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文档简介

微生物学实验四肠道致病菌分离鉴定微生物学教研室郭棵棵（综合性实验）录像：球菌操作：1、化脓性球菌分离鉴定（二）（1）革兰染色（2）转种甘露醇或血清肉汤（3）血浆凝固酶实验（4）触酶实验

2、肠道菌分离鉴定（一）

——粪便标本接种S.S平板材料：（1）载玻片1-2张/人（2）甘露醇或血清肉汤1支/人（3）新鲜兔血浆、生理盐水各1支/6人（4）S.S平板1块/人（5）粪便标本：伤寒、痢疾、副甲、副乙1套/教室实验内容了解：肠道致病菌的血清学鉴定

触酶实验、血浆凝固酶实验的原理掌握：

1.肠道致病菌分离鉴定的方法、步骤及生化反应

2.化脓性球菌转种甘露醇或血清肉汤的目的

3.触酶、血浆凝固酶实验的结果观察[教学目标]观察上次实验结果、进行分析紫外线杀菌实验抗生素敏感试验

抑菌圈直径

如果细菌对药物敏感，则在药片周围有抑菌圈形成，敏感度越高抑菌圈直径越大：

>20mm：极度敏感

5-20mm：中度敏感

10-15mm：轻度敏感

<10mm:不敏感无抑菌圈:耐药化脓性球菌分离鉴定（二）

脓汁血平板菌落葡萄状排列链状排列血浆凝固酶实验甘露醇发酵实验血清肉汤管接种三线法37℃24h革兰染色触酶实验排列不典型2、操作革兰染色及镜检触酶实验血浆凝固酶实验转种甘露醇或血清肉汤

涂片：先在玻片上放一滴生理盐水，然后刮取菌落在盐水中乳化，涂成直径约为1.0cm的膜。干燥：最好在室温中自然干燥，也可在远离火焰上方微微烘干。但切勿靠火焰以免烤焦标本。固定：火焰固定。革兰染色过程：初染：结晶紫1分钟媒染：碘液1分钟脱色：95%酒精半分钟复染：稀释复红半分钟镜检：球阳杆阴阳紫阴红

（1）革兰染色葡萄球菌链球菌H2O2catalase2H2O+O2（2）触酶实验原理：产生过氧化氢酶的细菌，能催化过氧化氢生成水和分子氧出现气泡。操作步骤：

在洁净玻片上滴一滴生理盐水，用接种环取少许细菌培养物与生理盐水中乳磨均匀，然后加3％过氧化氢数滴；或直接滴加3％过氧化氢于不含血液的细菌培养物中，立即观察结果。结果观察：有大量气泡产生者为阳性。不产生气泡者为阴性。G+球菌中，葡萄球菌和微球菌均产生过氧化氢酶，而链球菌属为阴性，故此试验常用于G+球菌的初步分群（3）血浆凝固酶试验

1）原理

致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，在血浆

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