新教材生物选择性必修三第1章-第2节-第2课时-微生物的选择培养和计数课件

第2课时

微生物的选择培养和计数第2课时微生物的选择培养和计数1.通过分析具体培养基的配方，归纳选择培养基的选择作用。

2.进行土壤中微生物的分离和数量测定。

3.掌握稀释涂布平板法的步骤。

学习目标1.科学思维：分析研究选择培养基配方的设计。2.社会责任：能利用选择培养基分离细菌，运用相关技术

解决生产生活中有关微生物的计数问题。素养要求1.通过分析具体培养基的配方，归纳选择培养基的选择作用。

内容索引一、选择培养基和微生物的选择培养二、微生物的数量测定梳理网络要语必背随堂演练知识落实课时对点练内容索引一、选择培养基和微生物的选择培养二、微生物的数量测定选择培养基和微生物的选择培养01选择培养基和微生物的选择培养01梳理教材知识

夯实基础1.选择培养基(1)概念：允许

种类的微生物生长，同时

其他种类微生物生长的培养基。(2)举例：筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培养基是以

为唯一氮源，按物理性质归类为固体培养基。特定抑制或阻止尿素梳理教材知识夯实基础1.选择培养基特定抑制或阻止尿素特别提醒原则上选择培养基只能允许特定种类的微生物生长，但实际上，微生物的培养是一个非常复杂的问题，有些微生物可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖，因此能在选择培养基上生长的微生物不一定都是所需的微生物，还需进一步验证。特别提醒原则上选择培养基只能允许特定种类的微生物生长，但实际2.微生物的选择培养——稀释涂布平板法(1)系列稀释操作①编号为1×102～1×107试管中分别盛有9mL

。②将

g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。③取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。无菌水102.微生物的选择培养——稀释涂布平板法①编号为1×102～1(2)涂布平板操作取菌液：取0.1mL菌液，滴加到

表面

↓

涂布器消毒：将涂布器浸在盛有

的烧杯中

↓

涂布器灭菌：将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精

燃尽、涂布器

后，再进行涂布培养基酒精冷却(2)涂布平板操作培养基酒精冷却

↓

涂布平板：用涂布器将

均匀地涂布在培养基表

面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀菌液↓特别提醒取出涂布器时，应避免酒精滴落；燃烧后的涂布器，应冷却后再进行涂布。待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入30～37℃恒温箱中培养1～2d。特别提醒取出涂布器时，应避免酒精滴落；燃烧后的涂布器，应冷却辨析易错易混练前清障(1)选择培养基只允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物的生长(

)(2)稀释涂布平板法能分离细菌，也能计数(

)(3)平板划线法不仅能纯化细菌，也能计数(

)

(4)以尿素为唯一氮源的培养基是选择培养基(

)(5)脲酶能催化尿素分解产生N2，N2可作为细菌生长的氮源(

)×√×√√辨析易错易混练前清障(1)选择培养基只允许特定种类的微生归纳提升两种接种方法的比较项目平板划线法稀释涂布平板法用途一般用于菌种的纯化一般用于筛选菌株优点可对混合菌进行分离可以计数缺点不能计数操作复杂，若平板不干燥，则效果不好；若菌液浓度大，则长不出单菌落归纳提升两种接种方法的比较项目平板划线法稀释涂布平板法用途一培养结果

培养结果

思考延伸拓展强化素养下面是筛选分解尿素的细菌培养基的配方，请分析：KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素1.0g琼脂15.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000mL思考延伸拓展强化素养下面是筛选分解尿素的细菌培养基的配方(1)从物理性质看，该培养基属于

培养基，从功能上看属于

培养基。(2)该培养基是如何实现对分解尿素的细菌的筛选的？提示该培养基中唯一氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能够分解尿素，而不能合成脲酶的微生物不能分解尿素，会因缺乏氮源而无法生长繁殖，所以用该培养基能够筛选出分解尿素的细菌。(3)若要证明所用的选择培养基没有受到环境污染，可将

的上述培养基与

的上述培养基同时培养，观察

；

的培养基无菌落产生，则证明培养基没有受到环境污染。固体选择未接种接种是否有菌落的产生若未接种(1)从物理性质看，该培养基属于培养基，从功微生物的数量测定02微生物的数量测定02梳理教材知识

