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文档简介

马玉超北京林业大学生物科学与技术学院办公地点:生物楼117;电话:62336016;Email:myc0307@现代微生物学实验技术实验内容♣16SrRNA基因的PCR扩增、电泳及系统发育分析♣染色体步移法克隆已知序列的侧翼序列♣大肠杆菌β-半乳糖苷酶的诱导表达♣利用SDS分析融合蛋白的可溶性♣绿色糖单胞菌的发酵及孢外酶的提取1净6吃S晴r在R筑N职A基杆因雾的P壁C冻R扩棕增男、除电载泳及间系酒统本发付育堡分海析窦牺桂笋铭实扣验毁目飞的掌掌握P危C拐R的会原疗理颈,伞增司强异对P灵C项R重堤要莲性某的编认胸识窃;掌嗽握旅电笋泳将技仪术视及捞系活统贷发叼育蝴分梁析曲的限方画法呼,贤为肢将醋来缓课傅题萝研拜究伴奠毙定扎基惰础蔽。P铸C庭R咬(莫P炎o逆l也y谦m蛮e经r尿a哈s亚e姓C视h腿a读i宿n援R商e赖a栏c躲t齐i秘o辜n蚁)法,调又恩称粒为聚旋合原酶澡链鞭反榆应惨或P胳C轨R扩夫增剃技渐术,武是闪一雾种侮高接效平快烛速幅的暴体猛外D伞N供A聚牙合烂程妥序设筋想—实毕现—改撇进唇与成完喉善7朋2截℃9臣4℃5适5柱℃P伏C角R循贼环P势C蹲R技廉术枯的售反烈应叶原侵理P普C降R技推术锦的嘴反爸应深原处理D怎N桨A或R遭N告A模远板5´5´待吹扩侍增D产N醉A区认域3´9随4℃5m韵i营n5´5´5推5℃退姿火5´5´聚谢合3´3´5´5´3´循椅环2各5本-巷3宾0次变向性7报0℃D省N柴A引呈物D减N诞A聚驾合吹酶d塞N瞎T套P碍sM禁g2燥+(缓股冲感液顾)12①5´5´目屡的上基孔因变茎性加功热5´5´引械物退遮火5´5´底杰物延衣伸5´5´5´加形热变支性5´退册火痛引浅物23沈0个颂循碎环贩:23鼻0目惜标D蓝N毯A片巡寿段畏达1级06-鉴1漂07变追性赌-候退济火葬-哥延柜伸5´5´245´5´5´5´5´延伸5´5´5´5´5´一课个息标针准依的P和C循R过说程核衬酸觉的接凝娇胶吵电宅泳基盈本帽原吧理当门一好种哨分获子台被毛放湖置闭在虽电京场浪中搭时泽,粪它忙们交就张会疾以岂一扣定居的温速宰度饲移尺向遣适绪当橡的敲电谷极超。这衰种状电突泳废分景子打在资电支场卧作咬用践下谢的携迁秒移龟速猴度—语—电虹泳手的饲迁售移昆率捏。迁挑移页率垃的肾影仓响旗因麦素赔:豪电忠场来长踏度侄、塌电黑泳懒分溉子介的刻电环荷岗数量量载、泥电兼泳灭分理子繁与静支铁持浩介厌质骨的迷摩冈擦滩系术数季等纯。在包生昼理朋条刺件乒下读,杯核爬酸誉分妨子改的申糖-磷侧酸译骨春架络中随的赌磷炊酸肿基泛团淡是雷呈悬离情子风化钓状逼态兔的—底—叫效做冠多环聚因阴翅离炭子料。伴方乌向尝:屑负→正种素类印:水平垂直琼脂糖聚丙烯酰胺普通DNARNA小分子量核酸二蚕、昼琼纸脂海糖阵凝水胶污电真泳琼玩脂狡糖此:堤线辽性策多庙糖捧聚秧合狮物挑、成从益红证色令海奋藻骑产愤物絮琼四脂膝中极提考取剪而盗来虏。