第五章 细胞衰老与凋亡

第五章细胞衰老与凋亡1、细胞衰老1961年Hayflick等人研究发现，培养细胞是有一定寿命的，它们的增殖能力有一定限度，在一个范围常数之内──Hayflick常数，又称Hayflick界限。

衰老（aging，senescence，senility）又称老化，通常指生物发育成熟后，在正常情况下随着年龄的增加，机能减退，内环境稳定性下降，结构中心组分退行性变化，趋向死亡的不可逆的现象。

衰老过程发生在生物界的整体水平、种群水平、个体水平、细胞水平以及分子水平等不同的层次。生命要不断的更新，种族要不断的繁衍，而这种过程就是在生与死的矛盾中进行的。1.1、细胞动态分类

根据细胞的增殖能力，分化程度，生存时间，组织细胞分为4类：

①更新组织细胞：执行某种功能的特化细胞，经过一定时间后衰老死亡，由新细胞分化成熟补充。（上皮细胞、血细胞）②稳定组织细胞，分化程度较高的组织细胞，功能专一，正常情况下没有明显的衰老现象，细胞分裂少见，但在某些细胞受到破坏丧失时，其余细胞也能进行分裂，以补充失去的细胞，（肝、肾细胞）③恒久组织细胞，属高度分化的细胞，个体一生中没有细胞更替，破坏或丧失后不能由这类细胞分裂来补充。（神经细胞，骨骼细胞和心肌细胞）④可耗尽组织细胞，如人类的卵巢实质细胞，在一生中逐渐消耗，而不能得到补充，最后消耗殆尽。1.2、细胞衰老特征

（一）细胞结构的变化1）细胞核的变化

细胞核增大，通过二倍体细胞培养发现，随着细胞分裂次数的增加，细胞核会不断增大。核膜内折，培养细胞和体内细胞，随着培养时间增加，传代次数增加或年龄增长，核膜内折现象明显增多。染色质固缩化，培养的晚代细胞核中，染色质固缩化明显，早代细胞只有轻微的固缩，体内细胞亦有这种现象。核仁裂解为小体，在sgs1酵母突变体衰老细胞中可看到核仁裂解为小体。

2）内质网的变化糙面内质网总量减少，排列有序性下降。年轻动物细胞中，糙面内质网发育良好，排列有序；年老动物中，内质网成弥散状分散于核周围胞质中，不存在有序排列。光镜下用碱性染料染色可以看到神经元细胞中呈颗粒状的尼氏体。尼氏体是由糙面内质网和核糖体组成的混合物。研究者发现小鼠和人的大脑及小脑某些神经元中尼氏体中物质含量会随着动物年龄的增长而逐渐下降，表明随年龄增大内质网量减少。3）线粒体的变化细胞在衰老过程中，线粒体数量减少，体积增大。在人类、大鼠、小鼠衰老的肝细胞中线粒体数量明显减少，并发生膨大现象。4）致密体的生成致密体是衰老细胞中常见的一种结构。在不同的教科书中对这种细胞成分还有一些其他的名称，比如脂褐质、老年色素（斑）、血褐质、脂色素、黄色素、透明蜡体及残体等等。研究表明，致密体是由溶酶体或线粒体转化而来的。5）膜粘度增加，流动性降低衰老细胞膜选择通透性改变，物质进出膜的速度下降，因为衰老或有缺陷的膜常处于凝胶相或固相，产生刚性体脂肪酸尾巴不能运动，膜流动性差；年轻健全的细胞膜具典型的液晶相，比较柔韧使脂肪酸尾巴可以自由运动。6）细胞连接减少衰老时细胞的间隙连接明显减少，用3H-U标记脲嘧啶核苷酸，通过放射自显影来研究不同年龄细胞的间隙连接交换情况，将带3H标记和不带标记的年轻或年老细胞分别放在一起培养，发现培养4hr后，有70%的年轻细胞从共同培养的年轻供体细胞得到3H-U，只有30%的年老细胞从共同体培养的年老供体细胞得到3H-U。说明衰老时细胞间的代谢协作关系显著减少。核增大、染色深、核内有包含物染色质凝聚、固缩、碎裂、溶解质膜粘度增加、流动性降低细胞质色素积聚、空泡形成线粒体数目减少、体积增大、mtDNA突变或丢失高尔基体碎裂尼氏体消失包含物糖原减少、脂肪积聚核膜内陷衰老细胞的形态变化

