典型药物质量检查-巴比妥类药物的质量检测(药品质量检测技术课件)

讲授内容任务二：巴比妥类药物的质量检测项目七：典型药物质量检测01含量测定含量测定1.银量法2.溴量法3.高效液相色谱法1.银量法含量测定《中国药典》（2010版）规定，采用银量法测定苯巴比妥及其钠盐、异戊巴比妥及其钠盐以及它们制剂的含量。测定苯巴比妥的方法：取本品约0.2g，精密称定，加甲醇40mL使溶解，再加新鲜配制的3%无水碳酸钠溶液15mL，用电位滴定法，以硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定，即得。每1mL硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于23.22mg的C12H12N2O3。2.溴量法含量测定凡5位取代基中含有双键的巴比妥类药物，如司可巴比妥钠，其不饱和键可与溴定量地发生加成反应，可采用溴量法进行测定。测定司可巴比妥钠的方法：取本品约0.1g，精密称定，置250mL碘瓶中，加水10mL，振摇使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/l）25mL，再加盐酸5mL，立即密塞并振摇1min，在暗处静置15min，注意微开瓶塞，加碘化钾试液10mL，立即密塞，摇匀后，用硫代硫酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL溴滴定液（0.05mol/L）相当于13.01mg的C12H17N2NaO3。3.高效液相色谱法含量测定《中国药典》（2010版）规定对苯巴比妥片的含量测定采用高效液相色谱法。（1）色谱条件与系统适应性试验（2）测定法含量测定（1）色谱条件与系统适应性试验用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水（30:70）为流动相；检测波长为220nm。理论板数按苯巴比妥峰计算不低于2000，苯巴比妥与相邻色谱峰的分离度应符合要求。含量测定（2）测定法取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于苯巴比妥30mg），置50mL量瓶中，加流动相适量，超声处理20min使苯巴比妥溶解，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液1mL，置于10mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。精密量取10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。另取苯巴比妥对照品，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1mL中约含苯巴比妥60μL的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。讲授内容任务二：巴比妥类药物的质量检测项目七：典型药物质量检测01鉴别试验鉴别试验1、丙二酰脲类鉴别反应2、利用特殊取代基的鉴别试验（1）银盐反应（2）铜盐反应（1）利用不饱和取代基的鉴别试验

（2）利用芳环取代基的鉴别试验

①硝化反应①与碘试液反应②与高锰酸钾反应②与硫酸-亚硝酸钠反应③与甲醛-硫酸的反应该反应是巴比妥类药物母核的反应，是本类药物共有的反应。1、丙二酰脲类鉴别反应鉴别试验丙二酰脲的鉴别已用于苯巴比妥、异戊巴比妥及其盐和司可巴比妥钠的鉴别。鉴别试验（1）银盐反应

鉴别试验（2）铜盐反应

讲授内容任务二：巴比妥类药物的质量检测项目七：典型药物质量检测01鉴别试验鉴别试验1、丙二酰脲类鉴别反应2、利用特殊取代基的鉴别试验（1）银盐反应（2）铜盐反应（1）利用不饱和取代基的鉴别试验

（2）利用芳环取代基的鉴别试验

①硝化反应①与碘试液反应②与高锰酸钾反应②与硫酸-亚硝酸钠反应③与甲醛-硫酸的反应2、利用特殊取代基的鉴别试验（1）利用不饱和取代基的鉴别试验鉴别试验（2）利用芳环取代基的鉴别试验

具有芳环取代基的巴比妥类药物，如苯巴比妥及其钠盐。鉴别方法有硝化反应、与硫酸-亚硝酸钠反应及与甲醛-硫酸的反应。具有不饱和取代基的巴比妥类药物，分子中含丙烯基，不饱和键可与碘、溴或高锰酸钾作用，发生加成或氧化反应，而使碘、溴或高锰酸钾褪色。①与碘试液反应鉴别试验②与高锰酸钾反应鉴别试验鉴别试验①硝化反应

鉴别试验②与硫酸-亚硝酸钠反应

鉴别试验③与甲醛-硫酸的反应

讲授内容任务二：巴比妥类药物的质量检测项目七：典型药物质量检测01典型药物的结构特征及主要性质巴比妥类药物为环状酰脲类镇静催眠药，是巴比妥酸的衍生物。

巴比妥类药物的质量检测典型药物的结构特征及主要性质1、巴比妥类药物的基本结构及其性状（1）基本结构与典型药物本类药物分子结构是由母核和取代基两部分构成的。母核：环状丙二酰脲，是巴比妥类药物的共同结构，决定了巴比妥类药物的特性；取代基：区别各种巴比妥类药物，具有不同的化学性质。

