第六章 诊断酶学

诊断酶学第六章酶是一类生物催化剂，指具有生物催化功能的高分子物质。生物体内含有数千种酶，它们支配着生物的新陈代谢、营养和能量转换等许多催化过程，与生命过程关系密切的反应大多是酶催化反应。但是酶不一定只在细胞内起催化作用。在酶的催化反应体系中，反应物分子被称为底物，底物通过酶的催化转化为另一种分子。第一节概述酶催化作用实质：降低化学反应活化能。蔗糖酶特点1．高效性：酶的催化效率比无机催化剂更高，使得反应速率更快；2．专一性：一种酶只能催化一种或一类底物，如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽。3．多样性：酶的种类很多，迄今为止已发现约4000多种酶，在生物体中的酶远远大于这个数量。4．温和性：是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的。5．活性可调节性：包括抑制剂和激活剂调节、反馈抑制调节、共价修饰调节和变构调节等。6．易变性：大多数酶是蛋白质，因而会被高温、强酸、强碱等破坏；7．有些酶的催化性与辅助因子有关。酶与无机催化剂比较：1．相同点：1）改变化学反应速率，本身几乎不被消耗；2）只催化已存在的化学反应；3）加快化学反应速率，缩短达到平衡时间，但不改变平衡点；4）降低活化能，使化学反应速率加快。5）都会出现中毒现象。2．不同点：即酶的特性，包括高效性，专一性，温和性（需要一定的pH和温度）等。酶的生理功能酶是人体内新陈代谢的催化剂，只有酶存在，人体内才能进行各项生化反应。人体内酶越多，越完整，其生命就越健康。当人体内没有了活性酶，生命也就结束。人类的疾病，大多数均与酶缺乏或合成障碍有关。细胞修复、消炎排毒、新陈代谢、提高免疫力、产生能量、促进血液循环。。。。“今年的诺贝尔生理学或医学奖颁给三名科学家，他们解决了生物学的一个重大问题：在细胞分裂时染色体如何完整地自我复制以及染色体如何受到保护以免于退化。这三位诺贝尔奖获得者已经向我们展示，解决办法存在于染色体末端—端粒，以及形成端粒的酶—端粒酶。”“2009年诺贝尔生理学或医学奖--端粒和端粒酶伊丽莎白·布莱克本卡罗尔·格雷德杰克·绍斯塔克“携带基因信息的DNA线状长分子挤压形成染色体，端粒就像一顶高帽子置于染色体头上。伊丽莎白-布莱克本和杰克-绍斯塔克发现端粒的一种独特DNA序列能保护染色体免于退化。卡罗尔-格雷德和伊丽莎白-布莱克本确定了端粒酶，端粒酶是形成端粒DNA的成分。这些发现解释了染色体的末端是如何受到端粒的保护的，而且端粒是由端粒酶形成的。”

“如果端粒缩短了，细胞就会老化。相反，如果端粒酶的活动显著，端粒的长度也就能得以保持，并且细胞衰老也将延后。癌细胞就是一个例子，癌细胞被认为是具有永久生命力的。相反，某些特定的遗传疾病，会出现一些有缺陷的端粒酶这样的特征，导致损害细胞。对此诺贝尔奖颁给这一细胞基本机制的发现，这一发现有助于新的治疗措施的发展。”端粒酶端粒（Telomere）是真核细胞染色体末端的特殊结构。人端粒是由6个碱基重复序列（TTAGGG）和结合蛋白组成。没有端粒，则DNA末端暴露，易被外切酶水解。端粒酶是一种由催化蛋白和RNA模板组成的酶，可合成染色体末端的DNA,赋予细胞复制的永生性。按照酶的化学组成可将酶分为单纯酶和复合酶两类。单纯酶分子中只有氨基酸残基组成的肽链，结合酶分子中则除了多肽链组成的蛋白质，还有非蛋白成分，如金属离子、铁卟啉或含B族维生素的小分子有机物。