（二）细胞生理变化胞内水分减少，细胞萎缩，体积变小，与正常细胞相比衰老细胞含水量明显下降细胞皱缩。代谢速度减慢，生活力降低，检测发现有些酶的活性下降。呼吸速率减慢，衰老细胞的呼吸强度下降。1.3、细胞衰老的机理氧化损伤：氧自由基引发氧化性损伤积累。端粒的变化：细胞衰老的“有丝分裂钟”rDNA变化：染色体外rDNA环（ERC）的积累。沉默信息调节蛋白复合物：异染色质区阻断DNA转录。SGS1基因、WRN基因：编码解旋酶，sgs1突变体寿命明显短于野生型（平均9.5代:24.5代）;wrn突变：引发早老症.发育程序与衰老:mtDNA突变积累。线粒体DNA与衰老氧化性损伤学说—衰老自由基理论

20世纪50年代首先由Harman提出，认为生物在代谢过程中，可产生很少的活性氧（ROS），包括超氧自由基、羟自由基和H2O2，这些有很高的氧化活性，可引起脂类、蛋白质和核酸氧化性损伤，从而导致细胞结构损伤和破坏。果蝇转入并高效表达了Cu/ZnSOD和过氧化氢酶的转基因，果蝇的寿命比正常果蝇延长了34%。有人将人的SOD1基因转入成年果蝇神经细胞中，发现它的寿命延长了40%。最新研究认为，人体表皮的细胞衰老是由于葡萄糖代谢产生自由基，它在细胞内乱撞导致细胞因子受损，细胞衰老死亡出现斑块，自由基进入核撞击基因使基因改变，细胞发生癌变。有人将小鼠的谷胱甘肽过氧化物酶基因及SOD1、SOD2和SOD3基因中的一种剔除，并没发现引起细胞衰老。端粒钟学说

随着细胞的每次分裂，端粒不断缩短，当缩短到一个阈值时，细胞就进入了衰老。1998年Wright等人将人的端粒酶反转录酶亚基的基因引入正常人的二倍体细胞，发现传染细胞的端粒长度明显增加，分裂旺盛，同时作为细胞衰老标志的β半乳糖苷酶的活性明显降低，细胞寿命较正常细胞增加了至少20代，这一证据说明端粒长度与细胞衰老有着密切的关系。1998年Garman等人研究认为叙利亚仓鼠胚细胞在复制分裂各阶段始终表达端粒酶，端粒长度并没变短，经过20-30代分裂后，细胞依照衰老。有人将去除端粒酶基因的小鼠传了5代，止今仍未发现寿命比一般鼠要短。故此端粒钟学说还需有更多的实验依据。染色体外rDNA环（ERC）的积累

以一种酵母细胞为材料进行的，认为细胞衰老的步伐是由rDNA的变化决定的。当酵母菌达到生命“中年”的某一时刻时，经过同源重组产生的第一份环状rDNA片段就会冲出染色体，成为染色体外的rDNA环，随着细胞不断分裂，这种rDNA环不断复制增加，当积累到500-1000份拷贝时，细胞就进入了衰老。双向电泳试验也证明，衰老细胞中积累有许多密闭的环状rDNA，而年轻细胞中含量极少。故此染色体外rDNA的积累，导致了细胞的衰老。Sir复合物沉默信息调节蛋白复合物（Sir1、Sir2、Sir3、Sir4），一般存在于异染色质中，该复合物的作用是阻止它们所在位点的DNA转录。1994年Kennedy肯尼迪等人在一种酵母突变体发现了Sir3蛋白和Sir4蛋白由端粒处向着核仁处转移，这种转移伴随着酵母寿命的延长。进一步研究发现，突变体中的Sir4蛋白的C端有121个氨基酸被除掉了，除掉的这个区域本来是Sir4蛋白与端粒和其他蛋白相互作用的部位，由于这个区域的去除，Sir复合物能够自由定位，并从端粒处转移到了核仁，而Sir复合物到达核仁，又抑制了rDNA的转录，使核仁rDNA处于沉默状态不能复制，从而造成染色体外rDNA环（ERC）生成和积累量减少，ERC量增加细胞衰老加快，减少则意味着细胞寿命延长。SGSI基因及WRN基因

