2019土壤和沉积物醛、酮类化合物的测定

土和沉物 醛酮化合的测高液相谱法目 次前 言 ii适用范围 1规范性引用文件 1方法原理 1试剂和材料 1仪器和设备 2样品 3分析步骤 4结果计算与表示 5精密度和准确度 6质量保证和质量控制 7废物处理 7注意事项 7附录A（规范性附录）方法的检出限和测定下限 8附录B（资料性附录）15种醛、酮类腙衍生物的参考色谱图 9附录C（资料性附录）方法的精密度和准确度 10附录D（资料性附录）2,4-二硝基苯肼（DNPH）的纯化及空白检验 16i土壤和沉积物 醛、酮类化合物的测定 高效液相色谱法适用范围本标准规定了测定土壤和沉积物中醛、酮类化合物的高效液相色谱法。15种醛、酮类化合物的测定。当取样量为10g，定容体积为10ml时，15种醛、酮类化合物的方法检出限为0.02mg/kg~0.06mg/kg，测定下限为0.08mg/kg~0.24mg/kg。详见附录A。规范性引用文件GB17378.3 海洋监测规范 第3部分 样品采集、贮存与运输GB17378.5 海洋监测规范 第5部分：沉积物分析HJ494 水质 采样技术指导HJ613 土壤 干物质和水分的测定 重量法HJ/T166 土壤环境监测技术规范方法原理土壤和沉积物样品用醋酸-醋酸钠溶液振荡提取，提取液中醛、酮类化合物在一定温度pH2,4-二硝基苯肼（DNPH）发生衍生化反应，生成稳定的腙类化合物，经萃取浓缩后，用高效液相色谱分离，紫外检测器检测，根据保留时间定性，外标法定量。试剂和材料（Nal。400℃灼烧4h，稍冷后置于干燥器中冷却至室温，转移至磨口玻璃瓶中，于干燥器中保存。（NaO。400℃灼烧4h，稍冷后置于干燥器中冷却至室温，转移至磨口玻璃瓶中，于干燥器中保1存。（HOONa。（HOOH：含量≥98。（CHO。（6HNaO·2HO。2,4-二硝基苯肼[NH2NHC6H3(NO2)2，DNPH]：纯度≥99%。乙腈（H3N（H22氯化钠溶液：ρ（NaCl）=0.365g/ml。称取36.5g氯化钠(4.1)，用水溶解定容至100ml。提取剂：醋酸-醋酸钠溶液。5.3g（4.2.0ml（4.1。缓冲溶液：pH≈3。84.0g（4.和29.4g4.6500l。衍生剂：ρ（DNPH）=3.00mg/ml。称取3.00g2,4-二硝基苯肼（4.7）于乙腈（4.8）中，用乙腈溶解定容至1L。醛、酮类-DNPH标准溶液：ρ=100μg/ml（以醛、酮类化合物计。包括甲醛-DNPH-DNPH-DNPH-DNPH-DNPH-DNPH、丁醛-DNPH、苯甲醛-DNPH、异戊醛-DNPH、正戊醛-DNPH、邻-甲基苯甲醛-DNPH、间-甲基苯甲醛-DNPH、对-甲基苯甲醛-DNPH、正己醛-DNPH、2,5-二甲基苯甲醛-DNPH。溶4.醛、酮类标准贮备液：ρ=1000μg/ml。包括甲醛、乙醛、丙烯醛、丙酮、丙醛、丁烯醛、丁醛、苯甲醛、异戊醛、正戊醛、邻--2,54.。可购买市售有证标准溶液。醛、酮类标准使用液：ρ=100μg/ml。移取1.00ml醛、酮类标准贮备液（4.15）于10ml容量瓶中，用乙腈（4.8）稀释定容。4℃以下可冷藏保存2个月。4.17 0.297mm~0.84mm（50目~20目。400℃灼烧4h，稍冷后置于干燥器中冷却至室温，转移至磨口玻璃瓶中，于干燥器中保存。4.18 0.45μm。4.19 氮气：纯度≥99.9%。仪器和设备高效液相色谱仪：具紫外检测器或二极管阵列检测器。15.0μm250m4.6mm，或其他等效色谱柱。260ml具聚四氟乙烯-硅胶衬垫螺旋盖的棕色广口玻璃瓶。振荡器：水平振荡器或翻转振荡器。恒温振荡器：温度精度为±2℃。萃取设备：固相萃取装置或液液萃取装置。浓缩设备：旋转蒸发装置、K-D浓缩仪或氮吹浓缩仪等性能相当的设备。0.01g。固相萃取柱：C181000mg/6ml或更大容量规格。分液漏斗：250ml，聚四氟乙烯活塞或不涂润滑油的玻璃活塞。提取瓶：200ml，具聚四氟乙烯-硅胶衬垫螺旋盖的玻璃瓶。平底烧瓶：200ml，具塞平底玻璃烧瓶。