加骂热抗→袭凝根固榴:君网堵孔泥状捕的层电鞋泳缸介冰质肌,奇密狱度润由距琼兼脂裁糖贺的虫浓哨度卵决扛定虏。琼姓脂临糖蚕凝裕胶珍分钻辨D暗N淘A片杨段育的踪蝶能店力琼红脂越糖碧凝姿胶该分栏辨D袍N贡A片鱼段桨的迁范意围:0鹊.榆2重-宗5悬0坏k惜b凝梯胶迅浓坑度挤线棒形D鼻N翠A的截最拐佳但分腊辨缠范曲围额(b钱p)0庆.蚁5欺%洞1砍,太0修0漂0~3敲0够,臂0赌0豪00贺.弹7昌%饰8虎0仰0~1设2抽,蒸0原0卸01蔽.刘0披%造5朋0饼0~1隐0陵,演0柜0渠01咳.采2奏%屋4里0棒0~7方,博0驾0酱01和.多5女%掌2深0漫0~3诸,巩0到0握02凑.始0嗽%疾5虽0~2什,狭0新0挖0琼手脂愉糖D图N垮A分声子洞在虹电袜泳仪过哗程钩中阀迁甘移悼的代距旨离回受阻以苦下鼠几赢个示因血素匠的予影岩响睁:核位酸分晨子粱量解的虚大盆小分壳子望状梯态物寇理电诉压缓手冲层液温汇度电德泳梳指贺示督剂调:猎溴各芬圆兰个,傅距疫边扯缘1圣c经m左叛右表停隐止绒电泄泳配。电矮泳更染萍色隆剂痰:肤溴篮化田乙平锭(疯e彼t降h语i跪d照i笼u剂m泻b敬r辛o唐m田i功d遗e狱,简慨称E坑t宗B涂r萄),丽扁累平趟染舍料造,嵌趁到D范N棍A或R率N吨A分槐子末的盖碱解基础之羊间返,宋借剥助捡紫番外直灯碗观漠察朗。D办N乌A嘱M芽a葵r潮k寒e哈r1访.象2顾k锋b8娘0慌0京b孝p操哗作懒步疮骤成分贮液浓度使用量(20μl体系)水——14μl10×GCBufferMg2+Plus2μldNTPs2.5mmol0.5μl16Sp110pmol/μl1μl16Sp210pmol/μl1μl基因组DNA100μg/ml1μlTaq酶5U/μl0.5μl循环次数反应条件195℃(10min)3094℃;30s58℃;1min72℃;1min30s172℃;10min172℃(10min)操羊作后步行骤(坦1改)称翠取锣琼爱脂共糖碌,缠用讲适四当紧的吃电扁泳怒缓隆冲军液(常半用1厦×结T辽A组E甘)配菜成敲所父需者浓倒度属的全胶财;1议0然×蹄T蔑A铜E缓脊冲晶液坝配垒制躬:0丑.街4病M鸟T桃r训i术s炉-乙棋酸旅;0颈.软0群2奶M讲E械D定T遗A,p刘H墙8尾.浅0(英2晶)置乓微释波原炉议中向加眨热足煮摔沸迹,很直鬼至夕琼缺脂齿糖让完头全穿溶浙解扩;(挪3宏)按息照逗每2连0状m拥l胶淹加造入1见µ软l龟G拿o碑l富d太v挂i慌e杯w汽/找2溜0求m钓l;(勤4垦)凝诵胶蒸溶妹液服冷撞却盒至5游0悬℃左味右氧,衰倒舌入笑电挪泳秤胶扑盘夹,域避廉免律出孔现慰气与泡薯,般室猴温上放魄置爷,夫至咬胶牵凝给固欲;(朵5套)小栋心捉拔晃出阶梳惹子漏,米将悲胶嫂盘冠放胶到帽有1婶×时T乳A内E缓骆冲惕液堂的垃水盘平寸电谱泳有槽绸中框;(裕6卡)样北品挠中杯加典入1梳/鲁5体甚积枯的6许×乳l咬o淋a赛d苏i任n标g弹b倡u码f令f畜e恢r,葛混姿匀公,串用橡移键液厕器想小腹心串加款到黑点舍样帽孔榴中抄,堪以屋稳快定饱电惕压(守4稼-辱5涂V秩/押c穷m俘)电熔泳煌;6哪×加命样澡指梦示物剂奔配积方:培0吧.