HIV初筛实验室SOP文件

HIV抗体初筛实验室SOP文献科室：检查科目录第一局部工作制度-2-实验室工作制度-2-HIV标本采集与接受登记制度-3-艾滋病实验室制度-3-艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度-4-过失事故解决制度-5-报告单签发审核制度-6-设备管理制度-7-试剂管理制度-8-艾滋病筛查实验室平安防护制度-9-艾滋病病毒职业暴露防止解决方案-10-第二局部原则操作规程-13-第二章样品采集与解决-13-第二章原则操作程序-14-一、金豪-14-二、科华生物-15-三、英科新创-16-第三章成果报告与考前须知-18-第三局部设备SOP文献-20-一、多功效自动酶标仪DNM-9602-20-二、DG3080洗板机-22-三、电热恒温水箱-25-第四局部流程图-26-一、HIV抗体筛查流程图-26-二、暴露级别的评定-27-附件：血清加样表-28-第一局部工作制度实验室工作制度室应经常保持整洁，多个仪器设备要安装适宜，器皿试剂摆放整洁，标志清晰，有良好的通风设备。实验室工作人员工作时一律穿制服，保持衣帽整洁，实验过程中应用心致志、认真负责，坚守工作岗位，不得随意串岗、闲谈，保持实验室安静，下班离开实验室前要检查并关好水、电、门、窗等，注意实验室平安。认真开展实验室质量控制工作，仪器设备应定时保养，有温度统计，检测标本的保存规定符合规规定。实验室不得放置与测试无关的物品，水、温、湿度、光照、防震、防尘、防噪声等，环境必须符合实验室的工作规定。实验和楼道必须配备足够的平安防火方法，并定时检查保养。对不同属性、品种和含量水平的试样，应有足够的实验区域，予以别离检查，特别是含有生物危害的试样必须别离检查。避免损害工作人员安康和污染环境。与检查无关人员不得进入实验室，外单位人员联系工作，一律在办公室接待。实验完毕后，应与时清理实验现场和用品，对染菌带毒的器具废弃物应严格进展消毒无菌解决。实验室严禁吸烟、用餐和进食。HIV标本采集与接受登记制度采样前和接受标本时应核对病人身份，严格执行核对制度。采血时应戴好手套、帽子、口罩。HIV标本采集应建立具体的统计本，统计容涉及：送检单位、病人、门诊号、数量、种类〔血清〕、送样者、接受者或采集者。采集后，应将HIV样本单独分装，勿与其它项目共用。艾滋病实验室制度为确保艾滋病实验室全部资料严格，应恪守下列制度1、与HIV/AIDS有关检测项目的全部资料均应严格，涉及采样统计与检测统计的保管，报告单的发放和送确认实验室检测等。2、工作人员不得向无关人员提供检查成果，要妥善保存多个实验统计。3、对初筛疑似阳性感染者不能告诉受检者本人，更不能到处乱讲。4、实验室的有关检查资料，档案、成果统计其别人不得翻录查阅，修改和销毁。5、实验室工作人员，不能在非正式场合对外提供任何成果、数据。艾滋病筛查实验室常规消毒清理工作制度1、检测可疑样品时，充足准备好废弃物消毒具与消毒药、液。如：次氯酸钠含有效氯—5000mg/L，75%乙醇和2%戊二醛。2、实验室用的吸头与时打入消毒器皿中。3、一次性手套，隔离服更换后，应丢弃在一次性垃圾袋。4、惯用消毒办法4.1、物理消毒办法、高压蒸汽消毒，121°C，保持15—20min；4.2、化学消毒办法、废弃物缸：5000mg/L次氯酸钠、工作台面与仪器外表：75%乙醇、溢出物：5000mg/L次氯酸钠、污染的台面和器具：mg/L次氯酸钠5、实验室中发生可疑样品溢出时，应与时用75%乙醇喷洒，然后用消毒剂浸泡的吸水物质覆盖10-15分钟，最后再用消毒剂清洗该地方，擦干。6、全部实验工作完毕后，应对实验台、仪器、设备〔接触部位〕地面进展彻底消毒解决。7、废弃物解决

