中药材掺假染色检测方法的研究

中药材掺假染色检测方法的研究中国药品生物制品检定所中药室鲁静2009-05色彩与人类

生活息息相关“红心鸭蛋”事件

中药材掺假染色

中药材掺假染色检测方法研究的必要和紧迫性

着色物：色素、染料、颜料等的滥用，严重危害人民身体健康和生命安全；掺伪、造假等现象屡禁不止，严重影响中药的声誉和健康发展。中药材掺假染色检测方法研究的必要和紧迫性药品检验机构对假、劣中药材、中药饮片，研究建立针对性的检测方法，申报补充检验方法，获得法定检验标准依据，对于有效打击制假、售假的不法行为，净化中药材市场，保证人民群众用药安全，具有很重要的意义。中药材掺假染色的主要方式和品种增重掺假染色红花冬虫夏草、青黛等劣质药材染色五味子蒲黄延胡索等造假染色西红花血竭朱砂等

着色物的种类食用色素（水溶性色素）食品添加剂合成染料可溶于使用介质纺织品着色被纤维吸附、固着有机颜料不溶于使用介质非纺织品着色靠树脂、胶黏剂等于着色物结合无机或矿物颜料着色物（合成）的基本化学结构偶氮类蒽醌类

三芳基甲烷类

苋菜红赤藓红亮蓝禁用染料含有偶氮结构的染料在经过裂解后有可能产生以下24种致癌芳香胺的染料是被欧盟和许多国家禁止使用的。24种致癌芳香胺是：（1）4-氨基联苯（2）联苯胺（3）4-氯-2-甲基苯胺（4）2-萘胺（5）4-氨基-3,2’-二甲基偶氮苯（6）2-氨基-4-硝基甲苯（7）2,4-二氢基苯甲醚（8）4-氯苯胺（9）4,4’-二氨基二苯甲烷（10）3,3’-二氯联苯氨（11）3,3’-二甲氧基联苯胺（12）3,3’-二甲基联苯胺（13）3,3’-二甲基-4,4’-二氨基二苯甲烷（14）2-甲氧基-5-甲基苯胺（15）4,4’-亚甲基-二（2-氯苯胺）（16）4,4’-二氨基二苯醚（17）4,4’-二氨基二苯硫醚（18）2-甲基苯胺（19）2,4-二氢基甲苯（20）2,4,5-三甲基苯胺（21）2-甲氧基苯胺（22）4-氨基偶氮苯（23）2,4-二甲基苯胺（24）2,6’-二甲基苯胺食用色素天然食用色素：焦糖色素、红曲红、高梁红、栀子黄、萝卜红、叶绿素铜钠盐、胡萝卜素、可可壳色、姜黄等我国食品添加剂使用卫生标准（GB2760－1996）列入的合成色素有胭脂红、苋菜红、日落黄、赤藓红、柠檬黄、新红、靛蓝、亮蓝、二氧化钛（白色素）等等。

合成食用色素合成色素具毒性(包括毒性、致泻性和致癌性)。这些毒性源于合成色素中的砷、铅、铜、苯酚、苯胺、乙醚、氯化物和硫酸盐，它们对人体均可造成不同程度的危害。我国《食品添加剂使用卫生标准》，其中规定使用合成色素的种类，并定出了最大使用量。合成色素的纯色素含量不得低于85～99％；砷<1ppm;铅<10ppm;铜<20ppm;苯酚<5ppm，苯胺<4ppm;各种氯化物不应超过0.5％等，这些规定是为了限制色素中的杂质，以减少对人体的毒害。

合成染料偶氮染料苏丹红IV酸性橙II三芳基甲烷类金胺O孔雀石绿颜料普通有机颜料偶氮类颜料酞箐颜料无机颜料二氧化钛铅铬绿等等着色物的危害偶氮染料致癌性过敏性

蒽醌类染料癌诱变性皮肤过敏性

三芳基甲烷类染料致癌对眼睛的刺激对水生生物的毒性中药材掺假染色检测方法研究的内容（1）关注药材质量，及时发现问题；（2）确定掺伪物、染色物的种类；明确化学组成；（3）建立检测用对照物质；（4）建立检测方法，进行必要的方法验证；（5）按规定程序申报补充检验方法，作为法定检验的依据。中药材掺假染色检测的技术方法经验鉴别、理化鉴别——快速筛查薄层色谱法——定性鉴别、常规检测高效液相色谱法——定性鉴别、常规检测液-质联用法——结构鉴定、方法验证中药材掺假染色检测方法研究实例

单一色素或染料染色734394042ABCDEFGHIJKL对照红花染色物金橙II的检测硅胶G薄层板展开剂：氯仿-甲醇-冰乙酸(7：1：2)金橙II的HPLC检测色谱柱：DiamonsilC18流动相：乙腈－0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值为3.0）(40：60)检测波长：484nmUVES-ES+UVES-ES+金橙II红花药材蒲黄掺伪染色的检验蒲黄掺伪染色的检验蒲黄掺伪染色的检验

820303234ABCDEFG对照金胺O的薄层色谱检测硅胶G薄层板展开剂：二氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇—氨水（4：5：1：1）的下层溶液上：金胺O对照试剂；中34#样品（阳性样品）；下：样品E（阴性样品）金胺O的HPLC检测色谱柱：DiamonsilC18流动相：乙腈－0.025mol/L磷酸二氢钾溶液（含0.2%三乙胺，并用磷酸调pH值3.0）（35：65）检测波长:432nm金胺O对照试剂相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱蒲黄药材阳性样品相应色谱峰的紫外-可见吸收光谱金胺O对照试剂蒲黄药材中相应色谱峰中药材掺假染色检测方法研究实例不同来源样品，多种色素或染料染色123456789101112131415硅胶G薄层板展开剂：乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水(1：3：3：1：1)五味子染色物的HPLC色谱图柱：DiamonsilC18，4.6x250mm流动相：以甲醇-0.05mol/L醋酸铵梯度洗脱；检测波长为508nm

复合色素染色乌梅染色物：苋菜红亮蓝日落黄硅胶GF254板，展开剂：乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-氨水-水（1：3：3：1：1）可见光检视乌梅染色物HPLC检测WatersC18，5μm，250x4.6mm；甲醇-0.02mol/L乙酸铵（冰乙酸调pH4.0），梯度洗脱500nm检测苋菜红和日落黄，630nm检测亮蓝。染色物、掺伪物同时检测血竭伪品血竭样品

12345678910123456789显色前，可见光检视12345678910123456789显色前，紫外光灯（254nm）检视12345678910123456789显色后，可见光检视12345678910123456789显色后，紫外光灯（365nm）检视TLC检查伪品血竭中松香酸、808猩红和苏丹红Ⅳ血竭伪品药材HPLC分析检测AgilentC18(4.6X250mm)；流动相：乙腈－水（95︰5）阳性样品中相应色素成分峰的DAD吸收光谱

检出成分的确证样品#色谱峰保留时间吸收峰1吸收峰2检出大红粉的样品18.1549751968.05496519大红粉对照8.03496517检出苏丹红IV的样品219.17350518