植物二磷酸核酮糖羧化酶(RuBPCase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书

〔RuBPCase〕酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供争论使用。 96T检测范围：5U/ml-180U/ml使用目的酶〔RuBPCase〕活性。试验原理RuBPCase水平。用纯化的RuBPCase，再与HRP标记的RuBPCase-抗原-洗涤后参加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化为蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品的RuBPCase呈正相关。用酶标仪在450nm〔OD值RuBPCase活性浓度。试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8标准品〔320U/ml)0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5 A液6ml×1瓶11封板膜2张6 B液6ml×1瓶12密封袋1个标本要求。假设不能马上进展试验，可将标本放于-20℃保存，但应避开反复冻融。2、不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶〔HRP〕的活性。操作步骤小试管中进展稀释。160U/ml5号标准品150μl150μl标准品稀释液80U/ml4号标准品150μl5150μl标准品稀释液40U/ml3号标准品150μl4150μl标准品稀释液20U/ml2号标准品150μl3150μl标准品稀释液10U/ml1号标准品150μl2150μl标准品稀释液2、加样：分别设空白孔〔空白比照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作一样、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释40μl，然后再加待测样品10μl〔样品最终稀释度为5倍。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。33730min。43030倍稀释后备用。5、洗涤：留神揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒5次，拍干。650μl，空白孔除外。7、温育：操作同3。8、洗涤：操作同5。9、显色：每孔先参加显色剂A50μl，再参加显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，3715分钟。10、50μl，终止反响〔此时蓝色立转黄色。11、测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光值〔OD值。测15分钟内进展。操作程序总结预备试剂，样品和标准品→参加预备好的样品和标准品，37℃反响30分钟-53730→5AB，3710参加终止液→15OD计算计算以标准物的浓度为坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，依据ODODOD出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。留意事项1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30板开封后未用完，半条应装入密封袋中保存。2、浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴锅中加温助融，洗涤时不影响结果。3、各步加样均应使用加样器，并常常校对其准确性，以避开试验误差。一5分钟内，如标本数量多，推举使用排枪加样。4、请每次测定的同时做坐标曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高〔ODOD值数n倍〕后再测定，计算时请最终乘以总稀释倍数〔n5。5、封板膜只限一次性使用，以避开穿插污染。6、底物请避光保存。7、严格依据说明书的操作进展，试验结果判定必需以酶标