鸡血藤的鉴别研究 中药学专业

综述鸡血藤鉴别的研究进展1前言有史记载以来，传统中药鸡血藤就是一个来源繁杂的本草品种，现行《中华人民共和国药典》（2015年版)一部[1]收录豆科密花豆属植物密花SpatholobussuberectusDunn的干燥藤茎确定为鸡血藤正品。主要分布在广西、广东。其味辛、微甘，温;归肝、肾经。具补血、活血、通络的功效，用于月经不调、血虚萎黄、风湿痹痛等症。近年来临床上常用鸡血藤治疗各种原因引起的白细胞、血小板、红细胞等全血象减少和再生障碍性贫血等疾病，具有较好的疗效。目前临床上主要用于妇科、心脑血管、骨科等。中药品种众多，用药广泛如补血调经片、新血宝胶囊等，妇科用药花红片、金鸡片，内科用药正天丸、三九壮骨关节丸、养血清脑颗粒，其他还有“鸡血藤浸膏片”、“鸡血藤糖液”、“活血通经丸”等。鸡血藤因采割时藤汁赤如鸡血而得名，是沿用千年的活血化癖药之一，能“去癖血、生新血”，为“血分之圣药”。陈道峰[2]对各省区市场上商品药材及鸡血藤原植物进行的调查表明，鸡血藤的基源植物主要分属豆科和五味子科6个属的13个种及2个变种;鸡血藤植物基源复杂，民间习用品种繁杂不一，方石林[3]认为，是由于各类相关本草古籍记载不详，当前各地药材名称混乱、习用品种标准不一，相关人员鉴别知识匾乏，质量意识淡薄。因此，本文对鸡血藤药材进行来源鉴别、性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、薄层色谱鉴别研究，建立一套可靠、稳定、有效的鸡血藤鉴别研究体系，为鸡血藤药材的质量控制研究提供科学依据。2鸡血藤2.1基原考证赵学敏(1765)记载:“长儿景炎在四川叙州府，与滇之昭通接界，因嘱其往觅此藤，所寄来者，外形不殊，而中心惟作小红点，干之也不突起。据来书云，实金沙江土司山中所得，然与龚太守所带来者绝不相类，岂此藤也有二种耶，附记于此，以俟考”!。四川叙州府即今四川宜宾市，照通在云南东北部，此时鸡血藤基原植物已不止一种，说明在清代鸡血藤已经是多来源药材。云南产的鸡血藤主要有凤庆(旧称顺宁)鸡血藤膏和禄劝鸡血藤膏两种，据杨竞生和曾育麟(1963)考证，凤庆鸡血藤中光身者为异型南五味子Karlsura.heterochta(Roxb.)Craib.，有刺者为近缘五味子中间变Schlisanrlrapropinqua(Wall.)Hk.f.ermediaA.C.Sm.,禄劝鸡血藤为豆科的巴豆藤CraspedolobiumschochiiHarms。《中药志》（1960）最先收载白花麻油藤MillettiabirdwoodianaTutch.作为鸡血藤的基原植物。《广西本草选编》(1974)记载鸡血藤来源于豆科植物密花豆。此外，密花崖豆藤M.congestifloraT.Chen、丰城崖豆藤M.dielsianaHarms、亮叶崖豆藤M.nitidaBth.、美丽崖豆藤M.speciosaChamp.、大种崖豆藤M.acspermaDunn、常春油麻藤MucunasempervirensHemsl.在广东、广西、福建、云南、贵州等地亦作为鸡血藤的基原植物。可见各地习用代用品种之多，鸡血藤来源极其复杂。为了弄清鸡血藤的基原植物，参与起草《中国药典》(1977)的鸡血藤编写组深人各产区采集标本，与商品鸡血藤进行仔细对照鉴定，最终将使用时间长、应用面广、产量大的植物密花豆作为鸡血藤正品载人《中国药典》，其他品种均为各省区的地方用药品种。《全国中草药汇编》(1975)和《中药大辞典》(1977)也正式将密花豆收载作为鸡血藤的基原植物。谢宗万(1984)亦认为“粗如竹竿，略有纵楞，质硬，色棕红，刀切处有红墨色汁者为佳”一般是指密花豆，这与文献记载“剖断流汁，色赤如血”、“砍断汁出如血”等特征相符，以密花豆藤作为鸡血藤正品药材符合现时国内多数地区的用药情况。2015年版《中国药典》仍将豆科植物密花豆作为鸡血藤的基原植物[20]。2.2性状鉴别鸡血藤为豆科植物密花豆SpatholobussuberectusDunn的干燥藤茎。