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文档简介
苄抗性的平板上,3712-16h。待平板长出菌落,挑选生长状态良好的单克隆菌落。若无5ml氨苄抗性的LB,37℃,220rpm/min,12-5mlLB22ml5000g8min,弃上清(将离心管倒置于纸巾腺病毒质粒的抽提(参考AxyPrep™质粒小抽试剂盒说明书250ulRNaseA的BufferS1250ul4℃BufferS310成紧实的凝集块,室温放置5min。将上清转移到小抽制备管中,4℃5000g1min2mlBufferW2操作一次,弃滤液。2ml,12,000g1min然后将小抽制备管取出,放置于洁净的1.5ml离心管中(试剂盒内提供),在小抽制备管的膜上均60-80ul的Eluent1min12000g离心1min,收集离心液,此为小抽质粒小抽质粒经PacI102.0PacI(151.0加ddH2O200.0EP200ul(等体积)氯仿,上下颠倒混匀,12000rpm离心10min。中放置2-3h,13000rpm离心15min。重复步骤3.4.3,浸泡沉淀10min,离心后取出离心管,将离心管带到细胞间生物安全柜内操作,尽10-20ul灭菌ddH2O40.5ul2ulddH2O(5倍稀释)后电
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