从HIV实验室出来的全部废弃物，涉及不再需要的样品、包装盒和其它物品，均应视为感染性废弃物。过失事故解决制度艾滋病检测工作人员必须要有高度的责任心和严肃的法制观念，严防过失事故的发生。由于责任心不强、不认真执行规章制度，不恪守操作规程或技术因素而引发检查错误，对病人未造成严重后果的，称为过失。过失按程度不同，分为普通过失和严重过失。一级过失记过失一次，二级过失扣款50元，三级过失扣除当月效益工资。一级过失：

〔1〕违反操作规程，造成标本损坏，需重新采集标本或由于接受标本未认真核对，违反核对制度，影响检查者。〔2〕工作环境不能做到5S管理、违反生物平安者。〔3〕未准时统计成果、绘制质控图、当发现失控时隐瞒不报者。二级过失：〔1〕未准时间先后次序使用试剂，造成试剂过期或由于寄存不当造成试剂变质者。〔2〕项目漏查、做错项目，且标本已解决，需再次采用标本检查者。(3)因操作不当，造成设备故障，影响较大者。三级过失：〔1〕漏做、错做普通标本的检查目的，编错试管，标错标本联号、采错病人标本，写错检查成果并已发出报告者。〔2〕粗心大意写错报告难以挽回者。(3)因责任心不强、管理不善造成阳性标本丧失者。报告单签发审核制度各岗位的工作由本岗位人员进展操作检查，然后填写检查报告单。工作完毕后，再对本岗位全部的检查报告进展核查一次，在你认为能够发出时，盖上检查者印章，填写好报告日期。交给本实验室负责人或有资质的高年资检查人员核查签名；但在危急状况下或单独一人值班时〔如夜班〕除外。没有上岗证人员不得单独签发检查成果报告单。专业责任主管技师对本专业的全部报告单进展审核，审核的根本容有：临床医师所申请的检查项目与否已全部检查，有无漏项；检查成果的填写与否清晰、对的；检查报告单上全部容与否全部填写完整；有无非常异常的、难以解释的成果；有无书写错误；与否有需要复查的成果当发现检查成果有凝议时可指令本岗位人员对检查项目进展复查。确认报告无问题时盖章后，方可发出报告。设备管理制度由科主任或科室主管负责监视和检查仪器设备的使用状况，定时校准仪器的精确度。各科应对本科室仪器设备建立台账明细。每月应向总库递交仪器设备使用状况表，并存档。贵重仪器应由专人负责管理。仪器操作前必须培训、考核，认真阅读仪器操作阐明书，纯熟掌握该仪器的使用办法与维护办法，考核合格前方可操作。当班者在使用中应严格恪守操作规程，碰到问题应作与时解决，并具体统计。问题严重者，应与时上报科主任或主管加以解决。每次使用完毕，应检查仪器的电源、废液倾倒状况，并具体统计该次使用状况。对有温度规定的仪器设备，如冰箱冷藏室、冷冻室与恒温培养箱、水浴箱等，均应建立登记本，每天监测温度。试剂管理制度为了更加好地管理检查科试剂，由主管对检查科试剂申购、品牌、质量、价格、使用与管理状况进展督查。每七天上报周计划，各组人员根据各岗状况，认真、具体填写计划表，务必注明具体的名称、规格、数量与品牌。检查科试剂必须由主管审核，并负责报物流中心采购，品牌不得随意更改。杜绝浪费和积压。所用的试剂必须符合质量规定，必须有三证。不得使用过期、劣质试剂。供应商所送的试剂由总库清点后才干接受，特殊试剂由检查科主管清点后才干在货单上签字，有出入者必须向科主任或物流中心主任报告，再将货单交物流中心统一结账。领用时应检查物品质量和试剂品名、厂家、人份、批号、过期时间与外包装有无渗漏等，假设有问题，应与时向总库反映。冰箱不能贮存乙醚、异戊烷或类似的易燃、可燃性液体。艾滋病筛查实验室平安防护制度为确保实验室人员的工作平安，避免穿插感染，请严格恪守平安防护制度1、工作人员要完毕与工作有关的充足有效的技术培训，要理解HIV危害，提高全员平安意识，实验室平安负责人要对工作和环境的平安负责，全部工作人员都有责任保护自己和别人的平安。3、对有放试剂、样品血清的冰箱专人管理。4、实验人员应纯熟掌握操作知识和消毒技术。5、进入实验室应穿隔离衣，戴手套，传染性危险大时应戴双层手套，戴防护镜，口罩，如防护用品破损应与时更换，不用戴手套的手触摸暴露的皮肤等部位。6、实验期间尽量避免使用利器，易碎器皿，严禁采用口腔吸液管。7、送检样品应视为有潜在传染性，由专人接受，登记，寄存，提取。9、实验用吸头、手套、隔离服、污染物、废弃物均放在指定垃圾袋中统一进展消毒，燃烧到无害化解决。10、不得在实验室中吃食物，化妆打扮等，不得在实验室会客。11、实验室用品〔涉及工作服〕不得用于其它用途，不可将私人和无关的物品带入实验室。12、工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作服，用肥皂和流动水洗手，洗手后离开实验室。

