第二章 海洋动物细胞培养相关术语

细胞培养的现实意义

生物技术上：生产各种生技术产品如：狂犬病、小儿麻痹症等病毒疫苗，表皮生长因子及干扰素、白细胞介素等生长因子及单克隆抗体等。科学研究上：在病毒学、免疫学、遗传学、肿瘤学等方面。临床医学上：胎儿的遗传性疾病分析，药物筛选及某些疾病的治疗等细胞培养的优点

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

可以根据需要，控制包括pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术、记录方法：

研究:倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记--

记录:摄影照片、缩时电影、电视--5.研究的范围比较广泛

学科多：细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等

对象广：

各种动物：低等动物--高等动物--人类

一种动物：不同年龄--

不同组织--

正常或异常（肿瘤--）

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象细胞培养的缺点

现人工模拟体内环境的技术已经很高,

但,人工所模拟的条件与体内实际情况

仍不完全相同.

当细胞被置于体外培养后,

生活在缺乏动态平衡的环境中,

久了，必然发生变化.

因此，对于体外培养的细胞，应该把他们视作一种既能保持动物体内原细胞一定的性状、结构和功能又具有某些改变的特定的细胞群体，而不能将之与体内的细胞完全等同。细胞培养的工作原则有标准化的工作方法培养用的液体极多（如培养液、胰蛋白酶、HANKS液及抗菌素等），应由专人负责，并保证做到按规程行事，配制浓度准确，灭菌可靠，所有配好的溶液瓶上都要标明名称、浓度、消毒与否和制备日期等。一切培养用品都要有固定的存放点，避免杂乱无章，其中尤其重要的是：培养用品与非培养用品应严格分开，已消毒品与未消毒品应分别存放。第二章细胞培养相关术语动物细胞与组织培养（cellandtissueculture）是动物细胞工程的重要技术基础。动物的细胞与组织培养是指从活的机体中取出组织或细胞，模拟机体内生理条件，在体外建立无菌、适温和一定营养条件等，使之生长和生存，并维持其结构和功能的技术。组织培养的概念组织培养这一名词实际上是一个通用名词，习惯上泛指所有的体外培养。根据培养物的不同可概括为三个不同概念：细胞培养、组织培养和器官培养。组织培养：将活体的一小片组织放在盛有培养液的玻璃或塑料培养器皿中，待组织块粘着后，沿底面平面移动生长的过程称为组织培养。从组织块中生长出来的仍然是细胞，细胞在生长的同时也发生移动，至使组织培养难以长时间维持其原有结构，结果也就成了细胞培养。器官培养：是指采取某些措施使器官的原基、器官的一部分或整个器官在体外存活、生长，并保持其原有结构和功能的培养技术。细胞培养：是指用机械或化学的方法将组织分散成单个细胞后，选用最佳生存条件对活细胞进行培养和研究的技术。体外培养的种类培养方式群体培养：将大量细胞置与培养瓶中，让其贴壁或悬浮生长，形成均匀的单细胞层获单细胞悬液。克隆培养：将少数的细胞加入培养瓶中，贴壁后彼此间隔距离较远，经过繁殖每一个细胞形成一个集落，成为克隆。原代培养（primaryculture）：从直接取自生物体细胞、组织或器官开始的培养。。传代(passage)：细胞生长繁殖一定时间和达到一定密度后，须将细胞从一个培养器皿转移或移植到另一个培养器皿，即称为传代或传代培养。细胞系(cellline)：原代培养物经首次传代成功后即成细胞系。有限细胞系（finitecellline）:如果不能继续传代或传代数有限，为有限细胞系。连续细胞系（continuouscellline）:如果可以连续传代，则称为连续细胞系。细胞株（cellstrain）：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养物称为细胞株克隆(clone)：亦称无性繁殖系。对细胞来说，克隆是指由同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。无菌（asepsis）：无真菌、细菌、支原体或其他微生物存在。无菌技术（aseptictechnique）：采用化学或物理手段防止微生物污染的技术。在组织细胞培养中还意味着防止有害物质污染及其他细胞的交叉污染。合成培养基（chemicallydefinedmedium）：是一种各种成分的化学结构均明确地用于细胞培养的营养液。

化学纯试剂

CP

Chemicalpure

实验试剂

LR

Laboratoryreagent

超纯试剂

UP

Ultrapure

生化试剂

BC

Biochemical

光谱纯

SP

Spectrumpure

气相色谱

GC

Gaschromatography

指示剂

Ind

Indicator

层析用

FCP

Forchromatographpurpose

工业用

Tech

Technicalgrade

饲养层（feederlayer）：又称饲养细胞。是在细胞培养中使用的一层具有饲养其他细胞作用的细胞，在其表面可培养那些需要复杂营养的细胞。生长曲线（growthcurve）:以正在生长繁殖的培养物中细胞的数目或生物量为时间的函数所绘制的曲线。体外培养细胞的分型

粘附型细胞:附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。悬浮型细胞:不必附着于固相支持物表面，而在悬浮状态下即可生长的细胞。贴附(粘附)型细胞

粘附:是大多数有机体细胞在体内

生存和生长发育的基本存在方式结果基于粘附特性，使细胞与细胞之间相互结合形成组织，有机体的绝大多数细胞必须粘附于一固相表面才能生存和生长。

培养时：这些细胞被放到体外环境中以后,同样需要粘附于某一固相表面才能生存和生长，因而属于粘附型细胞。粘附(锚定或锚着)依赖型(性)细胞：唯有粘附于固相表面才能生存的细胞

类型

细胞在体内、外的粘附方式：存在差异

体内：粘附是全方位

外形具有复杂的立体特征

体外：多数情况，细胞只有一个附着平面

外形一般与体内时明显不同

按照培养细胞粘附生长时的主要形态，可分为几大类型

贴附(粘附)型细胞分类

上皮细胞型成纤维细胞型

上皮细胞型

名称：仅形态上似体内，实