蓝布正水提物对离体大鼠胸主动脉环的舒张作用

蓝布正水提物对离体大鼠胸主动脉环的舒张作用

蓝布正是日本山楂的干燥草地。用完整的草或根插入，味道辛、甜、平坦。蓝布正主治头晕头痛,月经不调,小腹痛,肾虚头晕,跌打损伤,风湿腰痛,同时经药理研究表明,具有保护脑缺血、祛痰平喘作用。尚未见蓝布正降压作用的报道。本研究采用大鼠离体胸主动脉环灌流模型,探讨蓝布正水提物对离体血管的舒张和可能作用机理,以便进一步研究其是否具有抗高血压作用。1实验材料1.1实验动物SD大鼠,雌雄兼用,250～300g,由云南生物制药有限公司提供。合格证号:SCXK(滇)2005-00010。1.2试剂:u3000e-u-3,5,4,4.2蓝布正水提取物浸膏,课题组制备,浓度为:3g生药/g,以生理盐水稀释成各浓度使用,以下药物浓度均以生药量表示。去甲肾上腺素,上海禾丰制药有限公司,批号:H31021177。Kerbs-Henseleit(KH)液(g·L-1):NaCl6.92,KCl0.35,MgSO4·7H2O0.12,NaHCO32.1,KH2PO40.16,CaCl20.28,葡萄糖2.0。无钙K-H液为去掉CaCl2后加入EDTA0.0029g·L-1。无钙高钾K-H液为无钙K-H液加入KCl2.98g·L-1,以上试剂均为临时配用。离体血管平滑肌槽和BL-420生物机能系统均为成都泰盟科技有限公司。张力换能器:量程10g。2实验方法2.1u3000b-400实验放血处死大鼠后迅速分离胸主动脉,置于4℃含饱和氧气的KH液中,剔除周围结缔组织后,剪2～3mm长的血管环。将血管环悬挂于经37℃预热容量为20mL的浴槽内,一端固定,一端通过张力换能器连接BL-420生物信号采集系统。在持续通以氧气状态下,逐渐调节前负荷到1.5g,在37℃下稳定1h以上。之后用10～5M的去甲肾上腺素(NA)检测血管活性,选取活性强的血管进行实验。进行完1次实验后,换液3次,稳定30min以上,再做下一次实验,同一段血管最多进行2次实验。2.2预收缩血管环的开孔加入10～5M的NA刺激血管达到峰值,累积加入蓝布正水提物(0.3、0.6、0.9、1.2、1.5g·L-1),观察其对预收缩血管环的舒张作用。对照组以生理盐水代替蓝布正等容加入。2.3预收缩血管环的测定加入60mM的KCl刺激血管达到峰值,累积加入蓝布正水提物(0.3、1、3、10、20、30g·L-1),观察其对预收缩血管环的舒张作用。对照组以生理盐水代替蓝布正等容加入。2.4预收缩血管环的制备将主动脉环在无钙KH液中平衡2h后,换以无Ca2+高K+的KH液平衡20min,使之去极化。然后加入10mM的CaCl2刺激血管达到峰值,累积加入蓝布正水提物(0.1、0.3、1、3、10、20g·L-1),观察其对预收缩血管环的舒张作用。对照组以生理盐水代替蓝布正等容加入。2.5数据处理方法实验结果以(ue0af±s)表示,运用SPSS13.0软件进行数据处理。2组间比较采用t检验,半数有效浓度(IC50)使用Logit法回归计算。3结果3.1蓝色织物能促进血管收缩和扩张蓝布正水提物(0.3～1.5g·L-1)能剂量依赖性的抑制NA对血管的收缩作用,IC50为0.63g·L-1。结果见图1。3.2蓝色织物能促进血管收缩和扩张蓝布正水提物(0.3～30g·L-1)能剂量依赖性的抑制NA对血管的收缩作用,IC50为5.74g·L-1。结果见图2。3.3蓝色织物能促进血管收缩和扩张蓝布正水提物(0.1～20g·L-1)能剂量依赖性的抑制NA对血管的收缩作用,IC50为4.60g·L-1。结果见图3。4蓝布正在受体操纵性ca2+通道对受体依赖的抑高血压是常见的心血管疾病,而血管(尤其是小动脉)过分收缩后,会引起外周阻力的升高,对高血压的形成和维持具有重要的意义。因此,许多治疗高血压的药物主要是通过降低血管平滑肌的张力而发挥作用的,尤其是钙通道拮抗剂。细胞膜上存在两类钙通道,一种是电位依赖性Ca2+通道(PDC),可以被高浓度K+激活;另一种为受体操纵性Ca2+通道(ROC),可以被NA激活,激活后不仅引起细胞外Ca2+内流,还能引起细胞内钙贮存池的Ca2+释放。蓝布正水提物能剂量依赖性的抑制NA引起的主动脉环收缩,IC50为0.63g·L-1,说明其对受体依赖性的Ca2+通道有很明显的阻断作用,这可能是其舒张血管的主要机制。另一方面,蓝布正不仅抑制高K+引起的血管收缩,还能抑制高K+无Ca2+除极化时外Ca2+依赖性主动脉环收缩,IC50分别为5.74g·L-1和4.60g·L-1。说明蓝布正对电位依赖性Ca2+通道的作用弱于受体操纵性Ca2+通道,只是在高浓度时才体现