单纯酶与结合酶结合酶的蛋白质部分称为酶蛋白，非蛋白质部分统称为辅助因子(cofactor)，两者一起组成全酶(holoenzyme)；只有全酶才有催化活性，如果两者分开则酶活力消失。非蛋白质部分如铁卟啉或含B族维生素的化合物若与酶蛋白以共价键相连的称为辅基(prostheticgroup)，用透析或超滤等方法不能使它们与酶蛋白分开；反之两者以非共价键相连的称为辅酶(coenzyme)，可用上述方法把两者分开。分类根据酶所催化的反应性质的不同，将酶分成六大类：1.氧化还原酶类促进底物进行氧化还原反应的酶类，是一类催化氧化还原反应的酶，可分为氧化酶和还原酶两类。2.转移酶类催化底物之间进行某些基团（如乙酰基、甲基、氨基、磷酸基等）的转移或交换的酶类。例如，甲基转移酶、氨基转移酶、乙酰转移酶、转硫酶、激酶和多聚酶等。3.水解酶类催化底物发生水解反应的酶类。例如，淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、磷酸酶、糖苷酶等。4.裂合酶类催化从底物（非水解）移去一个基团并留下双键的反应或其逆反应的酶类。例如，脱水酶、脱羧酶、碳酸酐酶、醛缩酶、柠檬酸合酶等。许多裂合酶催化逆反应，使两底物间形成新化学键并消除一个底物的双键。5.异构酶类催化各种同分异构体、几何异构体或光学异构体之间相互转化的酶类。例如，异构酶、表构酶、消旋酶等。6.合成酶类催化两分子底物合成为一分子化合物，同时偶联有ATP的磷酸键断裂释能的酶类。例如，谷氨酰胺合成酶、DNA连接酶、氨基酸：tRNA连接酶以及依赖生物素的羧化酶等。酶的活力酶活力单位（U，activeunit）：1个酶活力单位是指在特定条件（25℃，其它为最适条件）下，在1min内能转化1μmol底物的酶量，或是转化底物中1μmol的有关基团的酶量。比活:每分钟每毫克酶蛋白在25℃下转化的底物的微摩尔数。比活是酶纯度的测量。活化能:将1mol反应底物中所有分子由基态转化为过渡态所需要的能量。活性部位:酶中含有底物结合部位和参与催化底物转化为产物的氨基酸残基部分。活性部位通常位于蛋白质的结构域或亚基之间的裂隙或是蛋白质表面的凹陷部位，通常都是由在三维空间上靠得很紧的一些氨基酸残基组成。活性测定初速度：酶促反应最初阶段底物转化为产物的速度，这一阶段产物的浓度非常低，其逆反应可以忽略不计。米氏方程:表示一个酶促反应的起始速度（υ）与底物浓度([s])关系的速度方程：υ=υmax[s]/(Km+[s])其中Km值称为米氏常数，vmax是酶被底物饱和时的反应速度，[s]为底物浓度。米氏常数:对于一个给定的反应，使酶促反应的起始速度（υ0）达到最大反应速度（υmax）一半时的底物浓度(

Km=[s]），单位一般为mol/L，只由酶的性质决定，而与酶的浓度无关。可用的值鉴别不同的酶。υ=υmax[s]/(Km+[s])Km值可近似的反映酶与底物的亲和力大小：Km值大，表明亲和力小；Km值小，表明亲合力大。双倒数图:使1/v对1/[S]作图，可以获得一条直线。从直线与x轴的截距可以得到1/Km的绝对值；而1/Vmax是直线与y轴的截距。双倒数图直观、容易理解，为酶抑制研究提供了易识别的图形。

酶促反应的影响因素及反应条件的选择(一)酶浓度酶促反应速度与酶分子的浓度成正比。当底物分子浓度足够时，酶分子越多，底物转化的速度越快。然而，当酶浓度很高时，并不保持这种关系，曲线逐渐趋向平缓。根据分析，这可能是高浓度的底物夹带有许多的抑制剂所致。病理情况下，酶浓度过高时，底物过早且过多被消耗，影响酶活性测定。

(二)底物的种类和浓度

在生化反应中，若酶的浓度为定值，底物的起始浓度较低时，酶促反应速度与底物浓度成正比，即随底物浓度的增加而增加。当所有的酶与底物结合生成中间产物后，即使在增加底物浓度，中间产物浓度也不会增加，酶促反应速度也不增加。研究酶的生理作用时，一般选择Km最小的最适底物。临床酶学测定时，先考虑有较高诊断价值的底物。一般酶测定时底物浓度最好为Km的10－20倍。