未2剥5密%溴罢酚断蓝;朽4反0胖%价(溪W颤/柱V谨)蔗斑糖阅水假溶算液阅;(懒7源)取悄出这凝粉胶编,决紫孟外姨灯馅下滨观蜓察帖电刻泳棚结求果体,召如茂有蠢必廉要臂,粘拍逗照蕉记孩录聚。琼恳脂勒糖顽凝乔胶走电林泳省:R和i哨b驴o甘s小o帽m沟a风l境R坊N贞A妇S牛e劣q卖u引e因n享c贿e锈s核款糖携体R死N润A序蹲列洽与好进梢化(1)桐具疤有伸重拳要挣且臂恒贫定骆的距生朋理左功搜能抽;(2)砌普属遍精存宜在倚于园原巷核碌生座物捐和挡真顽核尊生德物常中梢,衬而都且扭在密系老统须发蹄育冷上事具场有倒适鸡当鞠的钳保滚守盯性荣;(3)罪分给子野量筒大低小木适雪中贵,跨在倒细仇胞防中晌含闪量棒大(约衰占胁细抬胞岩中R僚N件A的9元0纹%劣)(4)录高脸度落保跪守斩、纵中参度译保伯守秃和劈燕高贯度盖变岗化辈的版序尘列储区膀域爸,常适秃用捏于亲进筹化吨距钓离雁不看同广的量各央类文生竭物蚊亲桐缘岩关扯系岸的描研代究僚。小伸核盗糖带体老亚净单惹位R盈N循A(1棒6璃S跃r羽R饺N遍A,1臂8滨S库r监R然N拦A)1岗6报S敬r蚊R辨N垦A的夕系筐统妇发被育糟分烧析1灭A稿G跟A副G鼓T政T岩T钳G准A洽T暖C检C怨T睁G拔G钓C本T厚C牧A凶G食G位A捡C励G饿A科A践C跌G湾C秆T货G腔G耗C凯G兵G扒C无G弱T乓G侦C愤T劝T果A台A调C条A蹄C今A坑T赠G咳C遵A猛A纱G屿T程C股G站A正G罗C6鲜1乓G舒G须T增A护A菠G优G造C苏T践C渐C昂T传T饺C室G惯G鸡G滩A横G裙T补A金C堂A纤C案G佛A腰G殊C净G谁G即C岂G昨A创A祝C由G屈G耳G哪T岂G猪A例G描T株A川A眠C偏A录C砌G储T涌G稠A给G询T脊A期A扣T际C沃T踏G1琴2莲1手C植C软C铸T习C朴C仗A洋C撤T善T惊T牌G萍G稼G己A倚T民A已A馆G阁C盐C瓣T河C微G闷G秃A盆A冶A存C赶G附A畅G蕉G侮T躺C垃T鄙A造A责T驱A诵C己C毕G亦A占A准T剑A洲C导G欲A棍C政C孝A助C勺T币T征C柿C差T维G1冬8耽1列C跪A挠T绍G株G陕G俗A场T顷G挺G手T旋G遇G搜T扰G恰G午A开A秘A后G蹈T届T造T罢T砌T随T海C鄙G翅G斗T少G胖G丘G起G脉G露A捐T均G夹T捆G犯C恨T墙C第G冤C杰G撑G怠C欢C秤T常A贡T苗C敲A破G银C妥T滑T额G猾T2腾4核1暑T政G仔G幅T域G英G殃G卸G躲T宏A湾A原T咏G溉G炎C诉C朴T迹A挪C能C第A殖A讲G盼G脾C饶T详T责C弹G氏A妥C爽G纹G逼G写T浅A蜘G督C条C苍G虹G头C研C进T性G跳A寺G狐A众G床G圣G电T耀G抢A碌C小C别G俱G磨C众C3唱0遗1森A贤C隔A版C赞T都G北G贤G稳A旧C诸T承G愁A混G蓄A苗C奏A拖C扩G患G顷C富C注C解A厅G拉A寒C便T营C雹C虫T义A摩C点G散G理G锻A狮G巨G难C湖A贱G胞C奶A辫G抚T镇G者G俊G鹅G眨A娇A扣T霸A南T察T嫩G震G斩A浩C3锣6扛1捞A击A循T伞G屑G虹G魂C幸G抖G裙A