夯实基础1.统计菌落数目方法：

和

。常用来统计活菌数目的方法是

。2.稀释涂布平板法(1)统计依据：当样品的

足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个

。通过统计平板上的

，就能推测出样品中大约含有多少活菌。稀释涂布平板法显微镜直接计数法稀释涂布平板法稀释度活菌菌落数梳理教材知识夯实基础1.统计菌落数目稀释涂布平板法显微镜(2)操作①同一稀释度下，应至少对3个平板进行

计数，然后求出

。②为保证结果准确，一般选择菌落数为

的平板进行计数。③统计的菌落数往往比活菌实际数目

。重复平均值30～300低(2)操作重复平均值30～300低3.显微镜直接计数法：利用特定的

或

，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量，缺点是不能区分

与活菌。4.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数Ⅰ.实验设计(1)土壤取样①土壤要求：酸碱度接近中性且潮湿。②取样部位：距地表约

的土壤层。(2)样品的稀释测定土壤中细菌的数量，一般选用

倍稀释的稀释液进行平板培养，当第一次做这个实验时可以将稀释的范围放

一点。细菌计数板血细胞计数板死菌3～8cm1×104、1×105和1×106宽3.显微镜直接计数法：利用特定的(3)微生物的培养与观察①培养：根据不同微生物的需要，控制适宜的培养

和培养时间。细菌一般在

℃的温度下培养

d。②观察a.观察方法：每隔

h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。b.记录菌落的特征：包括菌落的

、

和

等。温度30～371～224形状大小颜色(3)微生物的培养与观察温度30～371～224形状大小颜色Ⅱ.操作提示(1)无菌操作①取土样的用具在使用前都需要

。②实验操作均应在

进行。(2)做好标记：本实验使用的平板和试管比较多，为避免混淆，最好在使用前做好标记。例如，在标记培养皿时应该注明组别、培养日期和平板上培养样品的

等。(3)制定计划：对于耗时较长的生物实验，需要事先规划时间，以便提高

，在操作时有条不紊。灭菌火焰旁稀释度实验效率Ⅱ.操作提示灭菌火焰旁稀释度实验效率辨析易错易混练前清障(1)从土壤中取样时，土层越浅越好(

)(2)来自土壤的微生物稀释倍数越大越好(

)(3)测定不同微生物数量时，接种的土壤悬浮液的稀释度相同(

)(4)菌落特征是鉴别菌种的重要依据(

)(5)利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量(

)××√××辨析易错易混练前清障(1)从土壤中取样时，土层越浅越好(思考延伸拓展强化素养甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。(1)甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，该同学的统计结果

(填“可靠”或“不可靠”)，若不可靠，应如何改进？提示为增加实验的说服力与准确性，应设置重复实验，在同一稀释度下至少涂布3个平板，统计结果后计算平均值。不可靠思考延伸拓展强化素养甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同(2)乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学将21舍去，然后取平均值。该同学对实验结果的处理

(填“合理”或“不合理”)。微生物计数时，如果实验中出现重复实验的结果差别很大的情况，应

，找出差异的原因，而不能简单地将结果舍弃后进行计数。不合理分析实验过程中可能的影响因素(2)乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21平板