(三)缓冲液的种类、离子强度和pH酶在最适pH范围内表现出活性，大于或小于最适pH，都会降低酶活性。主要表现在两个方面：

①改变底物分子和酶分子的带电状态，从而影响酶和底物的结合；

②过高或过低的pH都会影响酶的稳定性，进而使酶遭受不可逆破坏。

人体中的大部分酶所处环境的pH值越接近7，催化效果越好。但人体中的胃蛋白酶却适宜在pH值为1~2的环境中，胰蛋白酶的最适pH在8左右。不同种类的缓冲液配制相同pH介质所测酶活性并不相同。缓冲液的离子强度也影响酶的活性。各种体液样品本身也是缓冲液，也会影响酶活性测定结果，一般样品在总体积中的比例应不超过10％。缓冲液中的物质不应与分析系统中的任何物质反应。(四)温度

酶在最适温度范围内，酶活性最强，酶促反应速度最大。在适宜的温度范围内，温度每升高10℃，酶促反应速度可以相应提高1～2倍。不同生物体内酶的最适温度不同。

如，动物组织中各种酶的最适温度为37～40℃；微生物体内各种酶的最适温度为25～60℃酶的最适温度与底物浓度、pH、离子强度、保温时间等许多因素有关；测定酶活性推荐3种温度；如250C，30℃和37℃。我国推荐温度为37℃。酶制剂应保存在冰箱中，取出后应恢复至室温立即应用，以免发生变性。(五)激活剂与抑制剂能激活酶的物质称为酶的激活剂。激活剂种类很多，有①无机阳离子，如钠离子、钾离子、铜离子、钙离子等；②无机阴离子，如氯离子、溴离子、碘离子、硫酸盐离子磷酸盐离子等；③有机化合物，如维生素C、半胱氨酸、还原性谷胱甘肽等。

许多酶只有当某一种适当的激活剂存在时，才表现出催化活性或强化其催化活性，这称为对酶的激活作用。而有些酶被合成后呈现无活性状态，这种酶称为酶原。它必须经过适当的激活剂激活后才具活性。抑制作用酶抑制作用是指酶的功能基团受到某种物质的影响，而导致酶活力降低或丧失的作用。该物质即称为酶抑制剂。酶抑制剂对酶有选择性，是研究酶作用机理的重要工具。1.竞争性抑制作用：通过增加底物浓度可以逆转的一种酶抑制类型。竞争性抑制剂通常与正常的底物或配体竞争同一个蛋白质的结合部位。这种抑制使Km增大而υmax不变。2.非竞争性抑制作用:抑制剂不仅与游离酶结合，也可以与酶-底物复合物结合的一种酶促反应抑制作用。这种抑制使Km不变而υmax变小。3.反竞争性抑制作用:

抑制剂只与酶-底物复合物结合而不与游离的酶结合的一种酶促反应抑制作用。这种抑制使Km和υmax都变小但υmax/Km不变。临床酶学测定中广泛应用金属离子等激活剂来提高测定的灵敏度。在设计和选择酶测定方法时，应避免抑制剂对酶促反应的影响。如脲酶测定，先通过透析、凝胶色谱或超滤等方法将尿中一些小分子抑制剂与酶分开。第二节血清酶一、血清酶的来源

1、血浆特异酶：作为血浆蛋白的固有成分，在血浆中发挥特定的催化作用的酶。如与凝血、纤溶有关的酶等。以酶原形式分泌入血。多数在肝脏合成，肝功能减退时，血浆中这些酶活性降低。另外：ChE（乙酰胆碱酯酶）、铜氧化酶(铜蓝蛋白)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)和脂蛋白酯酶等。

2、非血浆特异酶：

①外分泌酶：来源于消化腺或其他外分泌腺的酶。如胰淀粉酶、胰蛋白酶和前列腺酸性磷酸酶等。在血液中含量与相应的分泌腺的功能及疾病有关。

②细胞酶：存在于各组织细胞中进行代谢的酶类。随着细胞的新陈代谢，有少量酶释入血液。只有小部分来源于特定组织，有器官专一性。二、血清酶的去路

1．血清酶的半寿期：酶失活至原来活性一半时所需时间称为酶的半寿期(T1／2)。代表酶从血中清除的快慢。2．血清酶的失活和排泄：酶主要是在血管内失活或分解的。三、血清酶变化的病理机制

