实验室质量控制及规范化管理

艾滋病检测实验室规范化管理及质量控制艾滋病确证中心实验室叶黎管理的精髓：减少或预防失误的发生概率失误带来的成本增加>用于管理的成本艾滋病检测实验室管理依据《全国艾滋病检测工作管理办法》《全国艾滋病检测技术规范》……艾滋病检测实验室管理一、人员管理“工欲善其事，必先利其器”一、人员管理1、检验人员必须接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。2、检测人员应分为检测人、复核人、签发人。复核人、签发人都应具备对检测过程进行分析和解决问题的能力。2、参加职能考核和能力验证。3、复训和提高……二、实验环境1、应划分清洁区、半污染区和污染区，并有明显标记，有充足的操作空间。符合2级生物安全要求有生物安全标识。门要有可视窗，并达到适当的防火等级。墙、天花板、地板光滑易清洁并耐腐蚀，地板防滑。实验台面应防水、耐腐蚀、适当耐热。每个房间应有洗手池（感应式或脚踏式，安装在出口处）、洗眼器。窗户应有防蚊蝇、防裂齿类动物设施，窗帘要能便于消毒。尽量减少使用玻璃器皿。要有消毒设备或设施。……二、实验环境

二、实验环境2、保持实验室严格的清洁度二、实验环境

二、实验环境

办公室二、实验环境3、控制实验温度实验室应装置恒温设备，室温保持在18-23℃。三、仪器设备管理1、仪器设备的选用。2、安装、使用。3、唯一性标识。4、撰写作业指导书。4、仪器设备的使用、保养、维护记录。5、计量仪器的校准。三、仪器设备管理必须经国家法定部门定期（每年至少一次）校准的仪器包括：酶标仪、加样器、温度计、高压灭菌器。其它仪器也必须定期校准（每年一次），可请厂家校准，如:生物安全柜、离心机等。三、仪器设备管理生物安全柜

年检合格，实验完毕后不要把消毒剂放在生物安全柜内。移液器

必须使用校准过的移液器，移液器每年至少校准一次。酶标仪

每年必须检定一次，平常注意防尘，检查、清洗滤光片。洗板机

每次用后一定要冲洗，在洗涤时观察下高低是否合适，灌注液体是否适当，是否有管道堵塞，是否有漏液。冰箱孵箱温度记录移液器的校准在室温22℃无风的工作室中，在万分之一级别天平上放置一个小三角烧瓶，用待校准的移液器吸取存放过夜的蒸馏水加入烧瓶底部，称重并计算整馏水重量，连续称重10次。加蒸馏水的量根据待校准移液器的规格而不同，10次校准称量均在要求的重量范围内为合格。称重法校准移液器方案移液器规格蒸馏水量要求重量范围0.5～5ul2ul1.75～2.25mg1～10ul10ul9.8～10.2mg40～200ul70ul69.4～70.6mg200～1000ul300ul298.0～302.0mg1～5ml2000ul1990.0～2010.0mg2～10ml3500ul3485.0～3515.0mg四、文件管理

四、文件管理文件包括：程序文件、作业指导、标准操作程序（SOP）、记录和报告、各种制度等等……。艾滋病实验室要建立覆盖主要工作内容的SOP文件艾滋病筛查实验室SOP文件至少应包括：1）、样品接收、登记、处理、保存和运输；2）、检测方法和步骤；3）、试剂使用和保存；4）、仪器的使用维护和校准5）、实验室数据、相关文件记录与保存；6）、结果解释与报告等；记录和报告仪器使用记录的放置和使用。送样时，名字、地址书写问题。改报告现在很困难SOP通常包括以下类型检测细则：ELISA、快速检测等仪器操作维护规程：酶标仪、洗扳机、移液器、天平、温度计等检测流程实验原始记录实验报告根据自己实验室需求添加其他种类，如试剂评估规程、实验室样本流转单等SOP编写通常包括以下内容1）、标题和编号；2）、编写和修订日期；3）、编写和修订人员姓名；4）、方法、目的和应用范围；5）、检测设备；6）、试剂及有效期；7）、安全防护相关步骤；8）、附录，包括相关的附加文件如标准表格、设备和试剂盒说明书等。SOP的编写及修订：由各岗位工作人员起草，实验室主任审定，每年修订一次。注：实验过程中应严格执行标准操作程序(SOP),不得擅自修改！建立实验原始记录系统样本接收登记表（数据库）实验原始记录血清存放记录配液记录仪器设备使用记录仪器设备维修记录冰箱、孵箱、环境温度记录等填写检测结果表字迹清楚，逐项填写，不应有空缺尽量核实身份证号码实事求是

阳性复检单应盖上公章文件存档专人管理严格遵守保密制度

五、试剂、样本管理试剂要有进出登记，并妥善保存。操作人员本底样本要每年保存，阳性待送检样本的保存……（一定要有登记）。阴性样本目前没有规定保存多久。六、污染物的处理应按照《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2004）和消毒技术规范（2002版）处置实验室废弃物。艾滋病实验室所产生的所有废弃物，包括不再需要的样品、培养物和其他物品，均应视为感染性废弃物，应置于专用的密封防漏容器中，安全运至消毒室，经高压消毒后再进行处理废弃。艾滋病检测实验室常用的消毒方法1、物理消毒：高压蒸汽消毒，121℃，保持15～20min;2、化学消毒：1）、含氯消毒剂（次氯酸钠，含有效氯2000～5000mg/L；2）、75%乙醇3）、2%戊二醛3、实验室物品常用的消毒方法：1）、废弃物缸：5000mg/L次氯酸钠；2）、生物安全柜台面和仪器表面：75%乙醇；3）、溢出物：5000mg/L次氯酸钠4）、污染的台面和器具：2000mg/L次氯酸钠，也可以用过氧化氢或过氧乙酸。器械可用2%戊二醛消毒。样本管理六、质量管理

质量管理的必要性和重要性？六、质量管理要点1、思路要清晰一个样本从来到实验室到报告的发放都要有据可寻——“溯源”。2、保证生物安全后就该考虑结果的准确性。3、多学习《全国艾滋病检测技术规范》4、参加职能考核和能力验证（PT）质量管理体系（质控）包括质量保证（QA）质量控制（QC）室间质量评价（EQA）实验室质量保证实验室的全部效能和声誉依赖于其工作质量：工作人员的技术能力；试剂盒和仪器的质量；标本条件；操作中的对照；数据的解释；结果的描述。质量控制定义质量控制是指为确保实验工作正常进行而在每一次实验过程中必须采取的各种措施。质量控制的目的可以了解本次实验是否有效。所有试验条件是否正常最终结果是否可靠。实验室质量控制的基本要求样品的质量规范化操作试剂做好实验的内、外部对照质量控制内部对照质控血清（试剂盒的对照）外部质控血清的来源和选择通过实验室制备获得（比较经济的方法）通过向有关机构购买获得外部对照质控血清的保存外部对照质控血清的作用以及质量要求1、每一次实验必须使用外部对照质控血清，其作用是监控实验的重复性和稳定性，同时可以了解各批试剂盒的批间或孔间差异，绘制质孔图2、质控物的管间或瓶间变异必须小于监测系统预期变异（cv<20％），并且质控物的成份应在稳定状态中。质控物应无菌，并不含有影响ELISA反应的防腐剂。质控品的制备——选择稀释浓度用本室常用的一种或两种试剂对制备好的梯度样本进行检测，得出S/CO值选择S/CO值结果为3-5的稀释浓度做为该种试剂外部质控品的配备浓度。质控品的制备——制备和分装按照选