菌落数稀释度平板1平板2平板3104320360356105212234287106212318(3)某同学在三种稀释度下吸取0.1mL的菌液涂布平板，统计菌落数，得到以下的数据，试计算1g样品的活菌数。提示105的稀释度下取0.1mL的菌液涂布的三个平板上的菌落数在30～300之间，计算其平均值为(212＋234＋287)/3≈244。进一步可以换算出1g样品中活菌数为(244÷0.1)×105＝2.44×108(个)。(4)为什么统计的菌落数往往比活菌的实际数目低？提示当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。平板平板1平板2平板31043203603561052122特别提醒分离尿素分解菌操作中的注意事项(1)在实验操作中，每个步骤都要注意无菌操作，以防培养基被污染，影响实验效果。(2)样品稀释液的最佳浓度为培养后每个平板上有30～300个菌落的浓度。细菌一般选用1×104、1×105、1×106倍稀释的稀释液进行平板培养，放线菌一般选用1×103、1×104、1×105倍稀释的稀释液进行平板培养，真菌一般选用1×102、1×103、1×104倍稀释的稀释液进行平板培养。特别提醒分离尿素分解菌操作中的注意事项(3)为排除非测试因素(培养基)的干扰，实验需设置不接种的牛肉膏蛋白胨培养基进行空白对照。(4)每一稀释倍数的菌液都至少要涂布3个平板，作为重复实验，求其平均值，若其中有菌落数与其他平板差别很大的，则需要重新实验。(3)为排除非测试因素(培养基)的干扰，实验需设置不接种的牛梳理网络要语必背03梳理网络要语必背03新教材生物选择性必修三第1章-第2节-第2课时-微生物的选择培养和计数课件1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。2.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。3.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此可用尿素作为唯一氮源的选择培养基分离能分解尿素的细菌。4.测定微生物数量的常用方法有活菌计数法和显微镜直接计数法。稀释涂布平板法常用来统计活菌的数目，但统计结果往往比活菌的实际数目低。1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于目的菌生长的条件随堂演练知识落实04随堂演练知识落实041.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基称为A.鉴别培养基

B.加富培养基C.选择培养基

D.基础培养基√1234561.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止2.(2020·四川广安月考)为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组的培养基分别是A.未接种的选择培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基B.未接种的培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基C.接种了的选择培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D.接种了的培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基√1234562.(2020·四川广安月考)为了判断培养基是否被杂菌污染和解析若要判断培养基是否被杂菌污染，可将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养，一段时间后若有菌落产生，说明培养基被污染，若无菌落产生，说明培养基没有被污染。要判断选择培养基是否起到了选择作用，接种了的选择培养基是实验组，将等量的稀释相同倍数的菌液接种到牛肉膏蛋白胨培养基上，作为对照组，在相同的条件下进行培养，观察比较对照组和实验组中的菌落数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目，综上所述，B正确。123456解析若要判断培养基是否被杂菌污染，可将未接种的培养基放在恒3.微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列关于这两种接种方法的叙述中，不正确的是A.都只能用于固体培养基接种

B.都需要对菌液进行梯度稀释C.接种培养后均可获得单菌落

D.接种工具使用后均需要灭菌解析平板划线法和稀释涂布平板法都只能用于固体培养基接种，A正确；平板划线法通过增加划线数量，达到稀释菌种的目的，B错误；用平板划线法和稀释涂布平板法接种培养后均可获得单菌落，C正确；为防止微生物污染环境和感染操作者，接种工具使用后均需要灭菌，D正确。√1234563.微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列4.图甲所示是稀释涂布平板法中的部分操作，图乙所示是平板划线法的操作结果。下列相关叙述错误的是123456A.图甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能涂布菌液B.对于浓度较高的菌液，若图甲中的最高稀释倍数仅为102，则所得到的