(一)酶合成异常

1．合成减少：肝损害时，如：血清中胆碱酯酶（ChE）常和清蛋白的浓度相平行;肝病时因卵磷脂胆固醇酰基转移酶（LCAT）合成的减少而使血清中该酶浓度降低，并且比血清清蛋白的减少更为灵敏。酶基因变异，如肝豆状核变性患者，血中铜氧化酶可明显下降。

2．合成增多：增生性疾病，如骨骼疾病时，因成骨细胞增生，合成分泌更多的碱性磷酸酶（ALP）。恶性肿瘤，肿瘤细胞中酶的合成增加，如前列腺癌细胞产生大量酸性磷酸酶（ACP）。酶的诱导作用，如巴比妥类、乙醇药物可诱导肝γ-谷氨酰转移酶(γ-GT）的合成，血清中的酶活性随之增高。

(二)酶释放增加

细胞酶的释放的影响因素：

1．细胞内外酶浓度的差异：如肝细胞内乳酸脱氢酶（LD）大于细胞外液的3000倍以上，红细胞中此酶亦大于血浆的200倍。

非血浆特异酶，只要有少量细胞受损伤，酶从细胞中释出，血液中酶明显升高。

2．酶的相对分子量：各种酶从胞内释出的速度与酶的相对分子量成反比。

3．酶的组织分布：如临床常用的谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶(ALT）和肌酸激酶（CK）三种酶分别以心、肝和骨骼肌含量最丰富。含酶量高且血流丰富的组织器官，病变时可引起血清酶活性变化。

4．酶在细胞内的定位和存在形式：线粒体中的酶不易从细胞中释出，如谷氨酸脱氢酶（GLD）、线粒体型天冬氨酸氨基转移酶（ASTm）及苹果酸脱氢酶(MDm)。和结构蛋白结合，或以多酶复合物的形式存在，较难释出细胞。

(三)酶排出异常肾功能减退时，血清淀粉酶（AMY）活性升高;胆道梗阻时，血清ALP升高;很多疾病时血清酶增高的机制是多方面的，是多种因素综合作用的结果。

四、血清酶的生理差异许多因素可引起人血清中某些酶浓度的生理性变化。如性别、年龄、饮食、锻炼或日周期节律、人种、地理及其他环境因素等。应注意生理差异对测定结果的影响。

1、性别：无差异，少数酶如CK、谷氨酰转肽酶GGT，男>女。

2、年龄：血清中有些酶的活性常随年龄而变化。

例：CK、LD；年龄引起酶变化最明显的酶是ALP。

3、进食：不受饮食影响，故不必空腹采血。高脂、高糖饮食后血清ALP活性升高。

酗酒可引起GGT明显升高。

4、运动：肌肉中含量丰富的CK、LD、AST与运动量及持续时间有关，抽血前不宜过度运动。

5、妊娠与分娩：妊娠期某些酶升高，如铜氧化酶升高，分娩时，CK、CK-BB、AST、LD等升高。

6、其他：种族差异、与体重、身高的增长、体位改变、昼夜变化及家庭因素等有关。酶活性浓度的测定技术一、概述正常人血中大部分酶一般在pg到ng水平。常用的酶学测定方法：“酶活性浓度”。按监测方法分类分为：量气法、分光光度法、荧光法和放射性核素法、电极法和其他方法。以分光光度法最为常用。

分光光度法：50年代起采用最大优点：扩大了测定范围，波长范围更宽。结合工具酶的偶联反应，应用NAD(P)H和NAD(P)＋吸收光谱差异建立的测定各种脱氢酶活性浓度的方法，可应用于各种血清酶活性的测定。自动生物化学仪和配套用试剂盒。

荧光法和放射性核素法：荧光法或放射性核素法灵敏度较高，适用酶浓度很低的标本。通过荧光光度计测定，根据荧光强弱的变化换算出酶的活性。例：还原型的NAD(P)H有强烈的荧光，所有以NAD(P)＋为辅酶的氧化还原酶类均可用荧光法进行测定。