酵母细胞中发现了一种突变体，该突变体因突变缺失了SGSI基因，而且寿命短，野生型平均分裂24.5代，突变体平均分裂9.5代，表明SGSI基因缺失影响了酵母的寿命。SGSI蛋白合成后定位在核仁中，作用是阻止核仁裂解，如果缺少这种蛋白，核仁就会裂解为小体。人类发现了一种早衰疾病——Werner综合症（WS），病人30多岁会出现一些正常老年人的衰老现象，如动脉硬化、骨质疏松、Ⅱ型糖尿病、肿瘤等等。从WS病人细胞中分离出了一种突变基因——WRN基因。WRN基因与酵母突变体SGSI基因同源，WRN蛋白含有7个DNA解旋酶所特有的标志序列，WRN蛋白突变，可影响其正常功能，使DNA不能正常解旋复制，由此造成DNA复制的严重障碍。正常人皮肤的成纤维细胞中，WRN蛋白存在于核仁中，WS病人的成纤维细胞中看不到典型的WEN蛋白。发育程序与衰老

线虫的生命周期:幼虫期为4天，然后达到性成熟并进入成虫期，延续数周后，进入衰老与死亡。幼虫发育过程中遇到不良环境（虫口过密、食物短缺和高温），引起性外激素浓度变化，结果幼虫进入一种特殊的dauer幼虫阶段，可以延续6个月。此时幼虫全身被以角质化的层、口紧闭、处于休眠状态；如环境条件改善，又可发育成成虫，经过数周，完成其生活史。遗传分析发现，存在着两种Dauer幼虫形成基因：daf2（编码胰岛素受体）和age1（编码磷脂酰肌醇-3-激酶P110催化亚基）：正常状态下两个基因表达，决定了正常的成虫发育。daf16：编码一种转录活化剂：在饥饿或虫口过密的情况下，大量表达，并朝着dauer幼虫方向发育。在daf2和age1突变体中，daf2和age1部分表达，导致决定成虫发育和dauer幼虫特异性防御机制同时表达，完成正常的成虫发育，又获得了寿命延长特性（一般延长2-4倍）。线粒体DNA随着年龄增长线粒体DNA的突变显著增加，并表现出异质性线粒体DNA的突变可能导致电子传递链不能执行正常功能。如缺失突变引起细胞色素氧化酶的缺失，ATP水平和NAD/NADH比率下降，促进ROS的生成。mtDNA裸露于基质，缺乏结合蛋白的保护，最易受自由基伤害，而催化mtDNA复制的DNA聚合酶γ不具有校正功能，复制错误频率高。细胞死亡是生物界普遍现象，人体内细胞注定要死亡，有些死亡是生理性的，有些是病理性的。细胞死亡分类；坏死（necrosis），细胞突发性病理的死亡或生理环境急骤变化（如高热，缺氧等）所致。凋亡（apoptosis），个体发育过程中基因调控下的细胞自杀活动，是细胞有机体为调控机体发育，维持内环境稳定，由基因编码程序的细胞主动性死亡过程。细胞凋亡对机体的许多正常生理功能具有重要意义。细胞凋亡与众多疾病发生有密切关系。研究细胞凋亡生物学机制将可能揭示许多疾病的致病机制，为新治疗药物研发提供理论依据。2、细胞凋亡2.1、简介及基本概念（1）细胞凋亡：细胞凋亡的概念最早是由病理学家Kerr于1972年正式提出又被称为“细胞程序性死亡”（programmedcelldeath,PCD）细胞凋亡是一种具有形态特征和生化改变的细胞凋亡过程，这些改变是一系列基因活动引起的级联反应的结果细胞膜起泡，细胞体积缩小蛋白质聚集染色质逐渐聚集成新月状附在核膜周边，嗜碱性增强，进而断裂，但胞膜仍完整胞膜不断出芽、脱落，细胞变成数个大小不等的由膜包裹的凋亡小体凋亡小体被周围有吞噬功能的细胞如巨噬细胞、上皮细胞等吞噬、降解（2）凋亡形态学变化细胞凋亡的形态学变化胞内Ca2+浓度增高*胞内Ca2+浓度增高可能是凋亡的启动因素之一。内源性核酸内切酶激活，DNA片段化

