DB34T4534-2023植物源性产品中氰氟草酯及其代谢物残留量的测定

ICS67.05034CCSX0434安 徽 省 地 方 标 准DB34/T4534—2023植物源性产品中氰氟草酯及其代谢物残留量的测定Determinationofcyhalofop-butylandmetabolitesresiduesinproduceofplantoriginDeterminationofcyhalofop-butylandmetabolitesresiduesinproduceofplantorigin2023073120230831安徽省市场监督管理局发布DB34/T4534—2023前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽省食品质量安全检验方法标准化技术委员会提出。本文件由安徽省市场监督管理局归口。（国家农副加工食品质量检验检测中心验研究院。明娜、刘宇、彭艺、周迪、黄孟凯、李静。IIDB34/T4534DB34/T4534—2023DB34/T4534DB34/T4534—2023植物源性产品中氰氟草酯及其代谢物残留量的测定范围本文件方法一规定了植物源性糙米、小麦中氰氟草酯残留量的测定方法。本文件方法一适用于植物源性糙米、小麦中氰氟草酯残留量的测定。本文件方法二规定了植物源性糙米、小麦中氰氟草酯主要代谢物氰氟草酸和氰氟草二酸残留量的测定方法。本文件方法二适用于植物源性糙米、小麦中氰氟草酯主要代谢物氰氟草酸和氰氟草二酸残留量的测定。规范性引用文件（包括所有的修改单适用于本文件。GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。方法一植物源性产品中氰氟草酯的测定4原理试样用乙酸乙酯提取，提取液经PSA净化，气相色谱-三重四极杆质谱联用仪检测，基质匹配标准溶液外标法定量。5试剂与材料除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，水为GB/T6682规定的一级水。试剂无水硫酸镁（MgSO4）。乙酸乙酯（C4H8O2）：色谱纯。标准品1（C20H20FNO4，CAS纯度≥95.0％，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。标准溶液的配制标准储备溶液（1000µg/mL）：精密称取氰氟草酯（5.2）10mg（0.1mg）10mL1000µg/mL3（100µg/mL）（5.3.1）2.50.1mL）25mL100µg/mL保存，1材料陶瓷均质子。0.22μm乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶（PSA）40μm～60μm。6主要仪器和设备恒温振荡器。涡旋装置。离心机：转速≥5000r/min。7分析步骤试样的制备与贮藏按照GB2763的规定执行。随机取不少于500g样品，粉碎后充分混匀，放入聚乙烯瓶或袋中，置于4℃及以下冷藏条件保存。试样处理5g（恒温振荡器。涡旋装置。离心机：转速≥5000r/min。7分析步骤试样的制备与贮藏按照GB2763的规定执行。随机取不少于500g样品，粉碎后充分混匀，放入聚乙烯瓶或袋中，置于4℃及以下冷藏条件保存。试样处理5g（0.01g）50mL5mL30min，再加入10mL乙酸乙酯（5.1.2），3g无水硫酸镁（5.1.1）及1颗陶瓷均质子（5.4.1），恒温（40℃）振荡1min，5000r/min离心5min，吸取上清液5mL加到内含750mg无水硫酸镁（5.1.1）和250mgPSA粉（5.4.3）的15mL塑料离心管中，涡旋混匀1min，5000r/min离心5min，吸取上清液过微孔滤膜（5.4.2），待测定。测定仪器参考条件色谱柱：（5％-苯基）-甲基聚硅氧烷的苯基芳基聚合物毛细管柱，30m×0.25mm×0.25μm，或相当者；2b)色谱柱温度：40℃1min40℃/min120℃5℃/min240℃，再以12℃/min300℃，保持5min；c)载气：氦气，纯度≥99.999％，流速1.0mL/min；进样口温度：280℃；进样体积：1μL；10∶1；离子轰击源：70eV；离子源温度：230℃；传输线温度：280℃；溶剂延迟：5min；1：表1氰氟草酯的保留时间、定量离子对、定性离子对和碰撞电压名称保留时间min定量离子对碰撞电压V定性离子对碰撞电压V氰氟草酯30.25256.1-120.112357.1-256.1107.3.2标准工作曲线mg/L、0.10mg/L、0.20mg/L、0.40mg/L的基质匹配标准工作溶液，供气相色谱-质谱联用仪测定。以氰氟草酯定量离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。氰氟草酯的多反应监测图见附录A。定性保留时间被测试样中氰氟草酯色谱峰的保留时间与相应氰氟草酯标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在±2.5％之内。定量离子、定性离子计子离子丰度比mg/L、0.10mg/L、0.20mg/L、0.40mg/L的基质匹配标准工作溶液，供气相色谱-质谱联用仪测定。以氰氟草酯定量离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。氰氟草酯的多反应监测图见附录A。定性保留时间被测试样中氰氟草酯色谱峰的保留时间与相应氰氟草酯标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在±2.5％之内。定量离子、定性离子计子离子丰度比则可判断样品中存在目标农药。表2定性时相对离子丰度比的最大允许偏差单位：％7.3.4定量3相对离子丰度＞50＞20-50（含）＞10-20（含）≤10允许相对偏差±20±25±30±50外标法定量。试样溶液的测定内，超过线性范围时应根据测定浓度用乙酸乙酯进行适当倍数稀释后再进行分析。平行试验按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。空白试验除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。