含氮类药物分析（药物分析技术课件）

芳胺类药物分析全章概述

目录01芳香胺的类型02芳胺类药物的分类氨基直接与苯环相连。如：对氨基苯甲酸酯类、酰胺类等芳胺类药物分析全章概述芳香胺的类型芳胺类药物氨基在烃基侧链上。如:苯乙胺类芳烃胺类药物结构芳胺类药物分析全章概述芳胺类药物的分类对氨基苯甲酸酯类代表药物盐酸普鲁卡因苯佐卡因盐酸丁卡因化学性质芳胺类药物分析全章概述芳胺类药物的分类对氨基苯甲酸酯类具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量；可与芳醛发生缩合生成Schiff碱；易氧化变色。01酯键易水解02具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。03游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。04结构：苯胺的酰基衍生物，其共性是具有芳酰氨基酰胺基邻位或对位有取代基。芳胺类药物分析全章概述芳胺类药物的分类酰胺类代表药物醋氨苯砜对乙酰氨基酚（扑热息痛）盐酸利多卡因化学性质芳胺类药物分析全章概述芳胺类药物的分类酰胺类水解后显芳伯胺特性共性—具有芳酰胺结构，水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应。01水解产物易酯化对乙酰氨基酚和醋氨苯砜,水解后产生醋酸,可在硫酸介质中与乙醇反应,发出醋酸乙酯的香味。02酚羟基的特性(与FeCl3反应)：具有酚羟基或水解后能产生酚羟基（对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用呈色。03碱性：利多卡因、布比卡因侧链中具有叔氨N原子，显弱碱性，能与酸成盐，且能与生物碱沉淀试剂反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。04化学性质芳胺类药物分析全章概述芳胺类药物的分类酰胺类与重金属离子反应05与铜离子的反应与钴盐反应结构：具有脂烃胺侧链，属于芳烃胺类药物。多数在苯环上有1~2个羟基取代基。芳胺类药物分析全章概述芳胺类药物的分类苯乙胺类代表药物化学性质芳胺类药物分析全章概述芳胺类药物的分类苯乙胺类易被氧化：邻苯二酚或苯酚结构，易被氧化呈色，在碱性溶液中更易变色，可与重金属离子络合呈色。01显碱性：具有烃胺侧链，其氮为仲胺氮，显弱碱性，能与酸成盐。（3）酚羟基的特性(与FeCl3反应)：具有酚羟基或水解后能产生酚羟基（对乙酰氨基酚），可与FeCl3作用呈色。02具有旋光性：具有手性碳原子,具有光学活性，可利用此性质进行质量分析。03化学性质芳胺类药物分析全章概述芳胺类药物的分类苯乙胺类溶解性：游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。04取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化—偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。05小结01芳香胺的分类0203芳香胺类药物的分类芳香胺药物的性质扑热息痛为什么可以和三氯化铁发生显色反应？思考题芳香第一胺反映目录01芳香第一胺的反应02亚硝酸钠滴定法影响因素01芳香第一胺反应重氮化偶合反应0101芳香第一胺反应重氮化反应在酸性条件下与亚硝酸钠发生重氮化反应，生成重氮盐。重氮盐在碱性条件下，与β-萘酚发生偶合反应，生成橙黄到猩红色沉淀。偶合反应01芳香第一胺反应苯佐卡因、盐酸普鲁卡因ChP（2005）的鉴别案例取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，生成橙黄到猩红色沉淀。02与芳醛的缩合反应01芳香第一胺反应反应原理01芳香第一胺反应原理亚硝酸钠滴定法的原理及影响因素02具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与NaNO2反应生成重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算出含量。亚硝酸钠滴定法的原理及影响因素02具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。01具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解；02芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。03第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快，所以整个反应速度取决于第一步。亚硝酸钠滴定法的原理及影响因素02影响因素加入适量KBr加速反应：KBr为催化剂，在盐酸存在下，重氮化反应的机理如下02亚硝酸钠滴定法的原理及影响因素加入过量的盐酸（1:2.5～6）01重氮化反应速度加快；02重氮盐在酸性溶液中稳定；03防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果。02亚硝酸钠滴定法的原理及影响因素滴定管尖端插入液面下2/3处，一次将大部分滴定液放下，近终点时方改为慢速滴定。03滴定速度：先快后慢02室温条件下滴定（10～30℃）0103小结01芳香第一胺的反应及鉴别0203亚硝酸钠滴定法原理亚硝酸钠滴定法影响因素磺胺甲恶唑属于芳香第一胺类药物，可以采用何种方法鉴别该药物？04思考题异烟肼的含量测定（溴酸钾法)异烟肼的含量测定（溴酸钾法)异烟肼：异烟肼基团的酰肼基具有还原性，可以将氧化性物质还原，比如将Ag+还原为Ag单质，可以作为异烟肼的鉴别实验，同时，酰肼基也可以与含羰基（如芳醛）的试剂发生缩合反应形成类似腙的化合物，而腙通常有固定的晶型和熔沸点，易于分离鉴别。异烟肼的含量测定（溴酸钾法)外消法异烟肼含量测定方法的依据是：异烟肼中酰肼基具有还原性，可采用氧化还原滴定法测定其含量，溴酸钾法、碘量法、溴量法最为常用。中国药典（1963年版）曾采用溴量法测定异烟肼的含量。我国药典自1977年版改为在强酸性溶液中用溴酸钾滴定液直接滴定法，用甲基橙指示剂（小于3.1红色，3.1~4.4橙色，大于4.4黄色）指示终点；同时采用本法测定异烟肼片和注射剂的含量。异烟肼的含量测定（溴酸钾法)异烟肼的结构还原反应：酰肼基缩合反应：酰肼基异烟肼的含量测定（溴酸钾法)溴酸钾的测定原理异烟肼的含量测定（溴酸钾法)测定方法取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于异烟肼0.2g），置100mL量瓶中，加水适量，振摇使异烟肼溶解并稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过；01精密量取续滤液25mL，加水50mL，盐酸20mL与甲基橙指示液1滴，用溴酸钾滴定液（0.01667mol/L）缓缓滴定（温度保持在18~25℃）至粉红色消失。01每1mL溴酸钾试液相当于3.429mg异烟肼。01异烟肼的含量测定（溴酸钾法)异烟肼标示量的计算异烟肼的含量测定（溴酸钾法)测定过程中的注意事项指示剂褪色是不可逆的，滴定过程中必须充分振摇，以免滴定剂局部过浓而引起指示剂提前褪色，可补加1滴指示剂以验证终点是否真正达到。01过滤前必须充分振摇，使异烟肼完全溶解。01过滤用漏斗、烧杯必须干燥，弃去初滤液。01小结01氧化还原滴定法02溴酸钾法测定异烟肼的含量异烟肼的主要结构，及其适应症是什么？思考题异烟肼中特殊杂质检查（TLC法）异烟肼中特殊杂质检查（TLC法）而肼又是一种诱变剂和致癌物质，因此国内外药典多数规定了异烟肼原料药及其制剂中游离肼的限量检查。常用的方法有薄层色谱法，比浊法和差示分光光度法。

