中药生物技术

考点ADDINCNKISM.UserStyle名词解释生物技术：对生物或者生物成分进行改造和利用的技术植物生物技术：植物生物技术是一门研究植物遗传规律、探索植物生长发育机理，应用现代生物技术改良遗传性状、培育新品种、创造新种质的学科。植物组织培养：植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养，并在人工控制的环境条件下，使其发育成完整植株的科学技术形态发生：不同表型的细胞构成组织、器官，建立结构的过程。外植体：植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。脱分化：指失去分生能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂而形成无分化细胞的愈伤组织的现象。再分化：愈伤组织形成不定芽，不定根或胚状体。愈伤组织：原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。在组培中，则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。胚状体：在离体的植物细胞，组织，器官培养的过程中，由一个或一些体细胞经过胚胎的发生和发育过程，形成的与合子胚结构类似的中间繁殖体。试管苗快速繁殖：利用植物组织培养技术，对植物外植体进行离体培养，使其在短时间内获得大量遗传性一致的再生植物的方法。植物人工种子：指通过组织培养技术，将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚，然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中，组成便于播种的类似种子的单位。单倍体植物：只含有配子染色体组数的植株。细胞悬浮培养：将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术诱导子：一类特殊的触发因子，它能够开启代谢过程中酶的活性，因而能增加次生代谢物的含量，有时甚至可以诱导出新的化合物。植物原生质体：指去掉细胞壁的由质膜包裹的有生命活力的裸细胞。植物体细胞杂交：也称原生质体融合，指将不同的种属科间的原声质体通过人工方法诱导融合，然后进行离体培养，使其再生杂种植株的技术。基因工程：又称基因拼接技术或DNA重组技术。是以分子遗传学为理论基础，以分子生物学和微生物学的现代技术为手段，将不同来源的基因按预先设计的蓝图，在体外构建成杂种DNA分子，再导入到活细胞，以改变生物原有的遗传物特性，获得新品种，生产新品种。PCR技术：模拟体内DNA分子的天然复制过程，在体外扩增DNA分子的一种分子生物学技术。基因组DNA文库：指将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段，克隆到某种载体上而形成的集合。cDNA文库：以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。核酸分子杂交：来源相同或不同的DNA甚至DNA与RNA分子变性后，在合适的条件下，通过碱基互补配对形成双链杂交体的过程。植物基因转化：是指将外源基因转移到植物细胞内、并整合到植物基因组中稳定遗传和表达的过程。发酵工程：又称为微生物工程，是利用微生物制造工业原料与工业产品，并提供服务的技术。药用植物内生菌：指一类在其部分或全部生活史存活于健康植物组织内部，不引发宿主植物表现出明显感染症状的微生物。DNA分子标记：可遗传并可监测的DNA序列或蛋白，包括蛋白质标记和DNA标记。RAPD技术：利用一系列单链随机引物(8-10个碱基)，通过PCR反应对基因组的DNA进行非定点扩增，然后用凝胶电泳分离扩增片段来检测DNA的多态性。DNA条形码技术：通过使用一个或几个具有足够变异的短标准DNA片段作为物种的条形码，对物种进行快速、准确的识别和鉴定。填空植物生物技术由(植物基因工程)、(植物组织培养)、(植物细胞工程)组成。人工种子由三部分组成，即(人工种皮)、(人工胚乳)、(胚状体)。细胞悬浮培养中，细胞生长曲线呈S型，经历了以下几个生长周期，分别为（滞后期）、（对数生长期）、（直线生长期）、及（减慢期）、（静止期）。目前使用的基因工程载体主要有：（质粒载体）及（噬菌体载体）。基因工程的工具酶主要有：（限制性内切酶）、（连接酶）及（DNA聚合酶）。简答题植物细胞表现出全能性的条件有哪些？必须是活细胞，且是处于代谢旺盛期；

2.有适合的培养基提供所需营养物质和代谢调节物质；

3.适宜的温度、湿度、光照、氧气；

4绝对的无菌培养环境和条件。试管苗快速繁殖中主要存在哪些技术障碍？外植体褐变，微生物污染，组织苗玻璃化，遗传稳定性控制。简要说明试管苗快速繁殖的优点。繁殖效率高，不受季节和自然灾害性气候影响，生长速度快。2.培养条件可控性强3.占用空间小4.管理方便，利用自动化控制5.便于种质保存和交换。简要说明人工种子的优点。通过组织培养的方法可以获得数量很多的胚状体可根据不同植物对生长的要求配置不同成分的“种皮”；解决了有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题人工种子与试管苗相比，具有所用培养基量少、体积小、繁殖快、发芽成苗快、运输及保存方便的特点人工种子可以克服营养繁殖造成的病毒积累，可以快速繁殖脱毒苗为什么茎尖培养能够脱除病毒？病毒在植物体内的分布是不均的，在受病毒感染的植株中，茎尖顶端的分生组织一般是不含病毒的。原因有三：1.植物本身不主动转移病毒，病毒自身很难追上活跃生长的茎尖生长点。2.茎尖分生组织细胞分裂旺盛，代谢活性高，病毒无法复制3.茎尖分生组织中内源生长素含量高，抑制病毒增值。植物病毒的传播方式有那些？1非介体传播（1）机械传播（汁液传播）病毒可以通过摩擦所造成的微伤而传毒。（2）种子、繁殖材料和嫁接传播（3）土壤传播2介体传播介体以昆虫为主，传毒昆虫主要是刺吸式口器的昆虫。简述花药及花粉培养的意义。花药培养得到的植株，不仅能够正常生殖，而且每对染色体上成对的基因都是纯合的，自交产生的后代不会发生性装分离。与常规杂交育种方法相比，明显缩短了育种年限。简述胚培养的意义。1,克服杂种胚的败育,获得稀有杂种2,获\t"/item/%E8%83%9A%E8%83%8E%E5%9F%B9%E5%85%BB/_blank"单倍体和\t"/item/%E8%83%9A%E8%83%8E%E5%9F%B9%E5%85%BB/_blank"多倍体植株3,打破种子休眠,促进胚萌发4,快速繁殖良种,缩短育种周期5,克服种子生活力低下和自然不育性,提高种子发芽率6,提高后代抗性,改良品质7,种子活力的快速测定8,种质资源的搜集和保存9,研究胚胎发育的过程和控制机制简述植物细胞悬浮培养的过程。先选择培养的材料，可来源于愈伤组织、植物器官、无菌苗等。之后将培养的材料用机械法或者酶解法分离单细胞，作为接种材料，再将获得的单细胞滤液接种于试管或者培养皿瓶中，置于震荡器上培养。最后可以通过细胞数目、鲜重、干重三项参数对悬浮细胞的生长情况进行测定。简述原生质体培养的意义。①植物原生质体是细胞无性系变异和突变体筛选的重要来源；②植物原生质体是细胞融合工作的基础；③植物原生质体是植物遗传工程的理想受体和遗传饰变的理想材料；④在细胞生物学与遗传理论研究上的应用。简述体细胞杂种的优势与应用。优势：营养体大小，生长速度和有机物的积累均强于双亲杂交体生活力强，适应性广、有较强的抗逆力和竞争力应用：1、植物育种中的核质替换2、细胞质杂种的获得3、