Ca2+/Mg2+依赖性内源性核酸内切酶激活

→DNA核小体连接处被水解

→形成180－200bp（X）片段大分子如凋亡调节蛋白的合成。*凋亡的发生一般依赖于新的RNA和蛋白质合成。线粒体结构破坏与功能障碍（3）细胞凋亡的生物化学变化DNAladder的典型电泳图染色质降解,核小体间连接DNA部位被降解,产生寡聚核小体DNA片段,即180-200bp整数倍的不同长度的DNA片断.细胞坏死是由于外界因素的影响，诸如物理、化学损伤和生物的侵袭以及高温、低温或营养供给的阻断造成细胞急速死亡。细胞坏死过程包括三个阶段：胞膜直接破坏，大量水进入细胞，线粒体外膜肿胀而密度增加；核染色质呈絮状；蛋白质合成减慢。在坏死过程中，如及时去除伤害因素，以上早期反应尚可逆转。若伤害外因持续存在，则发生不可逆的变化。Ca2+升高、引起一系列变化，如细胞骨架破坏，溶酶体释放，PH下降，最后细胞膜和细胞器破裂，DNA降解，细胞内容物流出，引起周围组织炎症反应。（4）细胞凋亡与细胞坏死特征Apoptosisnecrosis诱导因素生理及弱刺激强烈刺激细胞数量单个细胞丢失成群细胞死亡膜完整性保持到晚期早期即丧失染色质凝聚成半月状稀疏成网状细胞核早期固缩断裂晚期破碎细胞器无明显变化肿胀、破损细胞内溶物无释放释放细胞形状形成凋亡小体破裂成碎片基因组DNA有控降解随机降解能量需求依赖ATP不依赖ATP大分子合成一般需要不需要后果不引起炎症引起炎症意义生理死亡方式病理死亡方式细胞凋亡与细胞坏死左，正常胸腺细胞；右，凋亡胸腺细胞（注意凋亡小体）

细胞坏与死与凋亡的形态区别程序性细胞死亡(programmedcelldeath.PCD)是功能性概念，描述一个多细胞生物体中某些细胞的死亡是个体发育中一个预定的、并受基因严格调控的正常组成部分。细胞凋亡是形态学概念，是对多途径引起的一系列特征性形态、生化变化的概括。PCD主要由细胞凋亡引起，但有的并非如此。细胞凋亡既有PCD部分，又有非程序性部分存在。PCD仅存在于发育细胞中，细胞凋亡可存在于发育细胞中，亦可出在于成体细胞中。（5）细胞凋亡与程序性细胞死亡特征细胞凋亡细胞程序性死亡形态学线粒体膜完整性染色质自吞噬潜伏期蛋白质合成始发因素典型细胞控制因素胞质生化变化第一生化改变细胞凝集、断裂不受影响能保持有边缘缺乏数分钟到数小时有糖皮质激素、生长因子撤除胸腺细胞＋糖皮质激素激素无变化内源性核内切酸酶激活细胞凝集、断裂自身吞噬能保持致密常见数小时有胚胎、变态发育胚胎神经元内分泌溶酶体酶增多蛋白质合成下降细胞凋亡与程序性细胞死亡比较他杀自杀坏死凋亡死亡2.1.1、细胞凋亡研究简史（1）细胞凋亡概念的形成阶段：1972年，建立和形成细胞凋亡的概念（2）细胞凋亡的生物化学研究阶段：DNA的特征性降解、蛋白质与RNA的合成、Ca2+浓度的变化、细胞凋亡的酶学研究（3）细胞凋亡的分子生物学研究阶段：80年代后期，主要研究细胞凋亡过程中相关的基因以及细胞凋亡信号转导系统等（4）细胞凋亡临床应用的基础研究阶段：1993年开始对细胞凋亡临床应用的基础研究，推动了临床医学的发展。2.1.2、生物学意义发育免疫系统衰老损伤与修复肿瘤发生病毒致病细胞凋亡在系统发育中的意义眼结构发育免疫系统（T淋巴细胞，阴阳筛选）2.1.3、细胞凋亡的应用前景探讨疾病的发生机制探讨药物及其治疗手段的作用机制在分子水平实现人为地调控细胞凋亡，达到治疗疾病的目的2.2、细胞凋亡的分子机制一、细胞凋亡的主要途径

二、细胞凋亡的调控2.2.1、细胞凋亡的主要途径

Anoverviewofthedeath-receptorpathwayandthemitochodrialpathway死亡受体途径及其信号传递（1）死亡受体(deathreceptor,DR)

与相应配体结合后可诱导细胞凋亡的一类跨膜受体。1）成员FasL/Fas（CD95/APO-1）TNF-α/TNFRITRAIL（TNF-relatedapoptosisinducingligand）（Apo-2L）/R4,R5（DDcontainreceptor）APO-3L（TWEAK）/DR3（APO-3）