异烟肼不稳定，受光、重金属、温度、pH等因素的影响，其中的游离肼是由制备时原料引入，或在贮存过程中降解而产生。异烟肼中特殊杂质检查（TLC法）由于样品中各个组分对吸附剂的吸附能力和在展开剂中的溶解度不同，当展开剂流经吸附剂时，发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相向前移动快，吸附力强的组分滞留在后。经过一段时间展开后，吸附能力不同的组分会彼此分离。如组分为无色物质，可用物理或化学方法显色定位。各组分斑点移动的速率可用比移值Rf表示。薄层色谱,也叫薄层层析法，它是一种快速、简便和应用广泛的层析方法。薄层色谱法是把吸附剂(固定相)均匀的涂铺在表面光洁的玻璃板(称薄层板)上，把待分析样品滴加在薄层板的一端，放在密闭的容器中用合适的展开剂（流动相展开）。薄层色谱法Rf=原点中心至斑点中心的距离/原点中心至溶剂前沿的距离异烟肼中特殊杂质检查（TLC法）Rf的计算薄层色谱法

《中国药典》对异烟肼及异烟肼片中游离肼的检查方法采用薄层色谱法，利用薄层色谱法分离肼后，以对-二甲氨基苯甲醛与肼反应生成腙显色，进行比较。异烟肼中特殊杂质检查（TLC法）异烟肼杂质测定的原理异烟肼中特殊杂质检查（TLC法）试液的制备

供试品溶液（异烟肼）：取本品细粉适量，加丙酮-水（1:1）使异烟肼溶解并稀释制成每1mL中含异烟肼100mg的溶液，滤过，作为供试品溶液（100mg/mL）01

对照品溶液（硫酸肼）：另取硫酸肼对照品，加丙酮-水（1:1）制成每1mL中含0.08mg（相当于游离肼20μg）的溶液，作为对照品溶液（0.08mg/mL=游离肼20ug）02

系统适用性试液溶液（供试品+对照品）：取异烟肼与硫酸肼各适量，加丙酮-水（1:1）溶解并稀释制成每1mL中含异烟肼100mg及硫酸肼0.08mg的混合溶液，滤过，作为系统适用性试验溶液。03异烟肼中特殊杂质检查（TLC法）测定方法

吸取上述三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-丙酮（3:2）为展开剂，展开，晾干，喷以乙