基本结构通式：常用的为5,5取代的巴比妥类药物：巴比妥、苯巴比妥、司可巴比妥、异戊巴比妥等。典型药物的结构特征及主要性质典型药物的结构特征及主要性质（2）主要性质典型药物的结构特征及主要性质①弱酸性②水解反应③与重金属离子的反应④与香草醛的反应⑤紫外吸收光谱特征⑥薄层色谱行为特征⑦显微结晶①弱酸性巴比妥类药物分子中有1,3-二酰亚氨基团，能发生酮式与烯醇式互变异构，在水溶液中可发生二级电离，水溶液显弱酸性。典型药物的结构特征及主要性质巴比妥类药物可与强碱形成水溶性的盐类，常见为钠盐。巴比妥钠盐水溶液呈碱性，加酸酸化后，析出结晶性的游离巴比妥类药物，可用有机溶剂将其提取出来。典型药物的结构特征及主要性质②水解反应分子中含有酰亚胺结构，与碱溶液共沸即水解释放氨气，可使红色石蕊试纸变蓝，可用于鉴别该类药物。典型药物的结构特征及主要性质吸湿时，本类药物的钠盐能水解为无效物质。一般，在室温和pH10以下水解较慢；pH11以上随着碱度的增加水解速度加快。③与重金属离子的反应分子含—CONHCONHCO—基团（丙二酰脲基团），在适宜pH溶液中，可与某些重金属反应，生成有色或不溶性有色物质。此性质可对本类药物进行鉴别和含量测定。典型药物的结构特征及主要性质5,5-取代的巴比妥类药物+AgNO3

可溶性一银盐

二银盐白色↓Na2CO3AgNO3典型药物的结构特征及主要性质巴比妥类药物+铜吡啶试液紫色或紫色沉淀↓硫喷妥钠+铜吡啶试液绿色吡啶吡啶巴比妥在碱性的吡啶溶液中易形成更多的烯醇式异构体；吡啶与铜离子形成配位二价阳离子；与2位碳上的氧结合，成有色络合物。④与香草醛的反应典型药物的结构特征及主要性质分子中具有活泼氢，可与香草醛在浓硫酸存在下发生缩合反应，产生棕红色产物。巴比妥类药物+香草醛棕红色

浓硫酸测定方法：于瓷盘中放入戊巴比妥10μg和香草醛10mg，浓硫酸0.15mL，混合后，放在水浴上加热30s，即产生棕红色。放冷，加95%的乙醇0.5mL，颜色则转变为暗蓝色。⑤紫外吸收光谱特征在碱性溶液中，巴比妥类药物电离为具有共轭体系的结构，而产生明显的紫外吸收，其吸收光谱随其电离级数的不同而变化。典型药物的结构特征及主要性质不电离，几乎无紫外吸收二级电离，最大吸收红移至255nm处一级电离，于240nm处有最大吸收⑥薄层色谱行为特征巴比妥类药物结构不同，其薄层色谱行为也自然不同，可进行鉴别。典型药物的结构特征及主要性质一般采用对照品（或标准品）比较法，要求供试品斑点的Rf值应与对照品斑点一致。⑦显微结晶典型药物的结构特征及主要性质大部分巴比妥类药物本身或与某种试剂的反应产物，具有特殊的晶形，可根据结晶形状鉴别。巴比妥：长方形；巴比妥+铜吡啶试液→十字形紫色结晶；苯巴比妥：球形→花瓣状；苯巴比妥+铜吡啶试液→细小不规则或似菱形的浅紫色结晶2、典型药物的性状典型药物的结构特征及主要性质药物名称外观溶解度物理常数苯巴比妥本品为白色有光泽的结晶性粉末；无臭，味微苦；饱和水溶液显酸性反应本品在乙醇或乙醚中溶解，在三氯甲烷中略溶，在水中微溶解，在氢氧化钠或碳酸钠溶液中溶解熔点174.5~178℃苯巴比妥钠本品为白色结晶性颗粒或粉末；无臭，味苦；有引湿性本品在水中极易溶解，在乙醇中溶解，在三氯甲烷或乙醚中几乎不溶司可巴比妥钠本品为白色粉末；无臭，味苦，有引湿性本品在水中极易溶解，在乙醇中溶解，在乙醚中不溶异戊巴比妥本品为白色结晶性粉末；无臭，味苦本品在乙醇或乙醚中易溶，在三氯甲烷中溶解，在水中极微溶解，在氢氧化钠或碳酸钠溶液中溶解熔点155~158.5℃讲授内容任务二：巴比妥类药物的质量检测项目七：典型药物质量检测01苯巴比妥杂质检查苯巴比妥杂质检查根据合成工艺，产品中特殊杂质主要是合成中产生的中间体及副产物。（1）酸度（2）乙醇溶液的澄清度（3）有关物质（4）中性和碱性物质主要是控制副产物苯基丙二酰脲;是由中间体的乙基化反应不完全产生的，其分子中5位碳原子上的氢受相邻两羰基的影响，酸性较苯巴比妥强，能使甲基橙指示剂显红色。（1）酸度检查方法：取本品0.20g，加水10mL，煮沸搅拌1min，放冷，滤过，取滤液5mL，加甲基橙指示液1滴，不得显红色。苯巴比妥杂质检查（2）乙醇溶液的澄清度主要是控制苯巴比妥中乙醇不溶性杂质;利用苯巴比妥酸这些杂质在乙醇溶液中的溶解度比苯巴比妥小的特性进行检查。检查方法：取本品1.0g，加乙醇5mL，加热回流3min，溶液应澄清。苯巴比妥杂质检查照高效液相色谱法[《中国药典》（2010版）附录ⅤD]试验；用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-水（25:75）为流动相，检测波长为220nm；理论塔板数按苯巴比妥峰计算不低于2500，苯巴比妥峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。取对照品溶液5μL注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的15%；（3）有关物质精密量取供试品溶液与对照品溶液各5μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的3倍，供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照品溶液主峰面积（0.5%），各杂质峰面积的和不得大于对照品溶液主峰面积的2倍（1.0%）。苯巴比妥杂质检查（4）中性和碱性物