死亡受体成员2）共同的结构特点均属TNFR家族成员胞外区N端含2-4个富含半胱氨酸的结构域（cysteinerichdomain,CRD）胞内区含1个由60-80个aa组成的死亡结构域（deathdomain,DD）,其可与胞浆死亡结构域蛋白（DDprotein，DDP）中的DD同源结合，启动并传递凋亡信号。

*DDP：分子中含DD的凋亡信号蛋白。包括TRADD、FADD、RIP、CRADD、MADD等。Anoverviewofthedeath-receptorpathway线粒体途径及其信号传递（1）γ射线或神经酰胺等

→破坏线粒体内电子传递和能量代谢

→细胞凋亡（2）释放Cas活化因子UX、Bax表达↑→细胞色素C释放

*cytochromeC与凋亡促进因子结合

（ApoptoticProteaseActivatingFactor-1）

→Apaf-1分子构象改变

→结合pro-Cas-9

→Cas-9活化

→水解pro-Cas-3

→Cas-3活化→细胞凋亡

*→呼吸链中断、ATP↓、氧自由基↑

→细胞凋亡HowtoactivateacapaseN-prop20p10a、processingbyanupstreamcaspaseThis‘caspasecascade’isusedfortheactivationofthethreeshortprodomaincaspases,caspase-3,-6and-7.c、AssociationwitharegulatorysubunitThemostcomplexactivationmechanismdescribedsofaristheoneusedbycaspase-9.Howtoactivateacapase一、细胞凋亡的基因调控二、细胞凋亡的蛋白调控2.2.2、细胞凋亡的调控细胞凋亡的基因调控基因是生物体活动的总指挥,调控细胞的生长与凋亡,细胞凋亡也离不开基因的作用。包括了TRPM-2,CED,BCL,ICE,c-myc,p53等。他们相互牵制,相互影响,共同影响细胞凋亡。bcl-2家族

抑制凋亡的bcl-2家族成员

Bcl-2、Bcl-XL、Bcl-w、Bfl-1、Bag-1、Mcl-1、A1促凋亡的bcl-2家族成员

Bax、Bak、Bok、BCL-XS、Bad、Bid、Bik、Blk、Hrk均含至少一种共有结构域（BH1、BH2）（Bcl-2homolougsdomain）

促凋亡的Bcl-2成员均含BH1-BH3。（1）Bcl-2（B-celllymphoma-2）1）表达：线粒体膜2）作用机制抑制线粒体释放deathpromotingfactor,DPF(cytochromeC、apoptosis-inducedfactor、pro-Cas)

→抗凋亡拮抗Bax

→维持线粒体结构完整性抑制线粒体释放细胞色素CThetopologyofthehumanBcl-2proteinisdepicted,showingthelocationsoftheBcl-2homology(BH)domains,thepredicted-helicalsegments,andthetransmembrane(TM)anchor.BindingofRaf-1andcalcineurinisBH4-dependent(first-helix).Alongflexibleloopbetweenthefirstandsecond-helicesisrequiredforBcl-2phosphorylationandmayrepresentanegative-regulatorydomain.TheBH3domain(second-helix)playstheroleof'ligand'duringdimerizationofBcl-2familyproteins,whereasthecombinationoftheBH1,BH2andBH3domainsappearstoberequiredforformingthehydrophobicgrooveintowhichtheBH3domaininserts.Thefifthandsixth-helicesarepredictedtoparticipateinchannelformation,presumablybypenetratinglipidbilayers.Bcl-2的作用需要一完整的膜结构

羧基端疏水，含一个由19个氨基酸伸展成的跨膜结构。胞内膜蛋白，常位于线粒体、光面内质网及核膜。羧基末端作为信号锚（signalanchor）序列插入线粒体外膜，缺乏信号锚序列的Bcl-2抗凋亡功能不完全。Bcl-2功能的发挥依赖于其在亚细胞膜的定位。Bcl-2氨基末端的大部分暴露于胞浆，与胞浆蛋白或其他同时锚定在线粒体的Bcl-2样分子相互作用。*Bcl-2能抑制氧化剂诱导的凋亡

Bcl-2能抗H2O2、t-丁基或甲萘醌（menadione）对细胞凋亡的诱导。Bcl-2可拮抗某些降低胞内还原型谷胱甘肽含量的制剂诱发的凋亡。上述结果提示ROS可能涉及能被Bcl-2阻遏的细胞凋亡途径。*Bcl-2影响细胞内钙内流