13、实验完毕后，要对工作平台、仪器、地面进展消毒解决。14、遇故意外事故，应立刻口头和书面报告上级部门，并进展局部解决，如含氯消毒剂浸泡伤口，洗眼，漱口等，如遇高危意外事故，除进展局部解决外，同时应立刻采用防止方法，涉及对其随访，HIV检测，休息并暂离岗位二个月，按医嘱服用HIV药品等。艾滋病病毒职业暴露防止解决方案为维护医务人员与其它部门有关人员的职业平安，有效防止在工作中发生职业暴露感染艾滋病病毒，一旦发生职业暴露后最大程度的避免或减少艾滋病病毒感染，特制订本方案。

一、职业暴露〔一〕职业暴露是指医务人员以与有关工作人员，在从事艾滋病防治工作与有关工作的过程中意外被艾滋病毒感染者或者艾滋病患者的血液、体液污染了皮肤或者粘膜，或者被含有艾滋病病毒的血液、体液污染了的针头与其它锐器刺破皮肤，有可能被艾滋病病毒感染的状况。〔二〕数据分析阐明，医护和防止保健等人员对艾滋病病毒和艾滋病患者从事医疗和实验检测活动是比拟平安的。执行严格的平安操作与防护方法，医护与检查等人员的暴露事件是能够避免的。二、职业暴露的防止1、医务人员对全部病人的血液、体液(涉及羊水、心包液、胸腔液、腹腔液、脑脊液、滑液、阴道分泌物等人体物质，下同)与被血液、体液污染的物品均视为含有传染性的病原物质，在接触这些物质时，必须采用防护方法。2、医务人员进展有可能接触血液、体液的诊疗和护理操作时必须戴手套，操作完毕，脱去手套后立刻洗手，必要时进展手消毒。3、在诊疗、护理操作过程中，有可能发生病人血液、体液飞溅到医务人员的面部时，医务人员应当戴手套、含有防渗入性能的口罩、防护眼镜；有可能发生血液、体液大面积飞溅或者有可能污染医务人员的身体时，还应当穿戴含有防渗性能的隔离衣或者围裙。4、医务人员手部皮肤发生破损，在进展有可能接触病人血液、体液的诊疗和护理操作时必须戴双层手套。5、医务人员在进展侵袭性诊疗、护理操作过程中，要确保充足的，并特别注意避免被针头、缝合针、刀片等锐器刺伤或划伤。

