食品安全快速检测方法及质量控制（食品安全监督管理课件）

食品安全快速检测方法及质量控制CONTENTS目录01快速检测方法选择02常用快检方法操作要点03快检产品的选择1快速检测技术方法选择第一百一十二条县级以上人民政府食品药品监督管理部门在食品安全监督管理工作中可以采用国家规定的快速检测方法对食品进行抽查检测。KJ201710蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测NY/T448-2001蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法GB/T

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蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测国家规定的快检方法有哪些？国家标准GB/T农业标准NY/T进出口行业标准SN/T市场监管总局批准发布的标准KJ动物源性食品中喹诺酮类物质的快速检测；动物源性食品中克伦特罗、莱克多巴胺及沙丁胺醇的快速检测；水产品中氯霉素的快速检测；水产品中硝基呋喃类代谢物的快速检测；保健食品中巴比妥类化学成分的快速检测；保健食品中罗格列酮和格列苯脲的快速检测；保健食品中西地那非和他达拉非的快速检测快速检测方法分类胶体金检测卡法（17个）：食品中呕吐毒素的快速检测；食品中玉米赤霉烯酮快速检测；液体乳中黄曲霉毒素M1的快速检测；食用油中黄曲霉毒素B1的快速检测；食用油中苯并（a）芘的快速检测；液体乳中三聚氰胺的快速检测；水产品中孔雀石绿的快速检测；辣椒制品中苏丹红I的快速检测；食品中罗丹明B的快速检测；食品中吗啡、可待因的快速检测；食用油、肉制品、水产品、保健食品…真菌毒素、非法添加物、兽药残留…胶体金检测卡法：目标物与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗体和检测卡中检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化，通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对目标物进行定性判定。快速检测方法分类比色管比色法：食品中硼酸的快速检测姜黄素比色法；食品中亚硝酸盐的快速检测盐酸萘乙二胺法；水发产品中甲醛的快速检测；白酒中甲醇的快速检测与试剂反应后观察比色管颜色来定性，或根据颜色深浅来半定量，比色定量可以是目视，也可以用便携式光度计。快速检测方法分类试纸法：KJ201911食用植物油酸价、过氧化值的快速检测；KJ201710蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测用试纸直接显色来定性，或根据显色深浅来半定量。2常用快速检测技术操作要点一、农药残留快速检测方法★农业标准NY/448-2001

蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测方法★国家标准GB/T

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蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测★KJ201710蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测

酶抑制率法（分光光度法）检测卡法在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率。有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶（白色药片）有抑制作用，抑制胆碱酯酶催化靛酚乙酸酯（红色药片）水解为乙酸与靛酚（蓝色），从而导致速测卡颜色深浅的变化。通过空白颜色比较，对样品中有机磷和氨基甲酸酯类农药进行定性判定。操作控制要点1、制样整株提取法整体提取法选取韭菜、芹菜有代表性的样品，擦去表面泥土，称取试样3g（精确至0.1g）置于表面皿中，加入10mL缓冲液，残缺面不得接触缓冲液，轻轻振摇50次，静置2min以上，取上清液备用。选取油菜、菠菜有代表性的样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，称取3g（精确至0.1g）放入小离心管中，加入10mL缓冲溶液，振摇50次，静置2min以上，取上清液备用。错误做法不能保证取样的代表性注意事项：1.葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，采取整株蔬菜浸提。2.对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。或者建议可以采取减半取样量的方法进行试验，降低干扰。操作控制要点2、质控试验监控检测过程，保证检测结果的可信性和准确性。为什么要做质控？空白试验加标质控试验检验试验过程是否被污染，所用试剂是否有目标物，扣除基体干扰。监控试验过程操作是否有异常，有利于及时发现问题。操作控制要点2、质控试验空白试验加标质控试验每次测定都需有一个缓冲溶液的空白对照，空白试验测定结果应为阴性。称取5份空白试样各3g（精确至0.1g），按照蔬菜种类选用相应的提取方法，分别加入检出限水平的有机磷和氨基甲酸酯类标准中间液，加标质控试验测定结果应均为阳性。例如：敌百虫检测限是0.1mg/kg，根据样品量为3g，那么敌百虫加标质控样需要添加0.3μg的敌百虫，根据标准中间液的浓度为1μg/mL，需要加入0.3mL的敌百虫标准中间液。想一想：丙溴磷检测限是0.5mg/kg，加标质控样应加入多少丙溴磷标准液？操作控制要点2、质控试验农药名称敌百虫丙溴磷灭多威克百威敌敌畏检测限(mg/kg)0.10.50.20.020.2标准中间液浓度（μg/mL）11111加标量（mL）0.31.50.60.060.6样品放置时间应与空白对照放置时间一致才有可比性。待测样品加入底物之后，应马上摇匀，放入测定仪，否则影响数据准确性。酶抑制率法最关键的试剂是酶的活性，酶的活性降低或失去活性时就会出现假阳性，空白对照测试3min的吸光度变化值△A0值应控制在0.2~0.3，可以通过控制酶量进行调节。空白对照卡不变色的原因：药片表面缓冲液少，预反应后表面不够湿润或者温度太低。需要保证白色药品区域湿润，否则检测结果无效。结果为阳性时，应采用其他方法进行确证，进一步确定农药品种和含量。因为有可能会出现农药抑制酶效果的叠加作用，呈现出假阳性。操作控制要点可能出现的问题二、瘦肉精的快速测定方法

