第06章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析

第六章

芳酸类非甾体抗炎药物的分析《药物分析》课件基本要求掌握：本类药物的结构和性质；主要芳酸类药物的鉴别、检查和含量测定的原理与特点。熟悉：主要芳酸类非甾体抗炎药物杂质的结构、危害、检查方法与含量限度。了解：影响芳酸类非甾体抗炎药物稳定性的主要因素，体内样品与临床监测。基本内容一、典型药物的分类与性质二、鉴别试验三、特殊杂质检查四、含量测定五、体内药物分析练习与思考结构剖析理化特征鉴别试验杂质检查含量测定练习与思考

第一节典型药物分类与理化性质一、分类水杨酸类：水杨酸、阿司匹林邻氨基苯甲酸类：甲芬那酸邻氨基苯乙酸类：双氯酚酸钠芳基丙酸类：布洛芬吲哚乙酸类：吲哚美辛苯并噻嗪甲酸类：吡罗昔康其它芳酸：对乙酰氨基酚结构特点：羧基(—COOH)、苯环（）1、水杨酸类阿司匹林水杨酸（钠）双水杨酯二氟尼柳2、邻氨基苯甲酸类苯甲酸（钠）代表药物甲芬那酸3、芳基苯丙酸类布洛芬代表药物萘普生酮洛芬4、其他芳酸类代表药物对乙酰氨基酚返回游离羧基阿司匹林酯键苯环pKa=3.49直接中和法两步滴定法H水解后生成水杨酸杂质水解后才发生三氯化铁反应酚羟基潜在芳伯氨基苯环对乙酰氨基酚1、性状大多数是结晶性固体；2、溶解性游离芳酸类药物，几乎不溶于水，易溶于有机溶剂芳酸碱金属盐易溶于水二、理化性质3、酸性芳酸类药物分子中具有－COOH，所以显弱酸性（受取代基的影响）药用芳酸pKa在3~6之间。具有酸性，可以与碱成盐。4、紫外和红外特征吸收

返回2.953.494.26第二节鉴别试验具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物一、FeCl3反应紫堇色1、水杨酸反应对乙酰氨基酚的水溶液加三氯化铁试液即显蓝紫色。2、酚羟基反应苯甲酸的中性或碱性水溶液，与三氯化铁试液生成碱式苯甲酸铁盐的赭色沉淀。二、缩合反应酮洛芬二硝基苯肼橙色三、重氮化—偶合反应芳香第一胺类鉴别反应（红色）

+CH3COONa四、水解反应五、紫外吸收光谱法一般采用对比法：样品吸收光谱特征与标准化合物的吸收光谱特征进行对照比较或与文献所载标准图谱核对。（1）比较特征吸收数据（2）比较不同吸收峰处的吸收度比值（3）比较吸收曲线的一致性Amax,Amin,

max,

min,

shA1/A2六、红外吸收光谱法七、色谱法1、TLC法：二氟尼柳胶囊2、HPLC法：阿司匹林片、泡腾片、肠溶片、肠溶胶囊第三节特殊杂质检查典型芳酸类非甾体抗炎药物的有关物质信息表：一、阿司匹林及双水杨酯中游离水杨酸与有关物质的检查（一）阿司匹林及双水杨酸酯的合成（二）阿司匹林中游离水杨酸与有关物质的检查1、游离水杨酸来源：Ch.P.(2005)，检查方法：取阿司匹林原料药0.1g，加乙醇1ml溶解后，加冷水适量使成50ml，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液[取盐酸溶液（9→100）1ml，加硫酸铁铵指示液2ml后，再加水适量使成100ml]1ml，摇匀；30秒钟内如显色，与对照液（精密称取水杨酸0.1g，加水溶解后加冰醋酸1ml，摇匀，再加水使成1000ml，摇匀，精密量取1ml，加乙醇1ml，水48ml，与上述新制的稀硫酸铁铵溶液1ml，摇匀）比较，不得更深。其限量为？检查原理、方法(一）：Ch.P.(2010)，检查方法：HPLC检查原理、方法（二）：色谱柱：ODS流动相：乙腈－四氢呋喃－冰醋酸－水（20：5：5：70）检测波长：303nm定量方法：外标法限量：＜0.1%限量规定原料0.1%阿司匹林片0.3%阿司匹林肠溶片1.5%阿司匹林胶囊(1.0%)阿司匹林泡腾片、栓3.0%HPLC法

2、有关物质检查方法：HPLC色谱柱：ODS流动相：A（乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70））－B（乙腈）检测波长：276nm检测方法：自身稀释对照法结果：A各杂质（除水杨酸外）＜A对照主峰三、双水杨酯中游离水杨酸的检查检查原理：游离水杨酸＋Fe3+(Fe(NO3)3)→紫色配合物↓A530结果：

A供试＜A对照（限度为0.5%)四、萘普生中6-甲氧基-2-萘乙酮等有关物质的检查（一）杂质来源Ⅰ：2-萘甲醚;Ⅱ:6-甲氧基-2-萘乙酮；Ⅳ:萘普生（二）有关物质检查1、色谱条件与系统适用性试验

