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显齿蛇葡萄ampelopsisgrisselenaa幼嫩茎叶营养成分的测定
野生葡萄是科西蛇的祖先。主要分布在广东、广东、云南、贵州、湖南、湖北、江西、福建等省区。其味甘淡、性凉,具清热解毒、祛风湿、强筋骨等功效,民间将其嫩茎叶制成保健茶,用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎、疱疔等症,已有数百年应用历史。近年医学实验表明,其粗提物具抗血小板聚集和血栓的形成、降血脂和抗氧化、杀菌等作用,既可深加工为抗心律失常、抗心肌缺血、抗高血压的新型药物,又可粗加工为食品抗菌防腐添加剂、新型类茶风味饮料等。尽管目前湖南、广西、广东等地不少厂家纷纷推出以显齿蛇葡萄叶为原料的保健食品,但至今未见对显齿蛇葡萄叶的营养功能成分的分析研究。故此,我们对显齿蛇葡萄幼嫩茎叶中部分营养功能成分进行了分析研究,这将为我国显齿蛇葡萄资源开发利用提供有价值的科学依据。1材料和方法1.1原植物的鉴定显齿蛇葡萄植物幼嫩茎叶(7月下旬采摘)由湖南省张家界市永定区科委提供,由作者依参考文献鉴定其原植物。显齿蛇葡萄幼嫩茎叶采收后立即送回实验室,在110℃的通风干燥箱中进行杀青30min,之后转入70~80℃的通风干燥箱中进行热风干燥12h,粉碎过60目筛,装入有塞玻璃瓶中保存,供分析用。1.2测量1.2.1质量分析用凯氏定氮法测定。1.2.2水生蛋白质考马斯亮蓝法。1.2.3氨基酸总数茚三酮比色法。1.2.4水解条件和样品测定称样品20mg,加入6mol/LHCl液10ml,抽真空用酒精喷灯封口,在110℃下水解24h(色氨酸的水解条件为4mol/LNaOH溶液,110℃下水解20h),加入9.5ml6mol/LNaOH溶液中和,用蒸馏水定容至200ml待测,样品测定用美国Waters公司的HPLC色谱仪,分离柱为WatersAAA。1.2.5总灰烬水按GB8306-87茶叶灰分测定方法进行。1.2.6有机营养用原子吸收分光光度、比色等方法测定。1.2.7酚酒石酸亚铁比色法。1.2.8第一次水浸提率测定称显齿蛇葡萄1g(测定含水量),放入100ml锥形瓶中,加适量水100℃下水浴0.5h,趁热过滤,用蒸馏水定容,此滤液为第一次浸提液,滤渣烘干称重,计算第一次水浸提率。之后,将滤渣转入相同体积的锥形瓶中,重复前面相同步骤,依此类推,共进行5次浸提,计算总水浸提率。1.2.9总黄酮用核酸蛋白质分析仪测定(美国,选择波长为294nm,测定时间为1min)。1.2.1d系列、beckman公司、美国新加工型不锈钢柱用反相高效液相色谱测定(systemGold系列、Beckman公司、美国Nova-pakG18不锈钢柱3.9×150mm,流动相为甲醇∶水=36∶64,柱温为30℃)。2结果2.1显示齿蛇肉的粗蛋白含量13.94%。2.2显示巴西葡萄酸盐的含量0.55%。2.3显示齿蛇果实氨基酸的总量2.53%。2.4人体氨基酸的制备每百克显齿蛇葡萄中检出的氨基酸的组分及含量如表1。由表1可以看出,显齿蛇葡萄幼嫩茎叶中含有17种氨基酸,其中包含人体必需的8种氨基酸。E/E+N=0.2013,E/N=0.2520,与WHO/FAO提出的E/E+N应为0.4左右,E/N为0.6左右的参考蛋白质模式差别较大,但值得引起重视的是,其中包含有r-氨基丁酸、蛋氨酸等特殊氨酸数,且天冬氨酸含量非常丰富,这对于深加工显齿蛇葡萄或将显齿蛇葡萄幼嫩茎叶开发为具特殊风味的类茶产品具重要指导意义。2.5显示牙齿蛇伤口的总成分6.80%。2.6表1和表2显齿蛇葡萄幼嫩茎叶中含较丰富的无机营养元素(表2)。值得注意的是,对人体健康与疾病防治有重要影响的无机元素,如Fe、Cu、Mn、Zn、Se显齿蛇葡萄中均有较高含量。2.7显示牙齿蛇的总酚18.5%。2.8总浸提率由表3可以看出,显齿蛇葡萄幼嫩茎叶的水浸出物特高,第一次浸提率高达50.31%,总浸提率高达72.97%;总黄酮含量高达38.965%,其中二氢杨梅素单体含量达30.598%,这可谓黄酮类化合物在植物体中分布的一种特例(其测定方法和精提工艺另文发表)。3显齿蛇葡萄幼肉中总黄酮类化合物3.1显齿蛇葡萄幼嫩茎叶中无机营养元素蛋白质含量极为丰富,且水浸出率高,耐冲泡,尤其是其含较丰富的r-氨基丁酸、蛋氨酸等特殊氨基酸和对鲜爽滋味具举足轻重作用的天冬氨酸,这对将显齿蛇葡萄的嫩茎叶开发为具特殊风味的类茶饮料具重要的指导意义。3.2显齿蛇葡萄幼嫩茎叶中总黄酮、二氢杨梅素含量极高,属黄酮类化合物在植物体中分布的特例。黄酮类天然产物在人类健康中的作用是国际上过去十余年来天然药物和健康产品研究开发的热点之一,它具有清除自由基、抗氧化、抗血栓、抗肿瘤、消炎抑菌等多种奇特功效。二氢杨梅素系黄酮类化合物中的一员,其除具黄酮类化合物的普通特性之外,在解除醇中毒、抗高血压、抑制体
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