二、酶活性浓度的测定按反应时间将酶活性浓度测定方法进行分类，可分为：定时法、连续监测法。

1．定时法：早期测定酶活性浓度的方法测定一段这段时间内底物的减少量或产物的生成量，计算酶促反应平均速度。

优点：比较简单，因测定时酶促反应已终止，故比色计或分光光度计无需保温设备，显色剂的选择也不考虑对酶活性的影响。

缺点：无法知道整个酶促反应中是否都是零级反应。

2．连续监测法：连续测定酶反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间变化的多点数据，求出酶反应初速度，间接计算酶活性浓度。优点：方法简单，可将多点的测定结果连接成线，容易找到成直线的区段，观察到是否偏离零级反应，因而可选择线性反应期来计算酶活性，不需终止反应。

三、连续监测法测定酶活性浓度

(一)连续监测法的种类

1．直接法：在不终止酶促反应下，直接测定反应体系中底物或产物理化特性的变化如吸光度、荧光、旋光性、pH等，计算酶活性浓度。分光光度法应用最广泛，最成熟的一种

2．间接法：1）在原来反应体系中加入一些试剂，只和酶反应物迅速作用，产生可被仪器检出的物质变化，但同时不和酶作用，也不影响酶活性。例：是血清ChE的丁酰硫代胆碱测定法。

2）酶偶联法：应用最多，最广泛的，即在原反应体系中加入另一些酶试剂，所进行的酶促反应和被测酶反应偶联起来。(二)酶偶联反应最简单(单底物反应只有一个工具酶)模式为：被测定酶(Ex)催化的反应称始发反应；产生被检测物质产物C(如NADH)的反应称为指示反应，相应的偶联酶(第二个酶)酶称指示酶(Ei)。

(三)干扰因素

1．其他酶和物质的干扰：

2．酶的污染：因试剂用酶多从动物组织或细菌中提取，易污染其他酶，如不除去将引起测定误差。3．非酶反应：4．分析容器的污染：5．沉淀形成：

四、工具酶在酶学分析中作为试剂用于测定化合物浓度或酶活性浓度的酶。常使用酶偶联体系测定，指示酶和辅助酶作为反应系统中的试剂。

(一)常用工具酶及其质量要求常用工具酶多为氧化还原酶类工具酶纯度不必求过高，才能降低作为试剂的成本。但减少或避免干扰测定的副反应。

(二)工具酶参与的指示反应最常用两类分光光度法：

1）利用较高特异性的氧化酶产生过氧化氢(H202)，再加氧化发色剂比色；

2）利用氧化-还原酶反应使其连接到NAD(P)－NAD(P)H的正／逆反应后，直接通过分光光度法或其他方法测定NAD(P)H的变化量。

六、酶活性浓度的单位

(一)酶活性单位惯用单位，国际单位，Katal单位

(二)酶活性浓度单位

酶活性浓度以每单位体积所含的酶活性单位数表示。

1．表示方法：U／L

2．酶活性浓度单位的计算：利用标准管法、标准曲线法或摩尔消光系数法进行计算求取酶活性浓度单位。酶的免疫化学测定

(一)测定原理

RIA分：直接法：将放射性核素标记的酶分子与相应抗体作用产生沉淀，然后将沉淀分离并进行定量测定。间接法：将样品中无放射性的酶蛋白与放射性标记的标准酶共同对有限量的抗体进行竞争，根据其竞争程度来定量样品中的酶蛋白量。两种表示结果：

1）用酶活性浓度单位：U／L；2）用质量浓度单位，：直接用ng／ml或pg／L报告。临床医生应注意报告方式不同所带来的差异。

(二)免疫化学测定的优缺点优点：①灵敏度高，少量或痕量酶；②特异性高，不受体液中其他物质，如酶抑制剂、等的影响；③能测定不表现酶活性的酶蛋白，如酶原或去辅基酶蛋白，或因遗传变异合成无活性的酶蛋白的测定；④特别适用于同工酶的测定

