复方奥硝唑乳剂的制备及质量控制

复方奥硝唑乳剂的制备及质量控制

通过研究奥硝唑和酮康唑联合使用的外抗菌效果，阐明了这两种药物对散列菌和白菌的抗菌效果具有相互作用，并可用于妇科常见厌氧菌、流行性疾病和白菌等的感染。笔者制备复方奥硝唑乳剂,并采用双波长-系数倍率法,同时测定奥硝唑和酮康唑的含量,报道如下。1仪器和试剂盒1.1仪器DV-650型分光光度计(美国贝克曼);UV-VIS8500紫外/可见分光光度计(上海天美科学仪器有限公司)。1.2含量观表3.32%奥硝唑原料及对照品(湖南维康制药有限公司生产,批号:030208,含量99.52%);酮康唑原料(中国南京第二制药厂生产,批号:981216);酮康唑对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号:02949801)。2处方和准备2.1羧甲基纤维素钠注射奥硝唑20g,酮康唑30g,吐温-8020mL,鱼肝油500mL,亚硫酸氢钠5g,羧甲基纤维素钠(CMC-Na)10g,注射用水适量,共制成1000g。2.2复方奥硝唑乳剂制备工艺取CMC-Na加适量注射用水使溶胀完全,加入亚硫酸氢钠,研磨混匀,再依次加入鱼肝油、吐温-80、奥硝唑、酮康唑并研磨使混匀,最后加入注射用水继续研磨制成复方奥硝唑乳剂。2.3空白基质的制备取CMC-Na加适量注射用水使溶胀完全,加入亚硫酸氢钠,研磨使混匀,再依次加入鱼肝油、吐温-80并研磨使混匀,最后加入注射用水继续研磨即制成空白基质。3质量控制3.1断裂本品为类白色或略带淡黄色的乳剂。3.2识别标记3.2.1奥硝唑取样品测定项下供试品液10mL,加硫酸溶液(3→10)2mL,三硝基苯酚1mL,即产生黄色沉淀。3.2.2橙红色沉淀的制备取本品约0.5mL,加0.1mol·L-1盐酸溶液20mL,在水浴上加热,使酮康唑溶解,放冷,滤过,滤液加碘化铋钾试液数滴,即生成橙红色沉淀。3.3检查pH值为4.0～6.0。3.4重量测定3.4.1测定波长的确定按处方比例,称取奥硝唑对照品、酮康唑对照品,分别用无水乙醇稀释至适当浓度;取空白基质,加无水乙醇适量,超声振荡2min使溶解,过滤,弃初滤液,取续滤液;以无水乙醇为空白,取奥硝唑溶液、酮康唑溶液、空白基质溶液以及三者混合液于200.0～400.0nm波长范围内扫描,结果见图1。由图中可看出,3组分在彼此的吸收波长范围内相互之间干扰严重,故采用双波长-系数倍率法消除共存组分之间的干扰,对奥硝唑和酮康唑的含量进行测定。3.4.2检测a值的测定按处方比例,配制奥硝唑、酮康唑与空白基质的混合溶液,酮康唑与空白基质的混合溶液以及奥硝唑与空白基质的混合溶液(不同的浓度5份),以0.5nm为间隔逐一筛选,分别测定吸收度A值,最后确定:κ奥硝唑=A266.5/A279.0=1.2270,RSD=1.07%(n=5),κ酮康唑=A242.0/A272.0=1.5708,RSD=0.42%(n=5)。