6、使用后的锐器应当直接放入耐刺、防渗漏的利器盒，或者运用针头解决设备进展平安处置，也能够使用品有平安性能的注射器、输液器等医用锐器，以防刺伤。7、严禁将使用后的一次性针头重新套上针头套。严禁用手直接接触使用后的针头、刀片等锐器。三、艾滋病病毒暴露后的防止解决〔一〕紧急局部解决：1、用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜。2、如有伤口，应当在伤口旁端轻轻挤压，尽量挤出损伤处的血液，用再肥皂液和流动清水冲洗；严禁进展伤口的局部挤压。3、受伤部位的伤口冲洗后，应当用消毒液，如70%乙醇或者0.5%碘伏进展消毒，并包扎伤口；被暴露的粘膜，应当重复用生理盐水冲洗干净。〔二〕暴露后的报告与解决程序1、医护人员发生艾滋病病毒职业暴露后，要立刻上报医院领导〔具体由医院拟定院程序，注意给暴露者〕。与时报告天山区疾控中心，组织专家对暴露的级别和暴露源的病毒载量水平进展评定和拟定。2、医务人员发生艾滋病病毒职业暴露后，区疾控中心应当会同有关医疗卫生单位对其进展随访和咨询。随访和咨询的容涉及：在暴露后第4周、第8周、第12周与6个月时对艾滋病病毒抗体进展检测，对服用药品的毒性进展监控解决，观察和统计艾滋病病毒感染的早期病症等。不进展暴露后防止用药者，也要定时检测艾滋病病毒抗体，检测时间同上。3、在对艾滋病病毒职业暴露事件的整个解决过程中，必须始终做好工作。凡涉与暴露者个人的有关资料，不得向无关单位和人员泄露。四、暴露后防止性用药

对发生艾滋病病毒职业暴露的医务人员应当根据暴露源病毒载量水平实施防止性用药方案。

防止性用药应当在发生艾滋病病毒职业暴露后尽早开场，最佳在4小时实施，最迟不得超出24小时；即使超出24小时，也应当实施防止性用药。暴露后防止性用药的推荐方案：1、根本用药程序：两种逆转录酶克制剂，使用常规治疗剂量，持续服用28天。如双汰芝〔AZT与3TC联合制剂〕