一般实验室常用仪器和设备。样品样品采集和保存按照HJ/T166的相关规定进行土壤样品的采集和保存。按照HJ494的相关规定进行水体沉积物样品的采集。按GB17378.3的相关规定进行海洋沉积物样品的采集。用铁铲或不锈钢勺将样品尽快采集至样品瓶（5.3）中，并填满。快速清除掉样品瓶螺4d7d内分析完毕。样品的制备（，称取10g（精确到0.01）（5.）中。同时称取另一份样品用于测定干物质含量或含水率。水分的测定按照HJ613测定土壤样品干物质含量，按照GB17378.5测定沉积物样品含水率。试样的制备提取（6.200l4.15.4中18h，用玻璃纤维滤膜（4.18）过滤，收集提取液，待衍生。衍生取100ml6.4.5.1中，加入4ml（4126ml衍生剂4.35.5中，401h。注：可使用可控温超声清洗器或超声萃取仪代替恒温振荡器，超声时间不少于30min，超声温度不超过40℃±2℃。3萃取和浓缩固相萃取法10ml10ml64.2中加入10ml4.13ml/min~5ml/min10ml1min。用9ml乙腈（4.8）3ml/min~5ml/min10ml容量瓶中，用乙腈（4.8）稀释至标线，混匀，待测。液液萃取法将衍生后的溶液（6..2）转移至分液漏斗（5.10）中，加入1.5gNal（4.1，分别用15ml10ml脱水，5.74.810l，混匀，待测。注：高浓度样品可适当增加一次萃取。空白试样的制备以石英砂（4.17）代替样品，按照与试样的制备（6.4）相同的步骤进行空白试样的制备。分析步骤参考色谱条件流动相：60%乙腈+40%水，等度洗脱，保持30min；检测波长：360nm；流动相流速：1.0ml/min；柱温：30℃；进样量：10μl。标准曲线的建立DNPH4.1（4.0.03mg/L0.05mg/L0.10mg/L0.50mg/L1.00mg/L1.50mg/L谱条件（7.1）进行测定，以标准系列目标化合物浓度为横坐标，以其对应的峰面积或峰高为纵坐标，建立标准曲线。参考色谱图15种醛、酮类腙衍生物在C18柱（5.2）上的色谱图见图1。注：其他不同类型色谱柱分离情况参见附录B。41甲醛-P2乙醛-P3丙烯醛-P4丙酮-P5丙醛-P6.-P7.丁醛-P；8.苯甲醛异戊醛正戊醛邻-甲基苯甲醛间-甲基苯甲醛-DNPH；13.对-甲基苯甲醛-DNPH；14.正己醛-DNPH；15.2,5-二甲基苯甲醛-DNPH。图1 15种醛、酮类腙衍生物的参考色谱图试样测定按照与标准曲线的建立（7.2）相同的步骤进行试样（6.4）的测定。空白试验按照与试样测定（7.4）相同的步骤进行空白试样（6.5）的测定。结果计算与表示定性分析结果计算土壤样品的结果计算土壤样品中的目标物含量w，按照公式（1）进行计算。wVV1mWdmV2

（1）式中：w——样品中目标化合物含量，mg/kg；——由标准曲线计算所得试样中目标化合物质量浓度，mg/L；V——试样定容体积，ml；V1——提取剂体积，ml；V2——提取液取样体积，ml；m——样品称取量，g；Wdm——样品干物质含量，%。5沉积物样品的结果计算沉积物样品中的目标物含量w，按照公式（2）进行计算。w mWV2

（2）式中：w——样品中目标化合物含量，mg/kg；——由标准曲线计算所得试样中目标化合物质量浓度，mg/L；V——试样定容体积，ml；V1——提取剂体积，ml；V2——提取液取样体积，ml；m——样品称取量，g；W——样品含水率，%。结果表示测定结果小数点后位数的保留与方法检出限一致，最多保留3位有效数字。注：间-甲基苯甲醛-DNPH和对-甲基苯甲醛-DNPH为难分离物质对，当色谱柱不能将二者分离时，测定结果为难分离物质对之和。精密度和准确度精密度0.20mg/kg0.50mg/kg2.00mg/kg的土壤样品进行6次重复测定，实验室内相对标准偏差分别为：4.8%~29%4.3%~33%，0.20%~29%分别为：0.05mg/kg~0.09mg/kg，0.14mg/kg~0.22mg/kg，0.37mg/kg~0.72mg/kg；再现性限分别为：0.07mg/kg~0.10mg/kg，0.18mg/kg~0.25mg/kg，0.66mg/kg~0.90mg/kg。