局限性：①要制备足够量的提纯酶作为抗原和具有免疫化学性质的抗血清；②测定步骤多，操作繁琐；③测定成本高。同工酶及其亚型测定

一、概念

同工酶：催化功能相同而结构不同的一类酶。同工酶是同一种属中由不同基因或等位基因所编码的多肽链单体、纯聚体或杂化体。“亚型”，也称为同工型:某些酶或同工酶从组织进入体液后，进一步变化为数个不同类型。由于翻译后修饰的差异所形成的多种形式的一类酶。二、分析方法临床同工酶的分析:1）分离出某酶的各同工酶组分；2）测定酶的总活性和各同工酶或亚型组分的活性。

如人的血清中有乳酸脱氢酶（LDH），用电泳方法可将其分成五个区带，表明LDH由五种不同的酶分子组成。在临床上，分析病人血清中某种酶的同工酶变化可以起到辅助诊断作用。

乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱电泳法注意事项：用电泳法进行同工酶分析时，如显示的区带数与同工酶数不一致时，要注意巨分子酶的存在。形成原因主要有：①酶与免疫球蛋白形成的复合物；②酶与其他蛋白质形成的复合物；③酶亚基或酶分子之间形成的聚合物，如CK-Mt聚合物、LD亚基自身聚合等。如临床症状不明显，血清酶活性不正常但临床表现不典型，同工酶图谱异常时要警惕血清中有无巨分子酶。

巨酶血清中有时可出现相对分子质量远大于正常酶分子的一些酶,通常称为巨分子酶,简称为巨酶。巨酶因其分子量大,在体内不易排出,也不易被巨噬细胞系统吞噬而降解,又因其有较长的半衰期,故在血中存留时间较长,它的存在将会严重干扰临床常规酶测定的正确性,极易造成对酶测定结果的错误判断和临床误诊。近年来发现,血清中某些巨酶具有重要的诊断价值,某些巨酶却易导致临床疾病的误诊。巨分子酶的研究是临床诊断酶学的重要课题。鉴定巨分子酶的方法有以下几种:琼脂糖凝胶电泳(电泳时须同时做质控血清以资对照)、柱层析法、超速离心法、酶活化能测定、热失活试验、免疫学方法和电泳法结合进行鉴定。

巨酶的鉴定方法热实活试验利用酶和巨酶的耐热性不同而将巨酶鉴定出来。如巨CK的鉴定,45℃20min,测定CK残余活性,CK-BB、CK-MB几乎完全失活,而巨CK不受影响;又如巨淀粉酶与正常淀粉酶,在45℃和25℃分别比较两种血清淀粉酶的活性时,由于温度升高而活性增强者为巨淀粉酶。色谱法常用柱色谱，方法费时繁琐，不适合临床同工酶常规检测。免疫分析法同工酶的免疫化学性质也不同。利用纯化的同工酶免疫动物制备特异性的抗血清。抗原决定簇不同的同工酶可用特异的免疫反应来识别。应用较多的免疫分析法有免疫抑制法、免疫沉淀法等。第三节

临床常用血清酶、同工酶

及其亚型分析

临床上根据酶浓度的变化用以辅助诊断。

若酶浓度变化由细胞坏死或细胞膜通透性变化引起，表示脏器或组织损伤；

若为细胞内酶合成增加所致，提示组织再生、修复、成骨或异位分泌，或提示有恶性肿瘤的可能；

若为酶排泄障碍引起者说明有梗阻存在。酶谱：指同时测定的一组性质不同的酶，通过比较各酶活性的变化，根据酶增高或减少的“谱型”做出诊断。

(1)心肌酶谱：简单而有效的心肌酶谱由CK、CK-MB、CK-MB亚型或CK-MM亚型组成。

(2)肌酶谱：用于对骨骼肌疾病的诊断和监护。可供选择的酶有CK、LD、AST及其各自同工酶。若能再加CK-MM亚型则更为理想。

(3)肝酶谱：用来判断有无肝实质细胞损伤、肝内外胆汁淤积等肝胆疾病。

（4）肿瘤酶谱：具有器官特异性的有ACP及其同工酶、ALP及其同工酶、γ-GT及其同工酶、AFU、AMY及其同工酶、LPS等；非器官特异性的有ALT、CK同工酶、ALD同工酶、LD同工酶等。