菌落不一定是由单一的细胞繁殖而成的C.图乙所示培养皿中每个划线区域都可得到符合要求的菌落D.图乙中连续划线的起点是上一次划线的末端(除第一次划线外)√4.图甲所示是稀释涂布平板法中的部分操作，图乙所示是平板划线解析平板划线法中多次划线的目的是降低菌种浓度，经过连续划线才有可能得到由单一的细胞繁殖而成的菌落，这种菌落才符合要求，C错误。123456解析平板划线法中多次划线的目的是降低菌种浓度，经过连续划线5.(2019·福建泉州月考)用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目，为了提高实验结果的可信度，往往要设置对照实验，对于对照组的要求不包括A.对照组培养基也严格灭菌，且不接种任何微生物B.培养基的量与实验组必须绝对相同C.所用培养基成分及pH大小与实验组完全一致D.对照组和实验组培养基放在相同且适宜的条件下培养√1234565.(2019·福建泉州月考)用稀释涂布平板法来统计样品中尿解析对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物，为空白对照，A不符合题意；倒平板时对照组培养基用量与实验组不一定绝对相同，B符合题意；培养基的成分、pH为无关变量，因此对照组所用培养基的成分及pH应与实验组完全一致，C不符合题意；对照组和实验组的培养基都要置于相同且适宜的条件下培养，以保证单一变量，D不符合题意。123456解析对照组培养基也要严格灭菌，且不接种任何微生物，为空白对6.(2020·黄冈重点中学调考)尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类、数量繁多，某生物小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。实验步骤如图所示，培养基成分如下表所示。请分析回答下列问题：123456成分KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂含量1.4g2.1g0.2g10g1g15g6.(2020·黄冈重点中学调考)尿素是一种重要的农业肥料，(1)培养基中加入尿素的目的是筛选______，这种培养基属于_____培养基。123456(2)目的菌生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的____和_______，实验中需要振荡培养，目的是_________________。目的菌选择尿素葡萄糖为目的菌提供氧气解析培养基中加入尿素作为唯一氮源能够筛选出能分解尿素的细菌，此培养基属于选择培养基。解析尿素为目的菌提供氮源，葡萄糖为目的菌提供碳源。振荡培养可为培养的目的菌提供必需的氧气。(1)培养基中加入尿素的目的是筛选______，这种培养基属(4)下列材料或用具中，需要灭菌的是_____；需要消毒的是____(填序号)。①培养细菌用的培养基与培养皿②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管③实验操作者的双手(3)转到固体培养基上时，常采用________________________法接种，获得单个菌落后继续筛选。123456稀释涂布平板(或平板划线)①②③(4)下列材料或用具中，需要灭菌的是_____；需要消毒的是解析A同学比其他同学得到的实验结果数据大，可能是由于选取的土样不同，培养基灭菌不彻底或操作过程中受到杂菌污染，也可能是由操作失误引起的，如稀释不够准确等。培养基上筛选出的细菌数量与是否设置对照无关。(5)在做分解尿素的细菌的分离与计数实验时，A同学从对应稀释倍数为106的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有_____(填字母)。①土样不同②培养基被污染③操作失误④没有设置对照A.①②③

B.②③④C.①③④

D.①②④A123456解析A同学比其他同学得到的实验结果数据大，可能是由于选取的课时对点练05课时对点练05A组基础对点练题组一选择培养基和微生物的选择培养1.(2020·山西大同月考)分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是123456789101112131415161718解析

分离土壤中分解尿素的细菌，应在固体培养基中培养，培养基中要有碳源，且尿素作为唯一的氮源，故不能添加硝酸盐。注：“＋”表示加入，“－”表示不加。选项尿素琼脂葡萄糖硝酸盐A＋＋＋＋B－－－－C＋＋＋－D＋－－＋√A组基础对点练题组一选择培养基和微生物的选择培养12342.尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制选择培养基时A.葡萄糖在培养基中越多越好B.尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮C.尿素在培养基中越少越好D.尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮√1234567891011121314151617182.尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制选择培养基时√1234解析

尿素既可以作为尿素分解菌的氮源，也可以作为其碳源，葡萄糖在培养基中并不是越多越好，葡萄糖过多会使培养基的渗透压过高，不利于尿素分解菌的生长繁殖，A错误；尿素分解菌没有固氮能力，故培养基中需要添加尿素作为氮源，B错误；添加尿素的目的是筛选尿素分解菌，其他微生物不能很好地生活在该培养基上，尿素在培养基中不是越少越好，过少就会失去选择作用，过多又会使细胞失水死亡，C错误。123456789101112131415161718解析尿素既可以作为尿素分解菌的氮源，也可以作为其碳源，葡萄3.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分离出①大肠杆菌②霉菌③放线菌④固氮细菌A.①②③ B.④②③

C.①③

D.①②④√123456789101112131415161718解析在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，但固氮细菌能生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌生长，从而分离出霉菌；10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，从而分离出放线菌。3.通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物4.平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下列描述正确的是A.采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往多于实际的活菌数B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养D.与平板划线法相比，稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好√1234567891011121314151617184.平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法，下解析