★KJ201706动物源性食品中克伦特罗、莱克多巴胺及沙丁胺醇的快速检测胶体金免疫层析法

操作控制要点1、制样隔水煮法固相萃取法90℃水浴加热20min至离心管中可清晰看见有组织液渗透，离心取上清液。若用隔水煮法检测结果为阳性，建议用此方法再次进行验证，提高准确性。利用样品中目标物与共存干扰组分在固相萃取剂上作用力强弱不同，通过选择性吸附与选择性洗脱，使它们彼此分离。操作控制要点固相萃取法目标物杂质或干扰物目的是：浸润填料、以便样品溶液能流过固相萃取柱；清洗固相萃取柱上面的干扰杂质以及溶剂残留。一般用甲醇，然后用水。注意整个过程不能使小柱干涸1.活化如果使用的是高聚物基质的阳离子柱，可直接上样，不用活化。要是使用硅胶基质的，活化是为了打开键合在硅胶上的碳基团链，甲醇是与碳链互溶，用水作为过度为了能和样品液相溶。操作控制要点固相萃取法目标物杂质或干扰物目的是：将样液转移入柱，目标物均保留在小柱上。注意控制流速一定要慢，1滴/秒，不需要加压。2.上样操作控制要点固相萃取法目标物杂质或干扰物目的是：最大程度去除干扰物。建议此过程后将小柱完全抽干。3.淋洗操作控制要点固相萃取法目标物杂质或干扰物目的是：将目标物完全洗脱下来，收集洗脱液。注意控制流速1滴/秒。4.洗脱操作控制要点2、质控试验空白试验加标质控试验结果应为阴性。结果应为阳性。兽药名称克伦特罗莱克多巴胺沙丁胺醇检测限(μg/kg)0.50.50.5标准中间液浓度（ng/mL）202020加标量（mL）0.1250.1250.125注意事项：本方法使用克伦特罗试剂盒可能与沙丁胺醇、特布他林、西马特罗等有交叉反应，当结果判定为阳性时，应对结果进行确证。本方法使用沙丁胺醇试剂盒可能与克伦特罗、特布他林、西马特罗等有交叉反应，当结果判定为阳性时，应对结果进行确证。三、亚硝酸盐的快速测定方法

★KJ201704食品中亚硝酸盐的快速检测盐酸萘乙二胺法操作控制要点1、质控试验质控样品试验加标质控试验采用典型样品基质或相似样品基质按照实际生产工艺生产的，含有一定量亚硝酸盐，并可稳定保存的样品。经参比方法确认的质控样品中亚硝酸盐含量（以亚硝酸钠计）应包括但不限于10mg/kg。结果应在标示量值范围内。准确称取空白试样1g（精确至0.01g），加入适量亚硝酸钠标准工作液（200µg/mL），使样品中亚硝酸钠含量为10mg/kg。需要注意应振摇后，静置30min，充分模拟样品真实状态。结果应与加标量相符。基质质控样操作控制要点2、结果判定本方法的检测限为1mg/kg，虽然餐饮食品要求不能添加亚硝酸盐，但由于很多食品中本底会带有亚硝酸盐，因此10mg/kg作为本底控制限，颜色介于1mg/kg和10mg/kg之间的，考虑为本底污染，颜色深于10mg/kg结果为阳性。操作控制要点注意事项：1.本方法为比色法，对于水的要求比较严格。水为GB/T6682规定的二级水，大桶水一般不能满足要求，可配纯水机，或使用市售瓶装纯净水。2.待测样品中若存在高含量的亚硫酸氢钠、抗坏血酸或酱油时，会对本法的显色结果产生一定影响，检测时应予以注意。3.色阶卡应确保在试剂盒保质期内不出现褪色或变色的情况。3快检产品的选择快检产品的选择如何选择快检的试剂盒？1.方法的性能指标假阴性率假阳性率检测限假阴性率是指方法在实验条件下达到的实际最低检出水平时，阳性样品中检出阴性结果的最大概率（以百分比计）。快检产品的选择如何选择快检的试剂盒？1.方法的性能指标假阴性率假阳性率检测限假阳性率是指方法在实验条件下达到的实际最低检出水平时，阴性样品中检出阳性结果的最大概率（以百分比计）。快检产品的选择如何选择快检的试剂盒？1.方法的性能指标假阴性率假阳性率检测限要符合方法里面要求的检测限水平。通过设计样品方案，选取典型基质样本，设计0.5、1、2倍检测限水平的样品和空白样品来验证试剂盒检测限水平。通过低于检测限水平的样品来检验假阳性的概率，高于检测限水平的样品来检验筛查阳性样品的准确性。快检产品的选择如何选择快检的试剂盒？2.试剂状态例如亚硝酸盐快检试剂