的常用药剂80%敌敌畏EC和48%毒死蜱EC的控制效果差异较大,前者以1200mL/hm2处理后1天的虫口减退率为74.08%,处理后3天起,虫口减退率即已低于24%,处理后7天起,虫口减退率已达-211.40%,无实际防治效果;后者以750mL/hm2处理后3天,虫口减退率和防治效果与6%鱼氟乳油300mL/hm2处理相似,但处理后5、7、10和14天,虫口减退率分别为56.80%、51.97%、39.63%和-15.53%,均显著低于鱼氟乳油300mL/hm2处理(表4)。3植物源制剂对黄曲条跳甲的抑制作用目前在广东等地黄曲条跳甲已取代小菜蛾Plutellaxylostella上升为蔬菜生产上的最重要害虫之一。鉴于黄曲条跳甲的极大危害,许多学者对黄曲条跳甲的生物学、生态学及防治[4,5,6,7,12,13,14,15]等方面进行了研究。黄曲条跳甲成虫取食不同种十字花科蔬菜后酯酶、羧酸酯酶和乙酰胆碱酯酶活性及其频率分布均存在不同程度的差异。Dosdall等详细研究了耕作方式对黄曲条跳甲的控制影响。在各种替代药剂中,植物源杀虫剂对黄曲条跳甲的控制作用尤其引人瞩目,如采用四臂嗅觉仪、室内笼罩试验和田间试验相结合的方法,明确了松节油主要成分α-蒎烯对黄曲条跳甲具有拒避作用,印楝素(azadirachtin)、烟碱(nicotinamide)及烟草Nicotianatabacum、艾蒿Artemisiaargyi、繁缕Stellariamedia、羊蹄甲Bauhiniavariegata等植物提取物对黄曲条跳甲成虫均有较好的忌避效果及田间控制效果。单纯应用植物源杀虫剂似乎难以达到生产实践对黄曲条跳甲的控制要求,特别是速效性和药剂价格较贵等限制了其在害虫防治中的推广应用。在生产实践中,将植物源杀虫剂与高效安全的化学杀虫剂混用,使两者的优势互补,是控制害虫的有效途径。沈长朋等将苦豆子提取物与两种有机磷杀虫剂分别混合后喷施,对黄曲条跳甲等田间主要害虫均有较好的控制作用。本研究对辛硫磷、氯唑磷、喹硫磷、氟虫腈、毒死蜱、鱼藤酮及闹羊花素进行筛选,发现植物源杀虫剂鱼藤酮和新型杂环类高效杀虫剂氟