不同注射法对受体牛同期挥发的影响

不同注射法对受体牛同期挥发的影响

同时，奶牛伤口的目的是简化人工精子和胚胎移植，并适合集约栽培。该技术涉及通过溶黄体或撤除外源性激素使外周血液中孕酮或孕激素含量迅速下降,以达到同期发情的目的(RocheJ,1981)。通常采取2种方法进行同期化处理,一是诱导卵巢中的黄体溶解,如PG处理,缩短黄体期。二是延长牛发情周期的黄体期,如孕酮及其类似物。PGF2a是牛最常用的同期发情方法,通常分为1次或2次处理,如1次处理时,从理论上讲,将有70%的母牛发情。如2次PG处理,通常的方法是2次之间相隔11d,使第二次处理时母牛黄体都处于功能性黄体阶段。孕酮或孕激素借助固化装置放在阴道内或耳部皮下埋植后可持续释放(Odde,1990),CIDR是目前使用的这类装置之一。在用CIDR同期发情过程中,还需要PG的参与以便终止孕酮对卵巢的作用(RocheJ,1981),短期孕酮和一次性PG处理相结合可提高母牛的同期发情效果和发情反应的一致性。本试验的目的是比较母牛1次、2次PG注射和CIDR+PG同期发情效果,并研究同期发情方法对胚胎移植受胎率的影响。1材料和方法1.1试验材料1.1.1试验地点1.1.2个体大小、生长品种为当地土种黄牛、西门塔尔杂种牛和黑白花奶牛。要求具备:直检无繁殖机能障碍、生殖器官疾病和传染病,个体大,体型结构良好,骨盆较宽大,膘情中等水平;年龄在3~6岁之间,无流产史。经产或育成牛,在同期发情前4周,肌注VA、VD各25IU和VE500mg,并补充亚硒酸钠10mg。1.1.3药物、维生素a、va和vd-roPGF2α:0.2mg/(2mL·瓶),中国科学院动物研究所;CIDR:1.38g孕酮(DuirsPfarmAgLtd;NewZealand);维生素AD注射液:VA、VD各5万IU,上海第九制药厂;维生素E注射液:50mg/mL,上海第九制药厂;5%亚硒酸钠VE注射液:500mgVE+10mgSeO3/10mL,北京兽药厂。1.2药血压cidr方法Ⅰ:一次性肌肉注射氯前列烯醇3支(0.2mg/支)。方法Ⅱ:二次性肌肉注射氯前列烯醇,时间间隔为11d,每次3支(0.2mg/支)。方法Ⅲ:不考虑母牛的发情周期,任选一天将CIDR放入母牛的阴道内,第九天肌注PGF2α0.6mg/头(经产牛)或0.5mg/头(育成牛),第十二天取出CIDR后24h开始观察发情,并准确记录发情时间。以上3种方法处理后,均在第二天开始24h观察发情,对于发情的母牛在第七天通过直检,鉴别黄体的情况。1.3试验数据的统计分析采用SAS软件,进行差异显著性分析。2试验结果2.1不同优良带身份牛的实施效果本试验在祁县城赵牛场进行,经产牛带牛犊,膘情较瘦。同期发情方法同方法Ⅰ。由表1可见,育成牛同期发情率高于经产牛(P<0.01),由于育成牛的营养状况好于带犊母牛,所以两者之间在同期发情率方面有差异。但从发情牛的黄体合格率方面差异不显著(P>0.05)。2.2产带重酵母发病的发生率本试验选自3个不同的地点(徐沟安圣,祁县城赵和祁县申达)的当地土种黄牛、西门塔尔杂种牛和黑白花奶牛,均为经产带犊母牛。由表2可见,在相同的饲养条件下,3个不同地点、不同品种产犊3个月以上的母牛同期发情率都显著地高于产犊不足3个月的母牛(P<0.01)。说明牛本身的营养、以及生理状况对牛的同期发情起到很重要的作用。另外,表中的数据显示,3个不同品种的牛在不足3个月或是3个月以上的同期发情率比较上差异不显著(P>0.05)。2.3方法和方法对受体移植可用率的影响本试验在祁县城赵牛场,选用育成牛进行,同期发情方法为方法Ⅰ、方法Ⅱ和方法Ⅲ。由表3可知,方法Ⅱ和方法Ⅰ在同期发情率上来看,两者差异不显著(P>0.05),两者与方法Ⅲ相比,差异显著(P<0.05)。