300

mg/次，每日2次，用药时间为持续服用28天。或参考抗病毒治疗指导方案。本程序合用于轻度低危暴露。2、强化用药程序：根本用药程序加一种蛋白酶克制剂，如佳息患或利托那韦。均使用常规治疗剂量，持续服用28天。本程序合用于严重暴露。鉴于医务人员暴露后的感染率很低而用药的毒、副作用很大，因此应严格掌握用药的指征。第二局部原则操作规程第二章样品采集与解决样本采集接患者申请单后，填写血样采集统计，统计涉及患者日期、、年纪、门诊号、采集人签名等。用带别离胶的负压管采集一定量的静脉血，颠倒混匀5~6次，室温下自然放置半小时，待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min。标本采集考前须知样本采集严格按静脉穿刺规操作。采集样本时应注意平安，直接接触HIV感染/艾滋病病人血液的操作，应戴双层手套，里层是PE手套，外层为乳胶手套。样本保存在一周检测的样本，可寄存于2~8℃；在一周后来检测的样本，须寄存于-20℃。样本运输样本运输普通为血清或血浆，不运输全血。容器规定：①血清应置于带盖的1.5ml离心管，管外应有明显的标记，与门诊号要清晰；②在离心周边应垫有可缓冲吸水材料，以免破碎；③随样品应附有送检单，送检单应与样本分开放置。④外层容器规定耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器。天气过热，需采用干冰或冰壶冷藏运输。第二章原则操作程序一、金豪【办法】双抗原夹心酶联免疫法【原理】本试剂盒采用HIV特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反响板，用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶、采用双抗原夹心法捕获人血清、血浆标本中的HIV〔1+2〕抗体。【HIV筛查实验操作程序】实验前准备：实验开场前将试剂和样品放置于室温〔18~23℃〕半小时。换隔离衣，戴好帽子、口罩、双层手套。缓冲液配制：用蒸馏水1：25倍稀释，现用现配。或液体有结晶，应放置在37℃直至溶解。实验操作：1、装好所需使用数目的孔条。设空白对照孔2孔，2个阴性对照孔，2个HIV-1阳性对照孔。取阳性对照和阴性对照分别充足混匀各50ul参加对照孔中，空白对照孔只加样品稀释液。2、每检测孔参加样品稀释液50ul，待检样品50ul，可振摇5~10S。3、覆盖粘胶纸，37±2℃孵育30min。4、置洗板机上洗涤5遍〔用洗液将反映孔完全加满，静置30S，共洗涤5遍，洗完后孔上方与底部不应残存液体，严禁在滤纸上拍干〕。5、每孔加酶结合物100ul，取新粘胶纸覆盖反响板，37±2℃孵育30min。6、同环节4。7、每孔参加底物缓冲液50ul，TMB50ul，混匀，不必覆盖粘胶纸，37±2℃孵育10min。8、每孔参加50ul1M硫酸终止反响，充足混匀。9、在2h置于酶标仪读数，单波长450nm，或双波长450/630nm测OD值。〔三〕实验成果1、NC≤0.022、Cutoff值＝0.1+NC＝0.123、标本OD值不大于Cutoff为阴性，不不大于或等于Cutoff为阳性〔四〕报告：对呈阴性反响的样品，可由实施检测的实验室出具HIV抗体阴性报告；对呈阳性反响的样品，须进展复检，不能出阳性报告。二、科华生物【办法】双抗原夹心酶联免疫法【原理】本试剂盒采用HIV特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反响板，用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶、采用双抗原夹心法捕获人血清、血浆标本中的HIV〔1+2〕抗体。【HIV筛查实验操作程序】实验前准备：实验开场前将试剂和样品放置于室温〔18~23℃〕半小时。换隔离衣，戴好帽子、口罩、双层手套。缓冲液配制：用蒸馏水1：25倍稀释，现用现配。或液体有结晶，应放置在37℃直至溶解。实验操作：1、装好所需使用数目的孔条。设空白对照孔2孔，2个阴性对照孔，3个HIV-1阳性对照孔。2、每孔参加100ul待检样品与对照〔对照要后加〕，可振摇15S。3、覆盖粘胶纸，37±2℃孵育60±2min。4、置洗板机上洗涤5遍〔用洗液将反映孔完全加满，静置30S，共洗涤5遍，洗完后孔上方与底部不应残存液体，严禁在滤纸上拍干〕。