2、溶液制备与测定法

供试品溶液对照品溶液对照溶液3、结果A6-甲氧基-2-萘乙酮（样）＜A6-甲氧基-2-萘乙酮（对）A其它杂质（样）＜2A6-甲氧基-2-萘乙酮（对）A总杂质（样）＜A萘普生（对）五、对乙酰氨基酚中对氨基酚和对氯苯乙酰胺的检查（一）杂质来源（二）有关物质检查（HPLC法）

1、对氨基酚及有关物质

2、对氯苯乙酰胺反应摩尔比1：1原理产物为强碱弱酸盐宜选酚酞为指示剂+NaOH溶解阿司匹林防止酯键水解第四节含量测定一、酸碱滴定法（一）直接滴定法（１）优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰

酸性杂质干扰（如水杨酸）讨论：

（2）适用范围：用于合格原料药的含量测定方法:取本品0.4g,精密称定,加中性乙醇(对酚酞指示液显中性)20ml,溶解后,加酚酞指示液3滴,用氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)滴定.每1ml的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：2NaOH（总）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O空白试验主试验（二）水解后剩余滴定法

（1）反应摩尔比为1∶2（2）优点：消除了酯键水解的干扰（3）缺点：酸性杂质干扰尚存在讨论：取阿司匹林原料药1.5078g，加入氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）50.0ml，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/L，F＝0.996）滴定剩余的氢氧化钠，消耗15.70ml，空白试验消耗49.70ml。

(1)计算滴定度。MC9H8O4＝180.16g/mol。（2）计算含量。（三）两步滴定法适用于阿司匹林片剂、阿司匹林肠溶片的测定片剂稳定剂:酒石酸或枸橼酸分解产物:水杨酸和醋酸第一步:中和第二步:水解和测定第一步中和酒石酸枸橼酸水杨酸醋酸+NaOH→酒石酸钠枸橼酸钠水杨酸钠醋酸钠不用于含量计算第二步水解后剩余滴定反应摩尔比为1∶1+NaOH定量过量主试验2NaOH（总）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O空白试验（1）消除了酸性杂质的干扰，（2）消除了酯键水解的干扰优点：片剂含量测定结果的计算：取标示量为0.3g/片的阿司匹林片10片，质量为3.5469g，研细，精密称取其片粉0.3592g，用20ml中性乙醇溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠液至使溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠溶液（0.1mol/L）40ml，至水浴上加热15min，迅速冷至室温，用硫酸液（0.0539mol/L）滴定至终点，消耗19.02ml，空白消耗该溶液34.87ml。（1）计算滴定度。(M阿司匹林＝180.16g/mol)（2）求阿司匹林片的含量。二、柱分配色谱-紫外分光光度法USP32－NF27测定阿司匹林胶囊的含量。经柱色谱分离后，可同时定量测定阿司匹林和水杨酸。280nm波长处测定吸收度，外标法计含量算

阿司匹林栓Ch.P（2010）

外标法定量三、HPLC法色谱条件：固定相：ODS流动相：乙腈-四氢呋喃-冰醋酸水（20:5:5:70）检测波长：276nm取本品5粒，精密称定，置小烧杯中，在40～50℃水浴上微温熔融，在不断搅拌下冷却至室温，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.1g），置50ml量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液适量，在40～50℃水浴中充分振摇使阿司匹林溶解，放冷，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，置冰浴中冷却1h，取出，迅速滤过，取续滤液作为供试品贮备液。精密量取供试品贮备液5ml，置100ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取10µl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿司匹林对照品，精密称定，加1%冰醋酸的甲醇溶液振摇使溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。1.乙酰水杨酸及其制剂中的游离水杨酸是如何引入的？简述检查方法的原理及其限量。2.酸碱滴定法测定阿司匹林的含量，加中性乙醇的作用是什么?3.用水解后剩余滴定法测定阿司匹林含量时要进行同样条件下的空白试验，为什么？4.对氨基水杨酸钠中的特殊杂质是什么？试述检查这种杂质的方法的原理？5.阿司匹林含量测定通常采用哪几种方法？设计水杨酸钠的含量测定方法设计阿司匹林片的含量测定方法1、阿司匹林含量测定中避免水杨酸干扰的中和滴定法是

A直接滴定法

B氧化中和法

C双相滴定法

D两步滴定法

2、三氯化铁与水杨酸类药物显色反应最适宜酸度是

A强酸性

B弱酸性

C中性

D弱碱性

E强碱性3、水杨酸类药物鉴别反应

A三氯化铁试剂呈紫色-紫堇色

B重氮化偶合反应呈橙红色

C碳酸钠试液煮沸加酸酸化成白色沉淀

DA+C两项反应

EA+B+C三项反应4、芳酸类的红外光谱是重要的鉴别方法。水杨酸的结构为苯环，羧基和邻位羟基，红外光谱的主要特征峰，是A3300-2300cm-1；1600cm-1；890cm-1；775cm-1

B3300-2300cm-1；1600cm-1；775cm-1

C3300-2300cm-1；1600cm-1；890cm-1

D3300-2300cm-1；1600cm-1；1610，1570，1480，1440cm-1

E3300-2300cm-1；1600cm-1；1610，1570，1480，1440cm