骨髓组织印片检查在淋巴瘤骨髓浸润诊断中的应用

骨髓组织印片检查在淋巴瘤骨髓浸润诊断中的应用

肿瘤是常见的血液系统肿瘤之一，其发病率往往随年龄的增长而增加，其预后与临床前期密切相关。16%~75%淋巴瘤Ⅳ期患者有骨髓侵犯,临床常用检测骨髓侵犯方法是骨髓穿刺涂片,但此方法仅限于细胞学观察,检出率低,易漏诊。由于骨髓侵犯与否影响着淋巴瘤的临床分期、预后判断和治疗策略,为此,本研究比较骨髓涂片、骨髓组织切片及骨髓组织印片3种检测方法,评价骨髓组织印片在淋巴瘤骨髓浸润中的诊断价值。1数据和方法1.1组织学检查情况收集2009年9月~2011年10月同步骨髓涂片、印片和切片检查的初诊的淋巴瘤患者50例,其中男31例,女19例;年龄6~71岁,中位年龄43岁,所有患者均经淋巴结活检病理学检查证实。50例患者中,霍奇金淋巴瘤(Hodgkinlymphom,HL)11例,非霍奇金淋巴瘤(nonHodgkinlymphom,NHL)39例。1.2方法1.2.1骨髓组织切片染色从髂前(后)上棘局麻后取材。骨髓涂片:抽吸骨髓液0.1mL直接涂片,干燥后作瑞-姬染色。骨髓组织切片:用骨髓活检针取骨髓组织长0.5~1cm,将骨髓组织置于玻片中央,轻轻滚动骨髓组织,制片2~3张,干燥后作瑞-姬染色。骨髓组织印片:将骨髓组织用Bouin固定液固定1h,乙醇梯度脱水,浸透包埋,切片厚约4μm,用Giemsa染色后镜检。1.2.2骨髓组织印片和涂片的符合率观察有核细胞量评估:将骨髓有核细胞分为五个等级,骨髓增生极度活跃、骨髓增生明显活跃、骨髓增生活跃、骨髓增生减低、骨髓增生极度减低。骨髓组织印片和涂片于镜下多视野观察,以切片有核细胞数量分级为标准,比较印片和涂片的符合率。骨髓组织印片和骨髓涂片均全片观察,并分类计数500有核细胞,计算淋巴瘤百分比。1.3统计处理应用SPSS17.0统计软件进行处理,两样本率的比较采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。2骨髓切片、印片与切片的检查淋巴瘤骨髓涂片、骨髓组织切片及骨髓组织印片结果见图1。以骨髓切片细胞量变化为标准,NHL骨髓有核细胞量评估骨髓印片的符合率较高。见表1。50例淋巴瘤患者骨髓切片、印片与涂片检查发现,涂片与印片骨髓浸润同时阳性有7例,其中有2例涂片阳性而印片阴性,有9例印片阳性而涂片阴性;涂片与切片同时阳性的有8例,有1例涂片阳性而切片阴性,有14例切片阳性而涂片阴性;印片与切片同时阳性的有18例,有5例切片阳性而印片阴性。见表2。印片与切片,χ2=1.83;P>0.05;印片与涂片,χ2=5.80;P>0.05;涂片与切片,χ2=10.32;0.01<P<0.05。3骨髓涂片与骨髓组织切片的检查比较淋巴瘤起源于淋巴结或淋巴组织,其发生大多与免疫应答过程中淋巴细胞增殖分化产生的某种免疫细胞恶变有关,是免疫系统的恶性肿瘤。淋巴结与淋巴组织遍布全身,淋巴液与血液在全身循环,故淋巴瘤可发生在身体的任何部位,其中骨髓是最易受累及的部位。一旦骨髓被累及即已属于淋巴瘤IV期,预后较差。因而,淋巴瘤骨髓浸润情况对判断病情发展及拟订治疗方案具有重要意义。骨髓细胞学检查是判断淋巴瘤是否骨髓浸润的最基本和最重要的检查方法之一,骨髓涂片在临床上应用较为广泛,其优点是操作简单,细胞分布均匀,对细胞形态的观察较理想,诊断迅速,但在诊断淋巴瘤骨髓浸润方面有一定的局限性,当瘤细胞比例较少时可出现阴性检测结果;另外,涂片还容易受到操作时干抽和稀释的影响,容易漏诊及不能准确判断骨髓增生程度。在本研究中,判断骨髓增生程度上骨髓涂片与骨髓组织切片相比较差异具有显著性,骨髓涂片与骨髓组织印片相比较无显著性差异,这可能与骨髓涂片受干抽和稀释因素的影响而干扰对骨髓增生程度的判断有关,尤其在骨髓有异常细胞浸润时,异常细胞之间黏附性以致于骨髓增生的病理细胞相互粘连而易发生干抽。骨髓组织切片能够提供完整的骨髓组织,显示出骨髓组织中各类细胞的密度,不受细胞塞实、骨纤维化及血液稀释的影响;总体上虽细胞结构的清晰性不如涂片,但能显示组织结构的一些特征,能很好地反应骨髓有核细胞数量,在反映骨髓的增生程度方面骨髓组织切片及印片较涂片准确可靠。骨髓穿刺涂片淋巴瘤细胞检出率明显低于骨髓组织切片及印片,骨髓组织印片与骨髓涂片比较差异有显著性;骨髓组织切片与骨髓涂片比较差异有显著性;骨髓组织切片与骨髓组织印片比较差异有显著性,由此可表明骨髓涂片虽然细胞结构的清晰,但受干抽和稀释的影响较大,不能完全明确反映骨髓的真实情况。骨髓组织活检是目前确诊淋巴瘤是否浸润骨髓的金指标,骨髓组织切片能全面了解造血细胞、脂肪细胞、骨小梁和血管的破坏程度,正确判断造血面积并保持原有的骨髓结构,较真实地反映骨髓造血状况,还能发现穿刺涂片不能发现的肉芽肿、纤维化、基质出血、水肿等病变,故可以弥补骨髓涂片的缺陷,提高检出率。但骨髓活检操作烦琐,时间比较长,容易延误病人的诊断及治疗。骨髓组织印片虽然在显示细胞结构的清晰性不如涂片,较薄的区域可与涂片同步检查做对照,可获得较好的互补效果,与骨髓组织切片一起分析还可提供细胞形态的参考,故骨髓组织印片基本上能够辨别出肿瘤细胞或异常原幼细胞的类别,可以弥补骨髓涂片及切片的不足之处。淋巴瘤患者在做骨髓检查时,骨髓涂片、骨髓组织切片及骨髓组织印片3种方法各有所长,3片联检更利于对疾病作出评估和诊断。良好的骨髓活检组织印片还显示组织结构的一些特征,不但在评估有核细胞量上优于骨髓涂片