刷A苍G仪C颗C狼T付G馅A课T六C掌C湾A莲G佛C至A坟A暗C餐G棉C虏C朵G皇C柔G彩T炼G哈A战G背G反G摘A即T铸G习A恢C瓶G燃G殿C畅C独T压T猾C揪G瞒G壁G仗T间T繁G蛙T掉A鞋A晶A4姨2拣1币C群C彩T店C勒T者T抹T欧C妻A恼G棒C诱G贱G伶G枯G寒A祸C抬G致A渡A盾G然C客G思C扫A临A委G卸T珠G狂A嫂C基G京G赖T峡A馅C眉C拳C偏G过C枪A南G凳A拦A洽G郑A义A热G师C最A级C嗽C产G第G策C攻C败A员A犹C志T4广8桃1待A贵C刊G蹦T膀G近C嘴C缺A喊G威C泛A旗G报C蠢C然G痒C井G车G案T献A输A摊T博A鲁C社G刊T疯A忠G拒G居G却T狐G拥C绘G蛙A石G晨C舟G屋T淡T冈G传T棉C飞C间G赶G有A穗A叠T版T狂A僵T崇T刚G银G拳G啦C否G救T碌A5朗4薄1伏A喜A砍G断G诊G修C康T联C锣G编T絮A框G泽G搂C俩G清G硬T针T好T羊G铺T众C贸G浙C渔G绿T敬C车G教G锡G璃A仆G缝T激G浑A买A昨A哄A雾C刊A选C如C枪G逐G糊G厘C膨T硬T腥A尺A亚C伐T隐C咬G会G赢T作G稀C壤T洞T6顺0坐1差G段C否T赵T觉T寒C趟G衡A悦T准A估C狐G唤G测G绸C原A俱G抓A旅C斥T鸦A狼G客A竭G墓G吵T并A潜T猛T阔C矮A队G家G轧G钱G孝A狮G沙A车A射C君G抚G碌A牺A易T张T婆C灭C归T荣G争G萌T塘G泄T遗A腥G樱C张G恶G启T6船6北1隶G蹈A弃A稿A帖T嫁G筋C勒G制C阅A猫G样A邮T钥A域T赛C学A极G蹲G概A局G仰G处A篇A旗C吩A贷C坛C为G董G灰T吩G泄G熊C改G见A饼A栗G悉G予C忠G碗G狼T善T送C般T牛C股T增G狭G旁G围A局A鹊T握A佣T愈C担C支T边G7罚2撑1府A碎C思G缠C踢T厚G押A竹G桐G异A然G纵C阀G担A编A圈A垄G泄T邪G顾T雪G狭G锐G恩G忆A喉G缓C贺G裕A旦A致C光A困G娘G罚A属T刷T京A兔G狸A匠T轻A蕉C赴C妨C游T膨G摘G泽T羊A察G虎T击C愈C困A筹C办A歇C携C迁G7孕8首1绣T拾A营A携A旋C提G同T碧T施G舞G衫G犹C冬G额C满T群A态G密G胆T占G缸T弓G世G圈G谦A安T岂C恐C娇A右T雨T裹C抄C血A满C阵G衰G奥G蛾T嗓T劫C拾C叨G葱T才G僻C考C援G弯C愚A当G析C捆T仁A长A请C依G澡C及A屋T8初4令1寻T器A锯A娱G帐C且G纺C说C宗C蹈C存G鬼C凑C采T域G登G也G刚G泽A发G笋T变A木C的G感G舞C鞠C粱G誓C挨A警A冈G政G颤C甲T迁A桌A振A秀A党C坏T瓦C唱A韵A绢A析G朱G励A中A梳T肾T今G诵A问C虾G跑G蔬G胖G锈G幸C9鹅0芬1寺C但C呢G筛C贩A搁C拘A践A惨G燃C舱G自G命C应G峡G所A仿G返C糕A住T摊G颜C哄G孙G碧A羊T冷T孝A江A姓T刘T啄C忍G桌A萝T马G许C烂A争A旅C快G男C蓬G街A顿A蓄G翠A签A级C核C吃T滑T弄A昼C秆C朱T棚G舟G誉G闯T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