由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以利用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数，A错误；平板划线法不需要稀释菌液，是将菌液通过接种环连续划在固体培养基表面，B错误；稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基中进行培养，C错误。123456789101112131415161718解析由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌5.(2019·四川资阳期中)平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述中错误的是A.平板划线法要求在培养基表面连续划线，且除第一次划线外，每一次

划线的起点都是上一次划线的终点B.除第一次划线前需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线可以不用灭菌C.如果菌液本来浓度不高，则可以适当降低稀释倍数D.“充分稀释”和“连续划线”的目的都是获得由单一细胞繁殖而成的菌落√123456789101112131415161718解析将接种环灼烧灭菌并冷却后蘸取菌液进行第一次划线，以后的每一次划线前都要将接种环进行灼烧灭菌，B错误。5.(2019·四川资阳期中)平板划线法和稀释涂布平板法是常题组二微生物的数量测定6.如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中样品稀释示意图。据图分析错误的是A.3号试管中样品液的稀释倍数为104倍B.对4号试管中的稀释液进行平板培养得到

的菌落平均数可能恰为5号试管的10倍C.5号试管的结果表明每克土壤中的活菌数为1.7×108D.该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要低√123456789101112131415161718题组二微生物的数量测定√12345678910111213123456789101112131415161718解析5号试管的结果表明每克土壤中菌株数为(168＋175＋167)÷3÷0.1×106＝1.7×109，C错误；用这种计数方法得到的结果往往比活菌的实际数目低，因为有可能多个细菌形成一个菌落，D正确。123456789101112131415161718解析7.(2019·河北清河中学段考)下列是关于测定土壤中细菌总数实验操作的叙述，其中错误的是A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经湿热灭菌后倒平板B.取1×104、1×105、1×106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1mL，分别涂

布于各组平板上C.将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48hD.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数√1234567891011121314151617187.(2019·河北清河中学段考)下列是关于测定土壤中细菌总123456789101112131415161718解析测定土壤中细菌总数时，培养细菌所使用的培养基应该是标准培养基，并要经过湿热灭菌处理；涂布时要对样本的水溶液进行稀释，一般选取1×104、1×105、1×106倍的土壤稀释液各0.1mL进行涂布；培养一段时间后，如果平板上菌落个数在30～300之间，即可把该组所有平板的菌落计数，然后取其平均值，即可计算出土壤细菌的总数。123456789101112131415161718解析8.(2020·启东测试)下列关于统计菌落数目的方法的叙述，不正确的是A.显微镜直接计数法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和B.当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落C.为了保证结果准确，一般采用密度较大的平板进行计数D.在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则

应以它们的平均值作为统计结果√123456789101112131415161718解析一般选择菌落数在30～300之间的平板进行计数，密度过大会影响结果的准确性。8.(2020·启东测试)下列关于统计菌落数目的方法的叙述，9.(2019·宜宾期中)下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图，下列有关叙述错误的是123456789101112131415161718A.在配制步骤②③的培养基时，应先调pH后湿热灭菌B.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散，以获得单菌落C.步骤③采用稀释涂布平板法接种，并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种，比较不同种细菌分解尿素的能力√9.(2019·宜宾期中)下图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解析

配制培养基时，应先调pH后进行湿热灭菌，A正确；步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌通过稀释涂布平板法逐步分散，获得单菌落，B正确；步骤③筛选分解尿素细菌的培养基中，应以尿素为唯一氮源，不能含有其他氮源，C错误。123456789101112131415161718解析配制培养基时，应先调pH后进行湿热灭菌，A正确；12312345678910111213141516171810.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。实验步骤：(1)制备稀释倍数为1×102、1×103、1×104、1×105、1×106的系列稀释液。(2)选用____________法接种样品。(3)适宜温度下培养。稀释涂布平板解析若要对大肠杆菌进行计数，常用稀释涂布平板法接种样品。12345678910111213141516171810.123456789101112131415161718结果分析：(1)某同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的活菌数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL)_________个。(2)用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量___，因为_____________________________________________________。1.17×108多当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落解析每毫升样品中活菌数＝平均菌落数/稀释液体积×稀释倍数，即234÷0.2×105＝1.17×108(个)。解析由于菌落可能由两个或多个细胞连在一起生长而成，所以实际活菌数量比测得的数量多。123456789101112131415161718结果分123456789101112131415161718(3)某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？___________________________________________。解析污染的原因可能是菌种不纯，也可能是培养基灭菌不彻底或接种过程操作不当。不能。因为不能排除杂菌来自培养基或培养过程123456789101112131415161718(3)B组综合强化练11.在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的土壤稀释液接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是①加抗生素②不加抗生素③加氮源④不加氮源⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖A.①③⑤ B.②④⑥