3.4.3cl-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、cml-1、c按处方比例,精密称取奥硝唑对照品0.0110g,酮康唑对照0.0156g,空白基质0.4914g,置于50mL容量瓶中,加无水乙醇适量,超声振荡2min使溶解,过滤,弃初滤液,分别取续滤液0.40,0.60,0.80,1.00,1.20,1.40,1.80mL于25mL容量瓶中,用无水乙醇稀释并定容至刻度,以无水乙醇为空白,在选定的波长处测定A值,分别将奥硝唑浓度C奥硝唑(μg·mL-1)、酮康唑浓度C酮康唑(μg·mL-1)与△A回归,得奥硝唑含量测定回归方程:C=107.4235△A-0.3542,r=0.9995;△A=1.2270A279.0-A266.5,线性范围为7.04～14.08μg·mL-1;酮康唑含量测定回归方程:C=29.6178△A-0.4053,r=0.9999;△A=A242.0-1.5708A272.0,线性范围为9.984～19.968μg·mL-1。3.4.4奥硝唑加回收率按处方比例,精密称取奥硝唑0.0155g,酮康唑0.0234g,空白基质0.7792g,置于50mL容量瓶中,加无水乙醇使溶解,超声振荡2min,定容,摇匀,过滤,弃去初滤液,分别取续滤液:0.6,0.8,0.9,1.0mL于25mL容量瓶中,用无水乙醇稀释,定容,摇匀,在242.0,266.5,272.0和279.0nm波长处测定A值,分别代入回归方程计算。结果奥硝唑平均回收率为100.10%,RSD=0.58%;酮康唑的平均回收率为100.10%,RSD=0.90%。见表1。3.4.5奥硝唑标识量的测定按处方比例,模拟制备复方奥硝唑乳剂4批,称取供试品1.0g(约含奥硝唑20mg,酮康唑30mg)于100mL容量瓶中,加无水乙醇适量,超声振荡2min,定容,摇匀,过滤,弃去初滤液,取续滤液1mL于25mL容量瓶中,用无水乙醇定容,摇匀,按“3.4.4”项下操作并计算结果,结果奥硝唑的标示量为99.34%,99.35%,99.20%,99.08%,平均标示量为98.99%,RSD=0.61%;酮康唑的标示量为99.81%,99.31%,99.53%,99.86%,平均标示量为99.37%,RSD=0.40%。3.4.6奥硝唑-酮康唑含量测定取“3.4.5”项下的供试液1份,分别于0,0.5,1.0,1.5,2.0,4.0,8.0,12.0,24.0h测定A值,代入方程,奥硝唑的含量为标示量的(99.26±0.62)%,酮康唑的含量为标示量的(99.42±0.58)%,结果稳定。4奥硝唑和酮康唑的相互作用本制剂是针对妇科常见厌氧菌、滴虫、白念珠菌等感染而拟订的复方制剂,以奥硝唑、酮康唑为主药。奥硝唑是继甲硝唑、替硝唑之后的第3代新型硝基咪唑类衍生物,目前其制剂在我国已作为第四类新药上市,临床上主要应用于抗厌氧菌感染,治疗滴虫性阴道炎、阿米巴病等。有研究表明,与同类药物替硝唑相比,其抗菌活力强,半衰期长,临床疗效确切,不良反应低,有较好的应用前景。而酮康唑作为临床上普遍使用的咪唑类抗真菌药物,疗效确切,本处方通过局部给药来降低其不良反应。通过对奥硝唑与酮康唑体外抑菌效果考察,发现两药合用后,对淋球菌和白念珠菌的抑菌作用均增强,而且经正交实验考察,奥硝唑与酮康唑的浓度分别为2%和3%时抑菌效果最佳,所以确定奥硝唑与酮康唑的浓度分别为2%和3%。经我院临床使用,发现对滴虫、淋球菌以及白念珠菌感染导致的阴道炎等妇科感染有较好的疗效。根据阴道用药特点及主药性质,拟制成的O/W型乳剂。其中鱼肝油不仅作为油相,而且由于富含维生素A、D,还可维持皮肤、黏膜等正常生理机能,促进病患部位恢复;同时,由于酮康唑具有酰铵基和咪基,极易氧化变色,使药效降低,因此加入适量抗氧化剂亚硫酸氢钠,防止酮康