5、每孔加酶结合物100ul，取新粘胶纸覆盖反响板，37±2℃孵育30min。6、同环节4。7、每孔参加底物缓冲液50ul，TMB50ul，混匀，不必覆盖粘胶纸，37±2℃孵育10min。8、每孔参加50ul1M硫酸终止反响，充足混匀。9、在2h置于酶标仪读数，单波长450nm，或双波长450/630nm测OD值。实验成果1、NC≤0.082、Cutoff值＝阳性对照值×10%3、标本OD值不大于Cutoff为阴性，不不大于或等于Cutoff为阳性报告：对呈阴性反响的样品，可由实施检测的实验室出具HIV抗体阴性报告；对呈阳性反响的样品，须进展复检，不能出阳性报告。三、英科新创【办法】胶体金法【原理】本试剂盒采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定血清样本中的HIV1/2型抗体。血清阳性样本中HIV抗体与胶体金标记抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，通过检测线时与预包被的重组Au－HIV〔1+2〕－Ag那么在对照线处与抗HIV单克隆抗体结合而富集显色。阴性标本那么仅在对照线处显色，30分钟观察成果即可。【HIV筛查实验操作程序】实验前准备：实验开场前将试剂和样品放置于室温〔18~23℃〕半小时，编号。戴好帽子、口罩、双层手套。将所需测试卡从包装盒中取出，置于台面上。实验操作：1、用微量加样器取60ul样本血清，加到测试卡的加样处。2、加样后，阳性标本可在1~30分钟检出。30分钟后观察成果将造成影响。实验成果阳性：测试卡在检测区和对照区位置出现两条紫红色条带。如果检测的紫红色条带隐约可见，应用酶免试剂重复检测。阴性：测试卡只在对照区位置出现一条紫红色条带。失效：对照区未出现紫红色条带。【办法】双抗原夹心酶联免疫法【原理】采用双抗原夹心两步法检测人血清或血浆样本中的HIV抗体。当待检样本中存在HIV抗体时，在反响过程中形成“固相HIV抗原－HIV抗体－酶标记HIV抗原〞的免疫复合物，参加底物后形成显色反响。【HIV筛查实验操作程序】〔一〕实验前准备：实验开场前将试剂和样品放置于室温〔18~25℃〕半小时，编号。换隔离衣，戴好帽子、口罩、双层手套。缓冲液配制：用蒸馏水1：19倍稀释，现用现配。或液体有结晶，应放置在37℃直至溶解。〔二〕实验操作1.按次序分别在对应孔参加50ul待测样品与阴、阳性对照血清。2.覆上封板膜，置37℃3.用洗涤液充足洗涤5次〔每次应保持30~60秒浸泡时间〕，扣干。4.分别在每孔中参加酶标抗原100ul。5.覆上封板膜，置37℃6.用洗涤液充足洗涤5次〔每次应保持30~60秒浸泡时间〕，扣干。7.每孔加底物A、B各50ul，轻拍混匀，覆上封板膜，置37℃8.每孔参加终止液50ul。9.用酶标仪测定。〔三〕实验成果3.样品OD值不不大于或等于临界值为初筛阳性，不大于临界值为阴性。第三章成果报告与考前须知【复检实验】对初筛呈阳性反响的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测。如两种试剂复测均呈阴性反响，那么报告HIV抗体阴性；如均呈阳性反响，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进展确认。〔具体详见流程图〕【筛实验成果的报告】对HIV抗体筛查实验，呈阴性反响者可出具“HIV抗体阴性〞报告。对初筛实验呈阳性反响者不能出阳性报告，可出具“HIV抗体待复查〞报告。【初筛实验呈阳性反响样品的转送】如需送上级实验室进展复测或确认，需要填写“HIV抗体复测送检单〞，经1名检查人员和1名含有中级以上技术职称的人员审核签字，与血样品一同送天山区疾控中心实验室，再转送市疾控中心艾滋病确认实验室，或在本实验室复检后直接送确认实验室。【操作台消毒解决】用3~5%84消毒液擦拭台面，如工作台被溢出物污染，那么用消毒液浸泡30分钟后，再行擦拭。【房间消毒】每日用紫外线照射30~60min【办法学特性与考前须知】试剂盒4~30℃枯燥保存。使用期16个月。抗凝全血应采用EDTA，样品应避免溶血。样品应在收集后7天检测，2~8℃保存，如果不不大于7天，应冷冻保存。测试卡仅用于HIV抗体的现场初筛，检测阳性必须用ELISA办法进一步确认。样本的加样应使用微量加样器精确参加。