仿制药品生物等效性试验

仿制药品制剂的

生物等效性试验

一、专业术语定义

1.生物利用度（Bioavailability）：表示治疗活性药物达到体循环的速度和程度的量度。2.生物等效性（Bioequivalence）：生物等效药品是指在相同实验条件下以相同剂量给药，试验药品与参比药品的吸收速度和吸收程度没有明显差异，可认为两制剂具有生物等效性；对于某些药品的吸收程度相同但吸收速度不同而又不影响治疗的药品，也可认为两制剂具有生物等效性。专业术语定义

3.生物等效药品（Bioequivalentdrugproducts）：具有生物等效性特征的两种药品为生物等效药品。4.制剂等效性（pharmaceuticalequivalence）：仿制药品与参比药品的药剂等效性必须：两制剂有相同活性成分，相同剂型，相同规格，相同给药途径，相同给药剂量和给药方法，但不要求辅料和释放机制与参比制剂相同。5.修饰释放制剂（Modifiedreleasedosageform）：

系指通过修饰药物剂型，改变药物释放的时间过程，或定位释放，或为方便用药而达到治疗目的而制备的药物制剂。缓释制剂、控释制剂、延迟释放制剂和延时释放制剂均为修饰释放制剂的不同类型。常释制剂（Immediatereleasedosageform）：国内称之为普通制剂，为采用常规制剂学方法，而未采用修饰释放技术制备的药物制剂为常释制剂，如常规片剂、胶囊剂和颗粒剂等。

专业术语定义

二、体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

生物样品可根据需要选择全血、血清、血浆或尿液测定其中药物或活性代谢物的浓度用于生物利用度和生物等效性研究，具有取样量少、药物浓度低、内源性物质干扰大（如激素、维生素、胆汁以及可能同服的其他药物）、个体的差异大等原因，因此必须根据待测物的结构、生物样品来源和预期的浓度范围，建立灵敏、专一、精确、的生物分析方法，并经验证后才能用于临床试验。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

1.生物样品分析方法目前常用的几种分析方法有：（1）色谱法：气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、色谱－质谱联用法（LC－MS、LC-MS-MS，GC-MS，GC-MS-MS）等，可用于大多数药物的检测；（2）免疫学方法：放射免疫分析法、酶免疫分析法、荧光免疫分析法等，多用于蛋白质多肽类物质检测；（3）生物测定和微生物学方法。分析一般首选色谱法，如HPLC、GC法或LC－MS、GC－MS法，这类方法灵敏度、特异性、准确性一般都能适应临床药代研究的需要，多数实验室也具备条件，因此应用最广。2.方法学验证为了保证分析方法可靠，一般应进行以下几方面的考察：（1）特异性：特异性是指在样品中存在干扰成分的情况下，分析方法能够准确、专一地测定分析物的能力。必须证明所测定物质是受试药品的原形药物或特定活性代谢物、内源性物质和相应代谢物、降解产物无干扰。如生物样本分析法为色谱法，应至少提供空白生物样品、空白生物样品加入标准品及服药后生物样品的色谱图，以反映分析方法的特异性。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

（2）标准曲线和线性范围：标准曲线反映了所测定物质浓度与仪器响应值之间的关系，一般用回归分析方法（如用加权最小二乘法）所得的回归方程来评价。应提供标准曲线的线性方程和相关系数，说明其线性相关程度。标准曲线高低浓度范围为线性范围，在线性范围内浓度测定结果应达到试验要求的精密度和准确度。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

标准样品：在生物介质中加入已知量分析物配制的样品，用于建立标准曲线，计算质控样品和未知样品中分析物浓度。不同生物样品应配制标准样品制备各自的标准曲线，用于建立标准曲线的标准浓度个数取决于分析物可能的浓度范围和分析物/响应值关系的性质。应使用与待测样品相同生物介质，一般用6-8个浓度建立标准曲线，对于非线性相关可能需要更多浓度点。线性范围要能覆盖全部待测的生物样品浓度范围，不得用线性范围外推的方法求算未知样品的浓度。建立标准曲线时应随行空白生物样品，但计算时不包括该点，仅用于评价干扰。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

（3）精密度与准确度：精密度是指在确定的分析条件下，相同介质中相同浓度样品的一系列测量值的分散程度。通常用质控样品的批内和批间相对标准差（RSD）来考察方法的精确度。一般RSD应小于15％，在定量下限（LowerLimitofquantitation，LLOQ）附近RSD应小于20％。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

准确度是指在确定的分析条件下，测得的生物样品浓度与真实浓度的接近程度(即质控样品的实测浓度与真实浓度的偏差)，常以回收率表示。重复测定已知浓度分析物样品可获得准确度。一般应在85％～115％范围内(一般偏差应少于15％)，在LLOQ附近应在80％～120％范围内。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

一般要求选择3个浓度的质控样品同时进行方法的精密度和准确度考察：低浓度选择在定量下限（LLOQ）附近，其浓度在LLOQ的3倍以内；高浓度接近于标准曲线的上限。每一浓度至少测定5个样品。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

（4）定量下限（LowerLimitofquantitation，LLOQ）定量下限是标准曲线上的最低浓度点，表示测定样品中符合准确度和精密度要求的最低药物浓度。LLOQ应能满足测定3～5个消除半衰期时样品中的药物浓度或能检测出Cmax的1/10～1/20时的药物浓度。其准确度应在真实浓度的80%～120%范围内，RSD应小于20%。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