从黄体合格率来看,三者之间差异均不显著(P>0.05)。从受体移植可用率来看,方法Ⅰ和方法Ⅲ相比,差异显著(P<0.05)。另外,在观察发情时,用CIDR+氯前列烯醇处理组母牛的发情集中,同期化程度比较高,比其它两种方法更有利于在集中的一段时间内完成胚胎移植。2.4加拿大荷斯坦牛的胚胎本实验在太原畜牧总站进行。所用胚胎均为从加拿大进口的荷斯坦牛的胚胎。由表2~4可知,2种不同同期发情方法对受体牛移植妊娠率没有很大影响,差异不显著(P>0.05)。3pgef2注射时牛胚胎受精率的变化不论是育成牛还是经产牛,不同营养、管理和生理水平是同期发情效果好坏的主要影响因素,同期发情处理时处理牛体质和营养水平对发情反应高低起到重要作用。XuZZ和BurtonLJ(1993)试验证明如果处理牛营养水平太低和乏情期生理状况下,单独孕酮处理对处理牛不起作用。本试验研究中,在舍饲条件下,不论是什么同期发情方法,经产牛的同期发情率和黄体合格率都低于育成牛,而且不同品种产犊3个月以上的母牛同期发情率都显著地高于产犊不足3个月的母牛(P<0.01)。说明牛本身的营养对牛的同期发情起到很重要的作用。PGF2α处理母牛通过溶黄体作用可使其发情同期化,但个体之间由于卵泡成熟和排卵时间不稳定从而引起同期发情后定期配种受精率差异很大。早期研究表明在PGF2α处理时黄体的成熟程度影响其溶黄体效果。在发情周期的前5d或6d,PGF2α不能有效地诱导溶黄体作用(Momont1984),然而,PGF2α确实对牛有溶黄体作用,不过母牛发情的时间在6d范围,所以不可能在固定的时间内输精或进行胚胎移植。最近的研究发现,从PGF2α处理到母牛表现发情的时间由开始处理时卵巢中优势卵泡的发育阶段所决定。如果当PGF2α注射时卵泡波中的优势卵泡处于发育后期或早期静止期,卵巢排卵将在3~4d内。但当PGF2α注射时卵泡波中的优势卵泡处于静止期的中、后期(如不在是有功能的优势卵泡),则卵巢排卵将在5~7d后下个卵泡波排卵(Kastelic1991),这一时间间隔反映新的卵泡波中优势卵泡发育和排卵所需要的时间。从本试验看出,PGF2α注射后母牛的同期发情率和同期化程度比CIDR+PG要低。与HanselW(1979)和SmithR.D(1984)的结果一致。另外,用CIDR+PGF2α同期发情受体牛,母牛开始发情的时间早于注射1次或2次PGF2α约12h,这可能是由于孕酮长时间处理的结果,MacMillan(1985)发现CIDR-B处理牛12d,可获得更准确地同期发情率。BurtonL.J(1993)试验研究发现间隔13d2次PG同期发情处理会使母牛的受精率降低,这是由于在第二次注射PG时,部分母牛的发情周期处在早期或中期的黄体期,如处在黄体期的晚期时,母牛的受精率不受影响,FolmanY认为2次PGF同期发情间隔时间延长到14d可改善处理牛的受胎率。就牛胚胎移植来讲,WenkoffM.S(1987)和HaslerJ.F认为自然发情和PG诱导发情的受体牛胚胎移植妊娠率没有差异。本试验采用间隔11d2次PG同期发情处理母牛,结果显示,与一次注射PG的同期发情率差异不显著,但明显高出3个百分点。在同期发情方案中,常常使用孕激素及其类似物处理母牛,但被处理牛受胎率有降低的趋势。这是由于人为黄体期的孕酮水平抑制LH峰出现(Stock,1993),试验显示,采用CIDR+PGF2α法作同期发情处理后,牛发情后第七天,黄体合格率与PGF2α一次注射法、PGF2α二次注射法处理的牛比较,差异不显著(P﹥0.05),而且比较胚胎移植妊娠率,差异也不显著(P﹥0.05)。原因可能是孕酮处理延长了优势卵泡的寿命(Rajamachendran,1992),降低了新卵泡发生的比率,而寿命较长的卵母细胞排卵,在