秋、冬二季采收，除去枝叶，切片，晒干。为椭圆形、长矩圆形或不规则的斜切片，厚0.3~1cm。栓皮灰棕色，有的可见灰白色斑，栓皮脱落处显红棕色。质坚硬。切面木质部红棕或棕色，导管孔多数;韧皮部有树脂状分泌物呈红棕色至黑色，与木质部相间排列呈多个同心性椭圆形环或偏心性半圆形环;髓部偏于侧边。气微，味涩[1]。2.3显微鉴别粉末棕黄色。棕红色块散在，形状、大小及颜色深浅不一。以具缘纹孔导管为主，直径20~400μm，有的含黄棕色物。石细胞单个散在或2~3个成群，淡黄色，呈长方形、类圆形、类三角形或类方形，直径14~75μm，层纹明显。纤维束周围的细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。草酸钙方晶呈类双锥形或不规则形[1]。2.4理化鉴别目前，国内学者采用紫外光谱及高效液相指纹图谱法对鸡血藤类药材进行了鉴别研究。刘玉琴[4]通过紫外分光光度法测定鸡血藤乙醇浸提液的吸收度，认为只有在(279±1)nm处有最大吸收者，方可做鸡血藤用，否则是伪品，在此波长处吸收度达0.45以上者，认为是合格品，否则为劣品。严启新[5]建立鸡血藤的高效液相色谱指纹图谱来评价鸡血藤的质量，结果显示鸡血藤共有11个峰，其中非共有峰6个，共有峰5个，反映了指纹图谱的特征。鸡血藤及其混淆品种的色谱指纹图谱存在明显差异，所提取的11个色谱峰可作为指纹特征。严启新[6]对来源于不同地区的12个样品进行了红外光谱特征比较，结果表明仅4个样品来源于豆科密花豆，其余样品分别来源于厚果鸡血藤、白花油麻藤等。表明鸡血藤中活性成分为异黄酮和有机酸等，尽可能提取该类成分。2.5薄层色谱鉴别在薄层色谱鉴别方面，边宝林[7]建立了鸡血藤中有效成分刺芒柄花素的薄层色谱鉴别方法，对市售十个地区的鸡血藤药材进行了薄层鉴别。韦娟[8]采用超声提取鸡血藤样品，以三氯甲烷-甲醇(15:l)为展开剂。该方法较药典省去了上柱洗脱等繁锁操作，缩短了实验时间，提高了工作效率。此外，有关鸡血藤薄层鉴别的大多是中成药中鸡血藤作为主药的薄层鉴别研究。邓晓梅[9]等用薄层色谱法鉴别通痹灵合剂中的鸡血藤及南蛇藤。郭丽红[10]建立风湿宁颗粒的薄层色谱鉴别方法，为制定其质量控制标准提供试验依据。其处方中的鸡血藤、秦芜、地黄三味药的薄层色谱具有鉴别特征。方锦霞[11]在薄层色谱中能清晰地鉴别出盆炎颗粒中的狗脊和鸡血藤，并且阴性无干扰。刘春峰[12]用薄层色谱(TLC)法对骨刺平片的主要成分鸡血藤、骨碎补和熟地黄进行定性鉴别。2.6化学成分迄今为止，从鸡血藤中发现的化合物结构类型主要有黄酮类、挥发油、甾醇类、萜类、内酯类、蒽醌类、苷类及其他类型化合物[13]。目前从鸡血藤中分离出的化合物大多为黄酮类。严启新等[14-19]从鸡血藤中分离得到的黄酮类成分主要有:(1)黄酮苷元:表没食子儿茶素、表儿茶素、阿夫罗摩辛、儿茶素、染料木素、没食子儿茶素、芒柄花素、密花豆素、樱黄素、垂崖豆藤异黄烷醌、7,4'-二羟基-3’-甲氧基异黄酮、8-甲雷杜辛、7,4'-二羟基-8-甲氧基异黄酮、大豆苷元、3,7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮醇、野靛黄素、3',4',7-三羟基黄酮、紫苜蓿异黄烷、毛蕊异黄酮、Syringieaeidacid,、vestitol,、ourateacatechin,、Demethylvestitol、7-羟基-6-甲氧基二氢黄酮、二氢槲皮素、异紫苜蓿异黄烷、7,3',4'-三羟基-6-甲氧基二氢黄酮、二氢山奈酚、圣草酚、甘草查尔酮A、黄苏木素、紫铆素、新异甘草素、甘草素、黄甘草苷、3，7-二羟基黄烷酮、高丽槐素、异甘草素、3，7-二羟基-6-甲氧基二氢黄酮醇、6-甲氧基圣草酚、柚皮素、阿夫罗摩辛-7-β-O-吡喃葡萄糖苷、美迪紫檀素、3-羟基-9-甲氧基紫檀烷、奥刀拉亭、卡亚宁、水黄皮素、2',3,4,4'-四羟基查尔酮、3',4',7-三羟基黄酮、3,5,7,3',5'-5羟基黄烷、6-羟基-7-甲氧基二氢黄酮醇、4,7,2’-三羟基-4’-甲氧基黄烷、3,3',5,5',7-5羟基黄酮、Dulcisflavan,7-羟基-6-甲氧基二氢黄酮、7-羟基二氢黄酮。