（5）样品稳定性：含药生物样品在室温、冰冻和冻融条件下以及不同存放时间进行稳定性考察，以确定生物样品的存放条件和时间。以及考察储备液的稳定性和样品处理后的稳定性。

（6）提取回收率：从生物样本样品中回收得到分析物质的响应值除以纯标准品产生的响应值即为分析物的提取回收率。也可以说是将供试生物样品中分析物提取出来供分析的比例。实验应该考察高、中、低3个浓度的提取回收率，应当获得一致、精密和可重现的回收率。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

（7）方法学质控（QC）在测定生物样品中的药物浓度时应进行质量控制。一般做法是在每批样品测定时应同时制备空白、低、中、高4份质控（标准浓度）样品或随行制备标准曲线的方法进行方法学质控研究。质控样品系将已知量的待测药物加入到生物介质中配制的样品，用于监测生物分析方法的效能和评价每一分析批中未知样品分析结果的完整性和正确性。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

应在生物样品分析方法确证完成之后开始测试未知样品。推荐由独立的人员配制不同浓度的标准样品对分析方法进行考核。每个分析批生物样品测定时应建立新的标准曲线，并随行测定高、中、低三个浓度的质控样品。每个浓度至少双样本。质控样品测定结果的偏差一般应小于15%，低浓度点偏差一般应小于20%，最多允许1/3不在同一浓度的质控样品结果超限。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

（8）微生物学和免疫学分析：上述原则基本适用于生物学和微生物学或免疫学分析，但在方法确证中应考虑到其特殊性。微生物学或免疫学分析的标准曲线本质上是非线性的。结果的准确度是关键的因素。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

3.分析数据的报告

研究报告应包括对测定方法的详细描述：提供典型的色谱图：至少要求提供空白生物样品色谱图，空白生物样品体外加入标准品的色谱图以及用药后生物样品的色谱图。校正曲线应提供测定数据及校正曲线，回归方程和相关系数（r），r要求大于0.99；生物学、微生物学和免疫学方法r要求大于0.95。提供测定的精密度和准确度，测定的最低定量限，提取回收率，样品稳定性和质控数据。体内药物测定用生物样品分析方法的建立和验证

三、仿制常释制剂的生物等效性

1.目的：以便申报者通过这一试验进入常释制剂简易申请。2.管理要求①国家药品监督管理局为法定受理和批准仿制药品简易申请的权利机构。常释制剂的简易申请必须证明其仿制药品与参比药品在药学上和生物学上具有等效性。②仿制药品的药学等效性：仿制药品与参比药品比较必须满足药学等效性的条件，即：相同活性成分，相同剂型，相同规格，相同给药途径，相同给药剂量和给药方法，但不要求辅料和释放机制与参比制剂相同。③生物等效性：要求证明仿制药品与指定参比药品生物等效，为此必须按此指南进行一系列生物等效试验。④在进行生物等效性试验前，必须按中国药典要求进行体外溶出度实验。

仿制常释制剂的生物等效性

3.生物等效性的基本要求申报者申报的常释制剂仿制药品的人体生物等效性试验必须证明两制剂的吸收速度和程度无显著差异，主要药代参数（AUC、Cmax、Tmax）经统计学处理等效。为满足仿制药品与参比药品生物等效的基本要求，必须进行单剂量空腹交叉试验：以仿制药品与参比药品相同剂量进行单剂量二周期二处理的随机交叉试验。4.单剂量空腹交叉试验(1)设计在健康受试者进行的本双交叉试验为单剂量、二处理、二周期、二顺序的交叉试验。仿制常释制剂的生物等效性(2)要求①仿制药品与参比药品的服用剂量相同；所用剂量一般应与临床用药剂量一致；在测定灵敏度有限时，可适当增加剂量时，也不得超过临床最大剂量；②受试者应随机分组，二组例数相同；③二期试验的清洗期应大于该药的7倍半衰期，一般应间隔一周或更长时间；④试验方案必须经过医学伦理委员会讨论批准。仿制常释制剂的生物等效性

(3)试验条件①研究机构必须是符合GCP规范的临床药理研究部门；②研究机构必须有一定的数量的不同学科的研究人员；③研究机构必须具备一定的分析测试条件；④在获得正式批件后，提出的试验方案必须经过医学伦理委员会讨论通过后执行。仿制常释制剂的生物等效性

(4)试验药品和参比药品①试验药品必须是经药政管理部门审核同意进行人体生物等效性试验的试验药品；②参比药品必须是经检验合格已上市药品（进口药品国内未上市的不能作为参比）；③申办单位必须提供试验药品和参比药品的溶出度数据。仿制常释制剂的生物等效性

(5)受试者①例数：一般不少于18例，在某些情况下，应根据统计学要求确定例数。②年龄和性别：18-45岁，同批试验者的年龄范围不得相差10岁，除特殊要求外，一般为男性受试者。③体重：按体重指数（体重kg/身高m2）评价，在20-24范围内；或按标准体重（(身高cm-80)×0.7或(身高cm-170)×0.6+62）±10评价。④病史、体格检查、临床实验室检查（血液学、血液生化、心电图等），有特殊要求时，应增加相应检查项目（除降糖药外可不查血糖