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全自动还原糖测定仪说明书山东省科学院生物中心地址:中国·济南市科院路19号电话:(0531)8260574282605322传真:(0531)82965634邮编:250014电子邮箱:swdz@感谢您选用由山东省科学院生物中心研制、获得国家发明专利的“全自动还原糖测定仪”。本技术是根据费林试剂测定原理设计而成的全自动测定仪。测定的各种条件由计算机控制,操作者只需用移液器将微量样品注入反应池即可全自动完成测定过程,自动显示和打印结果,操作简单,使用方便,测定周期短,准确度高。一、基本原理斐林试剂是一种氧化剂,由甲、乙液组成。测定时一定量的甲、乙液混合,首先形成氢氧化铜,然后形成酒石酸钾铜络合物。次甲基蓝作为滴定终点指示剂,在氧化溶液中呈蓝色,被还原后呈无色。用标准还原糖滴定时,还原糖首先使铜还原,至铜被还原完毕,糖才使次甲基蓝还原成无色,即为滴定终点。在滴定过程中,溶液颜色逐渐变化:蓝色→深蓝色→浅蓝色→紫红色→淡紫红色→在终点时突然变化至无色透明。用特定波长的光电转换装置,检测滴定过程中透光率的变化(见图1)。根据电压变化曲线由仪器控制系统自动记录、采样、确定滴定终点。根据终点时消耗标准还原糖的量,由控制系统自动计算出样品中的还原糖含量,并显示和打印结果。滴定过程的电信号变化及控制原理如下:图2、自动控制系统样器手工排出气泡;标准葡萄糖泵按复位Ⅱ实现复位,卸下进样器手工排出气泡。(四)标准试剂:斐林甲液:硫酸铜(CuSO4•5H2O)35.0g,1%次甲基蓝溶液5.0ml,共溶后定容至1000ml。斐林乙液:氢氧化钠(NaOH)126.4g,酒石酸钾钠(C4H4O6KNa•4H2O)117.0g,亚铁氰化钾(K4F4(CN)6•3H2O)9.4g,以水共溶后定容至1000ml。100g/L标准无水葡萄糖(C6H12O6)溶液。以上试剂按比例调配后使用。(五)试剂准备1甲液:将标准试剂中的费林甲液按(1:2)稀释即可。2乙液:将标准试剂中的费林乙液按(1:1)稀释即可。31%标准葡萄糖溶液:准确称取5.000g烘干葡萄糖,溶解并加入2.5ml盐酸,定容至500ml。4100g/L标准葡萄糖溶液:精确称取50.5%标准葡萄糖溶液:吸取上述10%标准葡萄糖溶液50ml,加水稀释定容至1000ml。6参照上条配制0.2%、0.4%、3%、5%等标准葡萄糖溶液。7根据待测液浓度范围,可选定费林甲乙液的稀释比例。(六)泵管联接1蠕动泵1左端口接蒸馏水瓶。2蠕动泵2右端口接废液瓶。3双柱塞泵端入口分别接甲乙液试剂瓶。4单柱塞泵端入口接滴定糖瓶。(七)注意事项1仪器使用稳压电源。2仪器使用两周后反应池要清洗,用清洗液浸泡二分钟,再用注射器排出。3谨防反应液溅出。4反应池装好后请勿转动,谨防漏液。5正确使用移液器。特别注意:经常检查试剂瓶,及时添加试剂以免管道进入气泡,影响测定结果的准确度。附:装机清单:1还原糖测定仪一台2备用管道一套3微量进样器一个4使用说明书一本仪器如有改型,恕不另外通知四、问题及处理措施出现问题检查项目处理措施开机无反应检查电源线、保险管连接好电源线,保持保险管完好。反应池加热不停检查温度控制器、反应池右耳连接好温度控制器插头、反应池右耳旋紧反应时间显示为99秒检查甲乙液、注射器、连接管道保持试剂瓶液面高度,注射器、管道内无气泡、破损测定值漂移检查注射器、连接管道,搅拌转子、光源保持注射器、连接管道无气泡、破损,搅拌转子、光源工作正常。打印机不走纸检查打印机、打印纸更换打印纸如遇其他问题,请与本中心技术人员联系五、主要性能指标:1、电源:220V50Hz2、主机大小:485×390×20cm(L×W3、重量:22.5Kg4、灵敏度:0.01%RG5、线形范围:0—1.0%RG(可根据需要设定)6、测定周期:<4分钟7、抗干扰能力强,不受样品颜色和浊度的影响,适合于发酵液、糖化液;8、测定成本低,试剂消
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