远缘杂交创造新物种4、

细胞器的互作研究基因克隆载体应具备哪些条件？1.容易进入宿主细胞，效率越高越好2.能在宿主细胞中复制繁殖，有较高的自主复制能力3.容易插入外源DNA片段4.容易从宿主细胞中分离纯化出来5.有容易被识别筛选的标志。培养基的主要成分有哪些？各有何作用？1.无机盐，包括大量元素和微量元素。包括C、H、O、Fe、I、Cl等。这些元素参与培养物机体的建造，构成植物细胞中的核酸、蛋白质、叶绿体、酶系统和生物膜所必需的元素。2.有机营养成分：糖类维生素氨基酸等糖类作为碳源，提供能量和维持培养基渗透压。维生素常以辅酶形式参与生物催化剂——酶系的活动，以及参与细胞的蛋白质代谢、脂肪代谢、糖代谢等重要生命活动。氨基酸作为重要的有机氮源。3

植物生长调节物质如生长素和细胞分裂素将细胞分裂素和生长素配合使用，即细胞分裂素与生长素的比例大时，促进芽的形成，这时细胞分裂素起到主导作用；比例小时，则有利于根的形成，这时生长素起主导作用。植物材料在进行离体培养前如何进行表面消毒？常用的消毒剂有哪些？一般植物材料首先在消毒前除去泥土或死组织，然后用水冲洗除去外部污染物，然后剥除外层表皮或组织。消毒时可先在70%酒精中浸泡数秒以除去空气气泡，用1.0%次氯酸钠消毒10~30分钟，或或用0.1%升汞消毒5~15分钟，之后用无菌水冲洗3~5次后接种。常用的消毒剂:70%酒精、1.0%次氯酸钠、0.1%升汞获取目的基因的方法有哪些？从基因文库中获取目的基因PCR扩增目的基因人工合成已知基因序列cDNA文库、反转录法简述电泳技术的原理。电泳是指带电的胶体或者大分子在外加直流电场中向带相反电荷的电极定向移动的现象。电泳技术常用于物质的分离、定性。不同的混合物组分所带的电荷性质，数量不同，在同一电场的作用下，定向泳动的方向和速度也有差异，从而达到分离的目的。简述根癌农杆菌导致植物产生冠瘿瘤的机理。根癌农杆菌中含有致瘤质粒Ti质粒，当根癌农杆菌感染植物时，Ti质粒上的T-DNA的DNA片段进入植物细胞并插入基因组中，T-DNA中的基因利用植物的表达系统进行转录配合和翻译，表达产物可诱导植物产生肿瘤。简述外源基因导入受体细胞的各种途径。农杆菌TI质粒介导基因转化。将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助弄农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移和整合。基因枪法。利用高压氦气或氮气将吸附重组DNA的金粉或钨粉加速，高速轰击植物细胞化学刺激法。借助细胞融合剂使细胞膜表面电荷发生缭乱，质膜容易发生短时间的相变，从而使外源DNA导入细胞微注射法。对于具有较大子房或囊胚的植物无需进行细胞固定，可进行微量注射。鉴定转基因植株的方法有哪些？利用标记基因进行鉴定分子检测：分子杂交和分子标记免疫技术:酶联免疫法、免疫荧光法微生物发酵的产物有哪几种类型？根据微生物发酵产物的不同分为：微生物菌体发酵、微生物酶发酵、微生物代谢产物发酵、微生物的转化发酵、生物工程细胞发酵。简要说明发酵的基本过程。首先是对优良菌种的选育和保藏，选育可为生产提供各类型的突变株，大幅提高菌种产生有价值代谢产物的水平，还可以改进产品的质量。之后是进行菌种的培养，以此获得一定数量和质量的纯种，再进行发酵培养。最后是发酵产品的下游加工，对发酵产品进行分离纯化。论述题试述PCR的原理及其应用。PCR的基本工作原理是以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成。不断重复这一过程，可使目的DNA片段得到扩增。因为新合成的DNA也可以作为模板，因而PCR可使DNA的合成量呈指数增长。应用：生物学领域中有：基因、DNA片段的克隆，人工基因的构建、DNA序列测定、基因型突变检测、生物物种鉴定医学领域中有：疾病基因检测，遗传病的产前诊断、治病病