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文档简介
第二节
宿主细胞选择原则1、容易获得较高浓度的细胞;2、安全,不致病;3、遗传背景清楚,容易进行DNA重组操作及遗传改造;4、产物的产量高(表达水平和稳定性)、生物活性高5、产物容易提取纯化。6、容易进行代谢调控;7、易培养(生长速度、营养需求、氧耗量等),培养成本低宿主细胞分类及特点分类:原核细胞(大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、链霉菌等)真核细胞(酵母细胞、哺乳动物细胞、昆虫细胞)一、原核表达系统的特点(一)优点:1、结构简单,基因组成及功能相对清楚,易于遗传操作及转化2、生理代谢途径及表达调控机制相对清楚,便于表达调控3、生长迅速,要求条件低(大肠杆菌倍增时间为17分钟),易于大规模培养。(二)缺点1、不能识别剪切内含子,不能表达基因组DNA,只能表达cDNA;2、缺乏真核生物的蛋白质加工修饰系统,不能进行蛋白酶解、糖基化、磷酸化、乙酰化、硫酸化、酰胺化等修饰作用;
蛋白酶解作用:从蛋白前体中切去一段氨基酸序列,从而获得功能性分子
糖基化意义:赋予蛋白独特的结合性并增强稳定性3、不具备真核生物的蛋白质复性系统(
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