Bcl-2存在于内质网，而后者与胞内钙自稳的调节有关。Ca2+影响凋亡，因为某些核小体DNA的降解为钙依赖性，且Ca2+通道激活剂可诱导淋巴细胞凋亡。凋亡与Ca2+流从内质网进入胞质有关，且Bcl-2能阻断这种钙流。大量资料显示Bcl-2可延长细胞存活期，抑制各种因素，包括物理、化学、生物因素等对细胞凋亡的诱导。Bcl-2的超常表达与肿瘤的发生发展有关，但是，Bcl-2并不能阻抑所有细胞的凋亡。Bcl-2是凋亡途径中作用在许多信号汇集后的某个环节。因此，理论上细胞凋亡的下游途径可能不止一个。（2）Bax(bcl-2associatedXprotein）

*Bax超表达

→在线粒体膜形成多聚体

→影响线粒体完整性

*Bax形成同源二聚体

→抑制Bcl-2→诱导凋亡

*Bax与Bcl-2形成异源二聚体

→促进细胞生长

*胞内Bax与Bcl-2蛋白比例

→调控凋亡的发生。BAX在组织中广泛表达,是重要的异二聚体分子，促进细胞凋亡。Bcl-2必须结合BAX才能发挥其作用，Bcl-2蛋白中BH1和BH2结构域对结合BAX具有很强的重要性。Bcl-2与BAX蛋白量的比率决定异二聚体（Bcl-2/BAX）与同二聚体（BAX/BAX）的比值，一般而言，Bcl-2的过度表达与BAX形成异二聚体而阻抑凋亡。

TheactivationofBaxActivationrequiresthereleaseofinhibitingfactors(yellow)andtheassociationofactivatingfactorsincludingBH3-onlyproteins(grayandbluegreen).TheassociationofthesefactorscausesBaxtoundergoconformationalchangesthatallowittobeinsertedintotheoutermitochrondrialmembrane(lightblue)andtooligomerize,resultinginthereleaseofmitochondrialapoptoticfactorsintothecytosol.野生型P53

→cdk-interactingprotein表达↑

→CDK2活性↓

→抑制细胞进入DNA合成期

→DNA受损的细胞停滞于G1期

↓

↓

细胞启动

细胞修复无效

自身修复机制

↓p53

介导细胞发生凋亡P53结构示意图DNA损坏后的p53的活化是通过pk激酶的级联反应来调节的。ATM激酶(mutatedinthefamilialcancersyndromeataxiatelangiectasia)被DNA的损坏所激活，并磷酸化Chk-2激酶。Chk-2激酶在丝氨酸15和20位点磷酸化p53，破坏Mdm2-p53相互作用。P53的一个目的基因是CKIp21CIP1，此基因抑制cyclinE和cyclinA/CDK复合体，引起G1期的停滞。Bax基因也可被p53活化。细胞凋亡的蛋白质调控因子肿瘤坏死因子（tumornecrosisfactor,TNF）能够诱导细胞凋亡。TNF是一类主要由激活的巨噬细胞产生的细胞因子，能够通过激活Caspase蛋白酶、转录因子NF-κB、有丝分裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activatedproteinkinase,MAPK）等途径，实现其细胞毒性、抗病毒、免疫调节及转录调节等多种生物学活性。着重介绍TNF诱导细胞凋亡的信号转导途径.（1）TNF配体家族

TNF家族成员有：TNF-α、LT-α、LT-β、FasL、CD40L、CD30L、CD27L、4-1BBL、OX40L、TRAIL、TRANCE等。TRAIL又称Apo-2L，与Fas/Apo1很相似，C端也可以形成三聚体。TRAIL的胞外区能够介导淋巴细胞和多种肿瘤细胞系凋亡。TRANCE（TNF-relatedactivation-inducedcytokine）细胞外区和TRAIL、FasL及TNF相似。TRANCE受T细胞及Ca2+调节的转录因子的调控，在淋巴器官的T细胞中表达水平最高。（2）TNF受体超家族

TNF配体家族的成员是通过与细胞膜上的相应受体结合，激活受体，而启动细胞内诱导细胞凋亡机制的。TNF受体家族成员：TNFR1、TNFR2、Fas、CD40、NGF-R、CD30、TNF-RP、PV-T2、PV-A53R、4-1BB、OX40、CD27、DR3、CAR1、DR4、DR5、TRID等。TNFR1、Fas、NG