几类类天然产物的提取分离方法

几类类天然产物的提取分离方法本人总结了一些分离方法，以抛砖引玉！

总述

1)提取前文献查阅综述和药材生药鉴定2)提取方法

①粉碎成粗粉

②有机溶剂法和水提法③水蒸气蒸馏法④升华法

3)分离纯化法

①根据物质溶解度的不同进行分离

a.温度不同,溶解度不同b.改变溶液的极性去杂

c.酸碱法

d.沉淀法

②根据物质分配比不同极性分离

a.液-液萃取法

b.反流分布法c.液滴逆流层析法d.高速逆流层析法e.GC法f.LC法:LC分配层析载体主要有---硅胶,硅藻土,纤维素等;有正反相之分;压力有低、中、高之分;载量有分析、制备之分。

③根据物质吸附性不同极性分离

a.※极性吸附剂（如SiO2,Al2O3...)极性强，吸附力大

※非极性吸附剂(如活性炭－对非极性化合物的吸附力强(洗脱时洗脱力随洗脱剂的极性降低而增大)。

b.化合物的极性大小依化合物的官能团的极性大小

而定;

溶剂的极性大小可按其介电常数大小排列

（极性渐大>）:

己烷

苯

无水乙醚CHCl3

AcOEt

乙醇

甲醇水e

1.882.294.47

5.206.1126.031.281.0

c.氢键力吸附

聚酰胺吸附层析--洗脱剂的洗脱力由小到大为:

水>甲醇>丙酮>NaOH液>甲酰胺>尿素水液

④根据物质分子的大小进行分离

如葡萄糖凝胶(SephadexGandLH-20...)过泸法等

⑤根据物质解离程度不同的分离法

离子交换法：

强酸：-SO3H

强碱：-N+(CH3)3Cl-

弱酸：-CO2H

弱碱：-NH2(NH,N)

一、糖及苷类的提取和分离

1溶剂处理法

2铅盐沉淀法

3大孔树脂处理法

4柱色谱分离法

二醌类化合物的提取和分离

一提取方法:

一般选用甲醇或乙醇为溶剂，可同时将游离态和成苷的蒽醌类化合物从药材中提取出来，浓缩后再依次用有机溶剂提取（多用索氏提取法），可根据极性大小不同进行初步分离（如将苷和苷元分开）。

对于多羟基蒽醌或具有羧基的蒽醌（如大黄酸），在植物体内多以盐的形式存在，难以被有机溶剂溶出，提取前应先酸化使之游离。

二分离方法：

1蒽醌苷类和游离蒽醌衍生物的分离：用分步提取法（如前述）

2游离蒽醌衍生物的分离：可选用分步结晶法、梯度pH萃取法或层析法进行。

梯度pH萃取法是分离游离蒽醌衍生物的经典方法：

1.局限性

2.原理性质相似，酸性差别不大的混合物不适用

3有些蒽酮虽然存在酚羟基，但在稀碱溶液中较相应的蒽醌难溶，如大黄酚蒽酮-9，故蒽醌衍生物的苯提取液用极稀的NaOH液萃取，可除去蒽醌而使蒽酮留在苯液中。

示例

色谱法在蒽醌苷元分离中的应用：

一般先用经典方法（如梯度pH萃取）对其进行初步分离，再结合柱色谱法或制备性TLC法作进一步的分离，多用硅胶吸附色谱，而氧化铝一般不用，也常用聚酰胺作为柱色谱的填料。

•三、黄酮类化合物的提取与分离

（一）提取

黄酮甙类以及极性稍大的甙元（如羟基黄酮等），一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取。一些多糖甙类可用沸水提取。在提取花青素类化合物时，可加入少量酸（0.1%盐酸，应当慎用，避免发生水解）。

大多数黄酮甙元宜用用氯仿、乙醚、醋酸乙酯等中极性溶剂提取，而对多甲氧基黄酮类游离甙元，甚至可用苯等低极性溶剂进行提取。对得到的粗提物可进行下列精制处理，常用方法有：

（一）溶剂萃取法利用黄酮类化合物与混入的杂质极性不同，选用不同溶剂进行地萃取可达到精制纯化目的。例如植物叶子的醇浸液，可用石油醚处理，以便除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素。而某些药料水溶液则可加入多倍量浓醇，以沉淀除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。

有时溶剂萃取过程也可以用逆流分配法连续进行。常用的溶剂系统有：水-醋酸乙酯，正丁醇-石油醚等。

溶剂萃取过程在除去杂质的同时，往往还可以收到分离甙和甙元或极性甙元与非极性甙元的效果。

（二）碱提取酸沉淀法黄酮甙类虽有一定极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再于碱水提取液中加入酸，黄酮甙类即可沉淀析出。此法简便易行，如芦丁、橙皮甙、黄芩甙的提取都应用了这个方法。

兹以从槐米中提取芦丁为例说明该法的操作过程。槐米（槐树SophorajaponicaL.花蕾）加约6倍量水，煮沸，在搅拌下缓缓加入石灰乳至pH8~9，在此pH条件下微沸20~30分钟，趁热油滤，残渣同上再加4倍水煎1次，乘热抽滤。合并滤液在60~70℃下，用浓盐酸调至pH为5，搅匀，静置24小时，抽滤。沉淀物水洗至中性，60℃干燥得芦丁粗品，于水中重结晶，70~80℃干燥得芦丁纯品。

在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液浓度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成（金羊）盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。

当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类药材，宜用石灰乳或石灰水代替其它碱性水溶液进行提取，以使上述含羟基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯化处理。

（三）碳粉吸附法主要适于甙类的精制工作。通常，在植物的甲醇粗提取物中，分次加入活性炭，搅拌，静置，直至定性检查上清液无黄酮反应时为止。过滤，收集吸甙炭末，依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇溶液进行洗脱，各部分洗脱液进行定性检查（或用PPC鉴定）。通过对Baptisialecontei中黄酮类化合物的研究证明，大部分黄酮甙类可用7%酚/水洗下。洗脱液经减压蒸发浓缩至小体积，再用乙醚振摇除去残留的酚，余下水层减压浓缩即得较纯的黄酮甙类成分。

二、分离

现将较常用的方法介绍如下：

（一）柱层析法

分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺及纤维素粉等。此外，也有用氧化铝、氧化镁及硅总碱溶少量适当溶剂中，放置析晶，过泸予以分离，母液浓缩后可以加少量不同溶剂再试行结晶...，不同生物碱可能由此分离纯化。分离到的较纯晶体可以重结晶进一步分离纯化。

2)衍生物制备法(成盐,成酯等)：生物碱盐类往往易于结晶，先使其成盐后再用分步结晶法加以分离（酸可以是有机酸也可以无机酸）其中HI酸,过氯酸,苦味酸盐最易结晶。

3)在不同的pH值下萃取法:

碱性不同的生物碱混合物溶酸水中后,先加弱碱,则弱碱游离可被非极性溶剂萃取出;逐步加大碱性,则碱性从小到大的不同碱性的生物碱可先后用非极性有机溶剂萃取出。

4)液体生物碱混合物的分馏分离法:液体生物碱混合物可进行分馏分离。如毒芹(Coniummaculatum)中的毒芹碱(m.p.166-7℃)，羟基毒芹碱(m.p.116℃)等；石榴皮(PunicagranatumL.)中的石榴皮碱(m.p.195℃)