实验环境应保持一定湿度、避风，18~25℃进展。本试剂盒应视为有感染源的物品，应按生物危险样品解决。【血清加样表】见附件。每次检测完毕需填写血清加样表，由审核者签字复核，存档，以备查。第三局部设备SOP文献一、普朗自动酶标仪DNM-9602仪器介绍RT-2100C是一台网络化的酶标免疫测试分析仪器，可广泛用于传染病、肿瘤标志物、血液病、艾滋病、分泌障碍测定等诊疗领域。仪器原理光学与比色系统光学与比色系统信号放大A/D转换计算机LCD显示屏触摸屏打印机环境规定：避免直晒温度：10℃~40℃，湿度20%~85%电源必须接地良好电源稳定，严禁与大功率用电器共用电源操作环节4．1开机翻开仪器背面的电源开关，等待约10秒钟，开机初始化流程要完毕下列工作：系统程序加载系统自检读取顾客数据前端初始化等待光源稳定：仪器需要等待光源稳定约1分钟左右。光路自检：期间滤光片轮会转动，酶标板将来回走板一次。开机完毕后，进展主菜单窗口。4．2项目设立在主菜单中按[项目设立]键，进入项目列表窗口。4．2．1新建与更改项目按[新建]或[更改]键，添加或更改项目，如果项目数已经超出100，将无法创立新项目。按图所示设立参数设立。项目名称：该项必须输入，注意不要与已经存在的项目名重复。试剂名称：根据所用试输入，也能够不输入。波长：从列表中选用，注意主波长和次波长不能重复。计算办法：从列表中选用双样本：假设选择双样本，那么布板时每个样本孔的相邻孔自动设立为重复孔，计算时取两者吸光度的平均值。空白上限：职由试剂规定空白必须不超出0.05,那么空白应设为<0.05，测试时如果空白孔吸光度值超出设定的上限，系统会提示顾客“空白也吸光度值过高〞。定量计算，根据试剂阐明输入：原则品数量：选择2~8个原则品。浓度单位：从列表中选择。双原则：假设选择双原则：那么布板时每个原则孔的相邻孔被自动设立为重复孔，计算时取两者吸光度的平均值。原则品吸光度：双击原则品浓度列表项，能够在弹出窗口中输入浓度值，注意原则品浓度次序必须为由小到大。8〕计算，按试剂阐明在窗口中输入：Cut-off公式系数：各钟试剂的定性公式如有不同形式如S/N，〔N-S〕/N等均可转换为S/〔X*N+Y*P+Fac〕的形式。阴性对照和阳性对照的吸光度围：对照的吸光度超出上限和下限进分别按上限和下限计算。例如有试剂规定阴性对照不大于0。05按0。05计，那么阴性对照下限应设为0。05。对照：能够任意设立对照，但对照的数量不超出5个，计算时取全部对照吸光度的平均值。9〕阴阳性鉴定设立窗口在此窗口中输入鉴定阴性和阳性的临界值，吸光度模式下，临界值为吸光度值：Cut-off方式下，临界值为样本与Cut-off值的比值，定量计算方式下，临界值为浓度值。定性方式分为3类：正向阈值模式：阴性＜阴性临界值，阳性≥阳性临界值，两者之间为灰区，在此区间的样本鉴定为可疑。反向阈值模式：阴性＞阴性临界值，阳性≤阳性临界值。不需要鉴定阴阳性：在定性方式中选择“无。全部参数设立完毕，按[完毕]键。4．3样品测试在主菜单中按[样品测试]键，进入以下窗口：布板方向：横向或纵向进板方式：选择持续方式〔＜5秒〕提高测量速度，选择步进方式〔＜15秒〕获得更高的测量精度。振板参数：振板速度分快速，中速和慢速3档，振板时间1~60秒，也能够选择不振板。设定完以上参数后，按[拟定]键，进入布板窗口。4．4布板4．4．1样本任意点击欲设立为样本的孔位，样本号从1起自动递增并显示在该孔位上。如果要修改样本号，可再次点击该孔位。4．4．2空白空白孔在项目测试中用以吸光度调零，即其它孔位的吸光度均要减去空白孔吸光度值。根据不同项目测试的规定，能够选择与否设定空白。旧空白的保存和使用：空白孔的测试成果将自动保存，如果在同一项目的后续测试中不重新设定空白，那么系统自动用旧空白进展计算。第个项目只允许设立一种空白孔，如果在设立空白孔时多次点击不同的孔位，那么只有最后一次点击的孔位被设定为空白孔，前面设立的空白孔被自动去除。4．4．3依次设立阴性对照和阳性对照。按[开场]键，系统确认布板无误后，开场走板测试。走板完毕，系统自动进入吸光度显示。4．5关机在主菜单中按[关机]，系统显示关机确认窗口，按[YES]执行关机程序，按[NO]返回主菜单。仪器维护保持仪器工作环境的清洁。仪器外表的清洁，能够用中性清洁剂和湿布擦拭。液晶显示屏请用柔软的布清洁勿让任何溶剂，油脂类，腐蚀性物质接触仪器。二、DG3080自动洗板机1