8结果计算试样中的氰氟草酯残留量以质量分数ω计，单位为毫克每千克（mg/kg），按公式(1)计算：CVf(1)m 式中：式中：ω——试样中氰氟草酯残留量的数值，单位为毫克每千克（mg/kg）；C——从基质匹配标准工作曲线中得到的试样溶液中氰氟草酯的质量浓度的数值，单位为毫克每升（mg/L）；V——样液最终定容体积的数值，单位为毫升（mL）；f——试样溶液稀释倍数；m——称取试样质量的数值，单位为克（g）。注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。9方法的灵敏度和精密度灵敏度本方法氰氟草酯的定量限为0.02mg/kg。精密度在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20％。方法二植物源性产品中氰氟草酯代谢物的测定10原理定量。4试剂和材料除非另有说明，在分析中仅使用分析纯的试剂，水为GB/T6682规定的一级水。试剂乙腈（CH3CN）：色谱纯。（CH3OH）：色谱纯。乙腈-水溶液（1∶1，体积比）：50mL50mL甲酸（HCOOH）：色谱纯。0.1％1.0mL1000mL，混匀。标准品11.2.1（C16H12FNO4，CAS11.2.2（C16H13FO62，CAS52564-94-6≥98.0％，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。标准溶液的配制（100约10.01mg）10mL（11.1.1）溶解并定容，配制成浓度为100µg/mL3（100约10.01mg）10mL（11.1.1）溶解并定容，配制成浓度为100µg/mL3（10（11.3.1）1.050％1010µg/mL1（10（11.3.2）1.010mL，10µg/mL，―18℃保存，有效期1材料陶瓷均质子。微孔滤膜(有机相)：0.22μm或性能相当者。主要仪器和设备ESI0.01g、0.1mg0.01mg离心机：转速≥5000r/min。分析步骤5试样的制备与贮藏同7.1。试样处理称取5g试样（精确至0.01g）于50mL塑料离心管中，加5mL水混匀，涡旋2min，静置10min10mL（11.1.3）1（11.4.1）（37℃）15min，5000r/min5min，上清液转入20mL5mL（11.1.3）重复提取一次，合并两次提取液，用乙腈-水（11.1.3）定容至刻度。吸取上清液过微孔滤膜（11.4.2），待测定。测定液相色谱参考条件色谱柱：C18色谱柱（2.1×100mm，1.7μm）或性能相当者；b)柱温：40℃；流动相：A0.1％甲酸溶液，B3；流速：0.30mL/min；进样体积：1μL。表3流动相梯度洗脱条件时间min流动相A％流动相B％0.09551.09553.050506.030709.059510.059510.5955质谱参考条件质谱参考条件（ESI）；扫描方式：负离子扫描；检测方式：多反应监测（MRM）；雾化气流速：3.0L/min；加热气流速：10.0L/min;干燥气流速：8.0L/min;离子源接口电压：3.0kV；脱溶剂管温度：250℃；接口温度：350℃；加热模块温度：400℃4。6表4定性离子对、定量离子对和质谱分析参数化合物名称定性离子对m/z定量离子对m/z前四级杆电压V碰撞能量eV后四级杆电压V氰氟草酸299.95＞228.00299.95＞228.00111313299.95＞208.00222130氰氟草二酸319.00＞247.00319.00＞247.00161415319.00＞203.00172219基质匹配工作标准曲线13.1-13.2用空白基5.0ng/mL10ng/mL20ng/mL50ng/mL、100ng/mL，氰氟草二酸浓度依次为12.5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、125ng/mL、200ng/mL的基质匹配标准工作溶液，供液相色谱-质谱联用仪测定。以农药定量离子的质量色谱图峰面积为纵坐标，相对应的基质匹配标准工作溶液质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线。氰氟草酸和氰氟草二酸的多反应监测图见附录B。定性被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在+2.5％之内。13.3.4.2离子丰度比被测试样中目标农药色谱峰的保留时间与相应标准色谱峰的保留时间相比较，相对误差应在+2.5％之内。13.3.4.2离子丰度比则可判断样品中存在目标农药。表5定性时离子丰度比的最大允许偏差单位：％13.3.5定量外标法定量。试样溶液的测定内，超过线性范围时应根据测定浓度用乙腈-水（11.1.3）进行适当倍数稀释后再进行分析。平行试验7相对离子丰度＞50＞20-50（含）＞10-20（含）≤10允许相对偏差±20±25±30±50按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。空白试验除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。结果计算ω按公式(2)计算：CVf(2)式中：ω——试样中氰氟草酸或氰氟草二酸残留量的数值，单位为毫克每千克（mg/kg）；C——位为纳克每毫升（ng/mL）；V——样液最终定容体积（mL）；f——试样溶液稀释倍数；m——称取试样质量的数值，单位为克（g）。注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。15方法的灵敏度和精密度15方法的灵敏度和精密度灵敏度本方法氰氟草酯代谢物氰氟草酸、氰氟草二酸的定量限分别为0.02mg/kg、0.05mg/kg。精密度在重复性条件下，获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20％。8附录A（资料性）氰氟草酯色谱图如图A.1。(x100)5.0256.10>120.10(x100)5.0256.10>120.104.03.02.01.0357.10>256.102.01.51.00.529.5 30.0 30.5 31.0 29.5 30.0 30.5 31.0图A.1氰氟草酯MRM色谱图（0.01mg/L）99附录B（资料性）氰氟草二酸和氰氟草酸的色谱图氰氟草二酸和氰氟草酸的MRM色谱图如图B.1。

1:氰氟草二酸319.0000>247.0000(-)CE