（5）胰酶谱：主要用于急性胰腺炎的诊断和鉴别诊断。有AMY及其同工酶等。

一转氨酶转氨酶是催化氨基酸与酮酸之间氨基转移的一类酶。普遍存在于动物、植物组织和微生物中，心肌、脑、肝、肾等动物组织以及绿豆芽中含量较高。转氨酶参与氨基酸的分解和合成。

此酶催化某一氨基酸的α-氨基酸转移到另一α-酮酸的酮基上，生成相应的氨基酸，原来的氨基酸则转变成α-酮酸。检测意义转氨酶是人体肝脏这个“化工厂”正常运转过程中必不可少的“催化剂”，是肝脏的一个“晴雨表，肝细胞是转氨酶的主要生存地。当肝细胞发生炎症、中毒、坏死等时会造成肝细胞的受损，转氨酶便会释放到血液里，使血清转氨酶升高。在高等动物各组织中，活力最高的转氨酶是谷氨酸：草酰乙酸转氨酶（GOT）和谷氨酸：丙酮酸转氨酶（GPT）。GOT以心脏中活力最大，其次为肝脏；GPT则以肝脏中活力最大，当肝脏细胞膜破裂损伤时，谷丙转氨酶GPT释放到血液内，于是血液内酶活力明显地增加。

在临床上测定血液中转氨酶活力可作为诊断的指标。如测定GPT活力可诊断肝功能的正常与否，急性肝炎患者血清中GPT活力可明显地高于正常人；而测定GOT活力则有助于对心脏病变的诊断，心肌梗塞时血清中GOT活性显示上升。转氨酶(ALT，AST)及其同工酶AST同工酶：细胞质(ASTs)、线粒体(ASTm)；ALT同工酶：细胞质(ALTs)、线粒体(ALTm)；

组织分布：

AST含量：心>肝>骨骼肌>肾。

ALT含量：肝>肾>心>骨骼肌等。肝ALT多存在于胞质，肝中AST多存在于线粒体。生理变异：变异不大。标本的采集、处理和贮存：忌溶血，宜用血清，贮40C冰箱一周，活性无变化，忌冰冻。正常值：谷草转氨酶GOT：0-37u/L谷丙转氨酶GPT：0-40u/L

1、丙氨酸氨基转移酶(ALT）—GPT

肝炎时血清ALT升高，与病情轻重相平行,是肝损伤的一个很灵敏指标；ALT半寿期长，是判断急肝恢复的一个好指标。慢肝特别是慢性活动性肝炎ALT常升高。重症肝炎（大量肝细胞坏死）血中ALT仅轻度增高，临终时明显下降，但胆红素进行性升高，即“胆酶分离”。另外：胆石症、胆囊炎、肝癌、有些药物如异菸肼、利福平等ALT升高。

2、天冬氨酸氨基转移酶(AST)—GOT

在AMI时升高迟于CK，恢复早于LD，诊断价值不大。在肝中AST低于心肌，主要存在于线粒体中病变轻的肝病如急性肝炎ALT>AST慢性肝炎，肝硬化时，病变累及线粒体，AST>ALTAST／ALT比值正常约为1．15，急性肝炎时<1，慢性肝炎，比值升高，肝硬化，比值≥2．0。转氨酶偏高首先：非病理性的升高一般在100以下其次，转氨酶升高，有可能是其他疾病，并不一定都是肝脏疾病。比如心脏疾病、肾炎、胆囊疾病等等均可以导致转氨酶上升。

最后，转氨酶与肝病严重程度并不完全平行，这就意味着，有可能你的转氨酶只有几十，但是你的肝病已经很严重，也有些病人的转氨酶高达2000多，但是肝损却并不严重。二、γ-谷氨酰基转移酶及其同工酶

GGT谷胱甘肽+氨基酸γ-谷氨酰氨基酸+半胱氨酰甘氨酸

GGT为含SH基的糖蛋白，GGT主要存在肝细胞膜和微粒体上，参与谷胱甘肽的代谢、氨基酸转运入细胞内，与组织中氨基酸、肽的分泌吸收、合成过程有关。

组织分布：含量顺序排列：肾、前列腺、胰、肝、脾、肠、脑等。血清中GGT主要来自肝。生理变异：年龄、妊娠影响不大，男性高于女性，酗酒GGT升高。标本的采集、处理和贮存：较稳定，室温2天、4℃1周活性无变化，红细胞中GGT含量