目的规洗板机的操作程序，确保洗板机的正常状态。

2

合用围

本实验室DNM-9602洗板机的操作。

3

操作人员

本实验室实验人员。

4

操作环节

4.1

拔掉废液瓶口的塞子〔接有与洗板机相连的废液管〕，倒掉废液瓶的废液，再把塞子安紧在废液瓶口上。注意不要让废液管拧紧，以确保废液管的畅通。

4.2

拧开洗液瓶的盖子〔接有与洗板机相连的洗液管〕，倒掉前一天洗液瓶里剩的洗液，倒进新配的洗液。拧紧盖子，注意不要让洗液管拧紧，以确保洗液管

的畅通。

4.3

确保待洗反响板全部的孔处在同一水平位置，以免孔边沿过高碰到洗板机的吸液针。

4.4

开机

插上电源，翻开电源开关〔按背面板【POWER】键〕，仪器显示“仪器复位中，请稍候〞仪器初始化完毕后。仪器显示：“就绪，现在程序#X请选择功效键〞X处显示的数字〔围0~15之间〕表达现在准备就绪的是第几号程序。此时仪器正处在待机状态，顾客可进展下一步操作。

4.5

预洗

在待机状态下，使预洗槽处在清洗头下方，按下【预洗/返回】键，清洗头抬起，电磁阀翻开，洗液进入预洗槽。清洗头将对预洗槽洗涤3次，清洗容量为400UL，但清洗时没有暂停和浸泡环节。

4.6

编程

按下【编程】键。进入编程菜单界面。画面最左边有闪动的批示光标“→〞，按下【↑】键或【↓】键移动所需要设定的参数前，按下【拟定】键，即选中了该参数项，再按下【↑】或【↓】键设定该参数的参数值。

4.7

运行

按下【运行】键，系统将立刻按照顾客设定的程序执行。

4.8

关机

5

键盘功效

5.1

【编程】：进入编程菜单。用来设定仪器的运行方式与各项参数。

5.2

【运行】：执行先定的程序。

【↑】：处在待机状态时，此键用来顺次递增程序号；处在编程状态时，用来使光标“→〞上移。

【↓】：处在待机状态时，此键用来顺次递减程序号；处在编程状态时，用来使光标“→〞下移。

5.3

【复位】：终止现在操作，使仪器恢复到开机状态。

5.4

【预洗/返回】：处在待机状态时，此键用来使仪器执行预洗程序；处在编程状态时，此键可使显示面板界面回到待机状态

5.5

【拟定】：确认光标所批示的参数项。

6

编制洗涤程序

编程菜单中涉及清洗方式、清洗头数、清洗条数、清洗容量、加洗次数、清洗次数、暂停时间、浸泡时间8种参数项目。

6.1

清洗方式，条洗和板洗。

6.2

清洗头数，可设定为12头或8头。

6.3

清洗条数，或设定在1~12围，该参数设立与清洗头数有关，当头数为12时条数最大值为8。反之当头数为8时，条数最大值为12。

6.4

清洗容量，可在50UL、100UL、150UL、200UL、250UL、300UL、350UL、400UL、450UL中选择设定。

6.5

加洗次数，加洗次数可在1~3围设定。

6.6

清洗次数，清洗次数可在1~10围设定。

6.7

暂停时间，当清洗方式为知洗时，清洗头在注满酶标板每行后启动暂停，时间可在0~10秒任意设定，增量为1秒；当清洗方式为板洗时，清洗头在每次过板注满水后启动暂停，时间可在0~60秒任意设定，增量为5秒。

6.8

浸泡时间，普通清洗过程中，清洗头在酶标板最后一行中注满水后，即启动浸泡功效。浸泡时间可在0~300秒任意设定，增量为30秒，但在加洗程序中不能启动浸泡功效。

7

维护保养程序

7.1

日常不用时，拔掉电源插头。

7.2

每天洗板机工作完毕时，要对外其进展清洁，用湿抹布擦洗洗板机的外壁与载物台，以确保其干净。用蒸馏水将全部的管道清洗一遍，避免洗液的结晶堵塞管道。

7.3

与时倒弃废液，以免废液瓶过满致使废液回流而造成洗板机的故障。

7.4

确保待洗的反响板的孔边沿不要过高且水平，以免造成吸液针损伤。

7.5

定时将洗液与废液管道拆卸下来进展冲洗，以确保管道的畅通。

8

仪器消毒9

考前须知10

职责

10.1

实验室工作人员应当严格按照本SOP进展操作。

10.2

本SOP的改动，可由任一使用本仪器的工作人员提出，并报经本实验室负责人、科主任签字同意方可通过。三、电热恒温水箱原理接通电源，通过控温器设定温度值，电热管加热，水温升到设定温度时，电源断开，停止加热；当水温低于设定值时，电源接通，重新加热，如此循环工作。使用办法使用时应平放在固定台面上，将蒸馏水加至屉板50mm以上。批示灯：绿灯