生物化学课件：DNA亲子鉴定

DNA亲子鉴定什么是DNA

(DeoxyriboseNucleicAcid)?DNA全名为脱氧核糖核酸由A、T、G、C組成(A-T,G-C)双股螺旋状帶有遗传讯息存在于所有有細胞核的細胞中(病毒除外)人类的DNA总数:3x109b.p.(30亿对)人类的染色体就是由DNA和某些特定蛋白质所组成除了精子细胞与卵细胞含有23条染色体，人类每个体细胞皆含有46条染色体，一半来自父亲一半来自母亲。除了同卵双胞胎外，找不到任何两人的DNA排列完全相同，这正好用来做为DNA亲子血缘关系鉴定的根据。何谓亲子鉴定应用医学、生物学和遗传学的理论和技术，判断有争议的父母与子女之间是否有亲生关系。亲子鉴定又称亲权鉴定、父权鉴定

亲子鉴定的原理判定亲生关系的理论依据是孟德尔遗传的分离律。按照这一规律，在配子细胞形成时，成对的等位基因彼此分离，分别进入各自的配子细胞。精、卵细胞受精形成子代，孩子的两个基因组一个来自母亲，一个来自父亲；因此同对的等位基因也就是一个来自母亲，一个来自父亲。鉴定结果如果符合该规律，则不排除亲生关系，若不符合，则排除亲生关系（变异情况除外）。在大多数的情况下，母、子关系是已知的，要求鉴定假设父和孩子是否亲生关系。此时首先从母、子基因型的对比中，可以确定孩子基因中可能来自父亲的基因（生父基因，OG）。然后观察假设父亲的基因型，如果不具有生父基因，则可排除假设父与孩子的亲生关系。若假设父也具有生父基因，结果就不能排除假设父的亲生关系

哪些情況需要接受DNA亲子鉴定1已婚夫妇，丈夫怀疑孩子不是自己的亲生子；

2移民案件的血缘鉴定；

3婚姻外生育，需确定孩子的生父；

4怀疑医院调错婴儿；

5失散家庭的认亲及失散儿童的认领；

6涉及计划生育超生子女的确认；

7强奸案件中胎儿或婴儿的生父认定；

8刑事案件中嫌疑犯确认；

9失踪及死亡人士的身份证明。

DNA就像是老天爷发给我们的身分证一样，每个人不知道何时要用到，但是，一生之中，有很多可能用到的机会。在先进、社会思潮较开放的国家中，甚至，人民都有预先为自己保留DNA的观念。亲子鉴定的发展在中国古代:「滴血认亲」方式二十世纪初叶ABO血型(1900)的发现，通过每个人红细胞上抗原[Rh(1940s),MNSs,Kell,Duffy,Kiddsystem]的不同来推断血缘关系，但此方法只能有60%~70%的准确度。

1970年人类白细胞抗原（HLA）发现[DiscoveredbyDaussetandLvanyi(1954)]再辅助红细胞上抗原的特征也仅能使血缘关系鉴定准确度提升至95%，就医学观点仅能勉强认同。1990年之后拜分子生物学发展(PCR-amplifiedRFLP,VNTR,STRcombined)，亲子血缘关系鉴定有重大突破，准确度提升至99.9%，这就是DNA鉴定。亲子鉴定方法

1、传统的亲子鉴定是进行血型测试。一般孩子6个月以上才可以做，并需要大量的血液样本。这种方法过程烦琐、取样痛苦且错误率高。传统的血型判断在一定程度上有其作用,但亲子鉴定并不能按照血型来鉴定。

2、DNA亲子鉴定测试。DNA亲子鉴定是通过人体任何组织取样（例如口腔上皮细胞取样），也可以在孩子未出世前进行。该方法是目前亲子测试中最准确的一种--准确率可达99.99999％，具有精巧、简便、快速、经济、实用的特点。父子关系相对机会（RCP），按照国内外亲子鉴定的惯例，当RCP值大于99.73%时，则可以认为假设父与孩子具有亲生关系。

3、STR（SNP）检测。当前DNA亲子鉴定利用人类基因组中的重复碱基序列(STR作为第二代分子标记)和PCR技术进行个体识别，但STR具有很大的局限性，SNP是第三代分子标记技术是将来的发展方向，美国911尸体辨认即利用了此技术。ABO血型配对父亲A型，母亲B型，则小孩血型可能出现的情形:父亲AB型，母亲AB型，则小孩血型可能出能的情形:AOBABBOOAOOOABAAAABBABBB

SequencesofsometandemrepeatsinDNAhavealengthofonly2-7basepairs,thatrepeatonlyinalimitednumberofcopies,calledshorttandemrepeats(STR)ormicrosatelliteDNA目前亲子鉴定所采用的检验方法—STRmethodTAGATAGATAGATAGATAGATAGA12345亲子鉴定的样本血液口腔黏膜細胞精液组织