(2)黄酮苷:染料木苷、4,8-二甲氧基-7-O-β-D-葡萄糖基异黄酮、阿夫罗摩辛-7-O-葡萄糖苷、8,4’-二甲氧基异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花苷、4',8-二甲氧基异黄酮-7-p-D葡萄糖苷。3总结与展望鸡血藤结实率低，种子未成熟果实已脱落，种子萌发率也不高，导致其自然繁殖率很低。虽然目前已经通过扦插繁育技术开展了鸡血藤人工种植，也颁布实施了一些地方标准和发明专利，如《鸡血藤规范化生产技术规程》等，但因其生长周期长，鸡血藤大面积规模化人工种植还没有形成。资源的紧缺导致市场上鸡血藤品种混杂，基原不清，药材质量良芳不齐，为临床用药的安全性带来了极大的隐患。因此，通过建立稳定、有效、可靠的鸡血藤鉴别研究体系，为合理应用正品鸡血藤提供科学的依据，提高鸡血藤药材的质量控制标准，保证临床用药的安全性。同时，可从地方用药品种中寻求一种与鸡血藤基原植物密花豆药性相似且安全可靠的替代资源，以目前鸡血藤活性成分及药理活性研究为基础，加强地方用药品种的基础研究工作。鸡血藤在中国西南地区及越南、老挝、缅甸等东南亚国家拥有悠久的药用历史，是重要的药用植物资源。目前，鸡血藤单体化合物的药理学研究较少，2015年版《中国药典》是以醇浸出物量作为鸡血藤质量标准依据，除儿茶素、表儿茶素等几种外，大部分没有进行药效评价及其机制研究。其原因一方面是鸡血藤研究还不够深人，另一方面可能是鸡血藤中缺少优势成分，而是由多种黄酮类成分共同发挥作用。因此应加强黄酮类成分研究，开展体内药效评价，以阐明药效物质，为鸡血藤质量评价提供依据。参考文献[1]国家药典委员会.中国药典[S].北京:中国医药科技出版社，2015:194.[2]陈道峰，徐国钧，徐路珊，等.中药鸡血藤的原植物调查与商品鉴定[J].中草药，199324(1):34-37.[3]方石林.鸡血藤混乱原因及其真伪鉴别[J].湖南中医药导报，1997,3(04):40-41.[4]刘玉琴，包保全，李玉华，等.紫外分光光度法测定鸡血藤的吸收度[J].药物分析杂志，1998,18(1):54-55.[5]严启新，李萍.鸡血藤高效液相色谱指纹图谱研究[J].中草药，2004,35（5）：556-559.[6]严启新，李萍.鸡血藤及其混淆品的红外光谱比较研究[J].中药材，2002,25(11):788-790.[7]边宝林，王宏洁，司南.鸡血藤药材中表儿茶素的含量测定[J].中国实验方剂学杂志，2004,10(6):31-32.[8]韦娟.鸡血藤薄层鉴别方法改进[J].中国现代药物应用，20093(7):170.[9]邓晓梅，孙亦群.薄层色谱法鉴别通痹灵合剂中的鸡血藤及南蛇藤[J].广东药学，2004,14(5):7-8.[10]郭丽红，郭琪，刘海英，等.风湿宁颗粒的薄层色谱鉴别研究[J].时珍国医国药，200516(11):1125-1126.[11]方锦霞，李书渊，肖霞，等.盆炎颗粒的薄层色谱鉴别[J].中国现代药物应用，20082(7):16-17.[12]刘春峰，周超，李辉.骨刺平片的薄层色谱鉴别[J].中国药业，2008,17(20):37.[13]符影，程悦，陈建萍，等.鸡血藤化学成分及药理作用研究进展[J].中草药，2011,42(06):1229-1234.[14]冯雪娇.鸡血藤抗肿瘤活性成分的分离纯化与结构鉴定[D].北京工商大学，2009.[15]唐任能.中药鸡血藤质量控制与体内代谢研究[D].长春中医药大学，2011.[16]成军，梁鸿，王媛，等.中药鸡血藤化学成分的研究[J].中国中药杂志，2003,28（12）：53-55.[17]翟明.鸡血藤种质资源的鉴定与品质评价[D].广州中医药大学，2010.[18]李莹.中药鸡血藤的化学成分和质量控制方法研究[D].沈阳药科大学，2009.[19]张祎，邓屾，李晓霞