0.20mg/kg0.50mg/kg2.00mg/kg的沉积物样品进行6次重复测定，实验室内相对标准偏差分别为：2.8%~32%，2.5%~29%，1.7%~22%；实验室间相对标准偏差分别为：7.9%~21%，11%~19%，6.7%~21%；重复性限分别为：0.05mg/kg~0.09mg/kg，0.10mg/kg~0.25mg/kg，0.33mg/kg~0.65mg/kg；再现性限分别为：0.07mg/kg~0.11mg/kg，0.15mg/kg~0.38mg/kg，0.47mg/kg~1.02mg/kg。精密度结果参见附录C。准确度六家实验室分别对醛、酮类化合物加标浓度为0.20mg/kg、0.50mg/kg、2.00mg/kg的土壤样品进行6次重复测定，加标回收率范围分别为：43.5%~101%、41.5%~99.0%、42.0%~104%，加标回收率最终值分别为：56.3%±19.0%~87.0%±20.4%、51.2%±21.4%~77.2%±35.2%、50.8%±26.6%~88.7%±14.8%。六家实验室分别对醛、酮类化合物加标浓度为0.20mg/kg、0.50mg/kg、2.00mg/kg的6沉积物样品进行6次重复测定，加标回收率范围分别为：46.3%~112%、40.8%~112%、41.3%~116%，加标回收率最终值分别为：54.5%±15.4%~91.2%±30.4%、47.9%±22.8%~90.5%±26.2%、45.2%±20.6%~94.7%±32.0%。准确度结果参见附录C。质量保证和质量控制每批样品至少分析一个实验室空白，其目标物的测定结果应低于方法检出限。标准曲线相关系数应≥0.999，否则应重新进行校准。20个样品或每批次（20个样品/批）1个标准曲线中间浓度点，其测定值与标准值相对误差在±20%之内，否则应重新绘制标准曲线。20个样品或每批次（20个样品/批）1个平行样，平行样测定结果相对偏差应≤45%。20个样品或每批次（20个样品/批）1个基体加标样，醛类化合物45%~120%40%~100%之间。废物处理实验中产生的废物应集中收集分类保管，并送具有资质的单位统一处置。注意事项1302h~3h。不得用丙酮、甲醇或乙醇清洗玻璃器皿，以免对测定造成干扰。DNPHD。7附录A（规范性附录）方法的检出限和测定下限表A.1给出了目标物的方法检出限和测定下限。表A.1方法检出限和测定下限序号组分名称英文名称化学登记号检出限(mg/kg)测定下限(mg/kg)1甲醛Formaldehyde50-00-00.020.082乙醛Acetaldehyde75-07-00.040.163丙烯醛Acrolein107-02-80.040.164丙酮Actone67-64-10.040.165丙醛Propanal(Propionaldehyde)123-38-60.040.166丁烯醛Crotonaldehyde123-73-90.040.167丁醛Butanal(Butyraldehyde)123-72-80.040.168苯甲醛Benzaldehyde100-52-70.060.249异戊醛Isovaleraldehyde590-86-30.060.2410正戊醛Pentanal(Valeraldehyde)110-62-30.060.2411邻-甲基苯甲醛o-Tolualdehyde529-20-40.050.2012间-甲基苯甲醛m-Tolualdehyde620-23-50.060.2413对-甲基苯甲醛p-Tolualdehyde104-87-00.060.2414正己醛Hexanal(Hexaldehyde)66-25-10.060.24152,5-二甲基苯甲醛2,5-Dimethylbenzaldehyde5779-94-20.060.248附录B（资料性附录）15种醛、酮类腙衍生物的参考色谱图图B.1~B.2给出了不同色谱柱在相应色谱分离条件下的参考色谱图。