怀孕期亲子鉴定

(A)胎盘组织(CVS):怀孕10~13周內

(B)抽羊水:怀孕14~24周內脐带血液:小孩出世时收集脐带血液样本CombinedDNAindexsystem(CODIS)&Top15PCR/STRsystemsusedbyparentagetestinglaboratoriesin1999System%ofuseSystem%ofuse1.vWA948.D5S818632.TH01849.D3S1358443.CSF1PO7810.D18S51444.D7S8207811.D8S1179445.TPOX7512.FGA446.D13S3176913.D21S11387.D16S53966CODIS共13組14.FES/FPS4715.F13A0144STRLocusLocousChromosomeLocationLocousChromosomeLocation1.vWA12p12-pter8.D5S8185q21-312.TH0111p15.59.D3S13583p3.CSF1PO5p33.3-3410.D18S5118q21.34.D7S8207p11.21-2211.D8S117985.TPOX2p23-2per12.FGA4q286.D13S31713q22-3113.D21S1121q11.2-q217.D16S53916p24-qter14.FES/FPS15q25-qter15.F13A016p21-p25親子鑑定報告--不能排除註:本鑑定系統之總排除能力(CPE)為0.999998不能排除賴XX與賴!!之親子關係。親子關係指數(CPI)為108141.85834596親子關係概率(PP)為99.999075288685%

項目賴XX(父親)賴!!(小孩)黃XX(母親)PI值親子關係說明血型(ABO)AAA---不能排除D16S53911,1112,1112,1210不能排除D7S82011,1011,1112,111.3419不能排除D13S31712,912,913,93.4130不能排除CSF1PO12,912,1213,121.3774不能排除TPOX11,811,1111,91.6308不能排除TH019,89,99,91.0582不能排除F13A016,3.23.2,3.26,3.21.6036不能排除FES/FPS11,1111,1111,112.0886不能排除vWFA31/A17,1617,1618,173.7879不能排除HPRTB13,1314,1314,132.7556不能排除F13B10,1010,1010,101.3793不能排除FABP10,910,1011,101.0647不能排除LPL12,1010,1012,100.5848不能排除CYAR0411,77,711,72.9412不能排除CD47,77,712,71.8519不能排除GPP3A096,66,66,61.6000不能排除D8S117911,1016,1016,123.7965不能排除親子鑑定報告--可以排除註:本鑑定系統之總排除能力(CPE)為0.999998根據D16S539,D7S820,TPOX,F13A01,vWFA31/A,HPRTB,F13B,CYAR04,CD4,GPP3A09,D8S1179等DNA位點之分析結果,可以排除卓XX與卓??之親子關係。

項目

卓XX(父親)

卓??(小孩)

趙XX(母親)親子關係說明血型(ABO)BOB不能排除D16S53911,1013,913,13可以排除D7S82012,1110,911,10可以排除D13S31713,1212,1011,10不能排除CSF1PO10,1011,1011,11不能排除TPOX10,98,811,8可以排除TH0110,99,99,9不能排除F13A013.2,3.26,44,3.2可以排除FES/FPS12,1111,1111,10不能排除vWFA31/A19,1817,1616,16可以排除HPRTB14,1413,1213,13可以排除F13B9,910,1010,9可以排除CYAR0411,76.1,6.111,6.1可以排除CD47,712,1212,7可以排除PI(paternityindex)—亲权指数定义:假设父提供生父基因成为孩子生父的可能性和随机男人提供生父基因成为孩子生父的可能性的比值假设父亲提供生父必需基因型的概率为

X随机男子具有生父必备基因型的概率为Y（Y即为人群中该基因的出现频率）PI=X/Y父子关系相对机会（RCP）上述计算出的PI值是一个绝对值，为使鉴定结果能够以概率形式表达父子关系的相对机会(relativechanceofpaternity,RCP)，PI值须转换成一种相对值RCP。计算出PI值后，RCP=[PI/（PI+1）]×100%。按照国内外亲子鉴定的惯例，当RCP值大于99.73%时，则可以认为假设父与孩子具有亲生关系。如果RCP值达不到99.73%时，则可以认为假设父与孩子不具有亲生关系。RCP值达不到99.73%，应该增加检测位点数直至RCP大于99.73%为止。CombinedPaternityIndex(CPI)--总亲子关系指数

--每一个位点就可以计算出一个PI值，多个位点的累计PI值等于各个位点PI值的乘积，但前提条件是所检测的各位点之间没有遗传连锁关系为每个个别的PI值之积

CPI=PI1xPI2xPI3x….xPInProbabilityofPaternity(PP)--总亲子关系概率

PP=CPI/(CPI+1)ProbabilityStatementsCPIPP(%)ChanceofPaternity>39999.8–99.9Practicallyproven>9999.1–99.8Extremelylikely>1995–99Verylikely>990–95Likely>480–90Hint>2.