C.②④⑤ D.①④⑥√123456789101112131415161718解析

自生固氮菌是以N2为氮源，以土壤基质中的有机物为碳源和能源的细菌，所以要将其与其他细菌分开，所用的特制培养基中不需另加氮源；细菌对抗生素敏感，所以为了使自生固氮菌正常生活，不能加入抗生素。B组综合强化练11.在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表12.(2020·荆州中学期末)下列有关微生物分离和培养的叙述，错误的是A.微生物培养前，需对培养基进行消毒B.测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法C.分离土壤中不同的微生物，需采用不同的稀释度D.分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源√123456789101112131415161718解析消毒不能杀死培养基中的所有微生物，应采用湿热灭菌法对培养基进行彻底灭菌。12.(2020·荆州中学期末)下列有关微生物分离和培养的叙13.下列有关稀释涂布平板法操作的叙述，不正确的是A.若稀释梯度以10倍为单位，当用移液管取1mL原始菌液进行稀释时，

其余试管内的无菌水应为9mLB.每次用灭菌后的移液管取菌液前，要先将菌液混匀C.在涂布过程中，每次变换涂布的方向和位置时，应对涂布器进行灼烧灭菌D.将菌液涂布在培养基表面时，为使涂布均匀，应及时转动培养皿√123456789101112131415161718解析在涂布前，应将涂布器在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，用涂布器将菌液均匀涂布在培养基的表面，涂布结束后，应对涂布器进行灼烧灭菌，以防污染环境和感染操作者，C错误。13.下列有关稀释涂布平板法操作的叙述，不正确的是√123414.下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。下列与该实验相关的叙述中不正确的是123456789101112131415161718A.实验中所用的培养基①②③④均属于选择培养基B.图中Ⅰ、Ⅱ过程实现了对目标微生物的稀释C.统计⑤处培养基中的菌落数并不一定代表接种到④上的活菌数D.在⑤处培养基上形成菌落的微生物同化作用类型为异养型√14.下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生图中Ⅰ、Ⅱ过程为选择培养，目的是增大所分离的微生物的浓度，B项错误；⑤处的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，C项正确；所分离的微生物利用现成的有机物生长繁殖，所以该微生物的同化作用类型为异养型，D项正确。123456789101112131415161718解析该实验的目的是从土壤中分离能分解对羟基苯甲酸的微生物，所以使用的培养基为选择培养基，A项正确；图中Ⅰ、Ⅱ过程为选择培养，目的是增大所分离的微生物的浓度，B15.下列有关微生物分离、培养和计数的叙述，正确的是A.分离土壤中微生物时，需要先对土壤灭菌，再进行培养B.测定土壤中细菌数量时，一般选用1×103～1×107倍的稀释液C.测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法或平板划线法进行计数D.统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落123456789101112131415161718√15.下列有关微生物分离、培养和计数的叙述，正确的是1234解析

分离土壤中微生物时，需要对培养基灭菌，但不能对土壤样品进行灭菌，A错误；由于土壤中各类微生物的数量不同，在进行分离和计数时，需要按照不同的稀释度分别进行涂布，测定土壤中细菌的数量，一般选用1×104、1×105、1×106倍的稀释液，B错误；测定土壤样品中的细菌数目常用稀释涂布平板法，平板划线法不能用于计数，C错误。123456789101112131415161718解析分离土壤中微生物时，需要对培养基灭菌，但不能对土壤样品16.下列有关稀释涂布平板法的说法中，错误的是A.用移液管把菌液从一支试管转移到下一支试管后，要用手指轻压移液

管的橡皮头，吹吸三次，目的是使菌液与水充分混匀B.移液管需经过灭菌C.试管口与移液管应在离火焰1～2cm