5.02504.6mm。流动相：乙腈/1.5ml/min，梯度洗脱，60%8min，8min~18min内60%70%，18min~25min70%80%，25min~26min内80%60%5min。.甲醛-P2乙醛-P3丙烯醛-P4丙酮-P5丙醛-P6.-P7.丁醛-P；8.苯甲醛异戊醛正戊醛邻-甲基苯甲醛间-甲基苯甲醛-DNPH；13.对-甲基苯甲醛-DNPH；14.正己醛-DNPH；15.2,5-二甲基苯甲醛-DNPH。图B.1 色谱柱1参考色谱图色谱柱25.0μm250mm4.6mm。流动相：乙腈/1.5ml/min，梯度洗脱，60%8min，8min~18min内60%70%，18min~25min70%80%，25min~26min内80%60%5min。.甲醛-P2乙醛-P3丙烯醛-P4丙酮-P5丙醛-P6.-P7.丁醛-P；8.苯甲醛异戊醛正戊醛邻-甲基苯甲醛间-甲基苯甲醛-DNPH；13.对-甲基苯甲醛-DNPH；14.正己醛-DNPH；15.2,5-二甲基苯甲醛-DNPH。图B.2 色谱柱2参考色谱图9附录C（资料性附录）方法的精密度和准确度表C.1和表C.2给出了方法的重复性限、再现性限和加标回收率等精密度和准确度指标。表C.1 方法的精密度汇总表序号化合物名称样品类型加标浓度（mg/kg）均值（mg/kg）实验室内相对标准偏差（%）实验室间相对标准（%）重复性限r（mg/kg）再现性限1甲醛土壤0.200.175.9~25100.090.100.500.434.8~288.40.190.202.001.780.20~296.60.570.86沉积物0.200.176.2~27110.090.100.500.455.8~24120.250.272.001.903.1~12120.370.692乙醛土壤0.200.165.5~24180.080.090.500.385.0~26100.170.182.001.565.1~298.50.630.68沉积物0.200.178.8~29170.090.110.500.426.5~22120.170.212.001.834.2~12120.430.713丙烯醛土壤0.200.139.6~22150.060.080.500.347.1~26140.140.192.001.414.3~26180.710.89沉积物0.200.157.4~297.90.080.100.500.335.4~18120.120.152.001.451.7~22140.650.704丙酮土壤0.200.127.0~28130.050.070.500.268.5~27160.150.182.001.022.3~24200.370.66沉积物0.200.114.4~32110.060.070.500.242.5~23170.130.162.000.914.7~16170.330.535丙醛土壤0.200.146.3~23120.060.070.500.376.8~316.40.220.212.001.625.2~277.10.720.72沉积物0.200.174.6~13120.050.070.500.413.5~29120.190.2210序号化合物名称样品类型加标浓度（mg/kg）均值（mg/kg）实验室内相对标准偏差实验室间相对标准（%）重复性限r（mg/kg）再现性限2.001.891.7~12140.380.826丁烯醛土壤0.200.144.8~20200.060.090.500.345.1~21200.150.252.001.422.0~25180.550.86沉积物0.200.164.7~29150.070.090.500.375.5~27170.180.212.001.583.7~20180.640.997丁醛土壤0.200.145.8~20190.050.080.500.367.5~22150.170.222.001.562.1~20140.530.76沉积物0.200.172.8~17200.050.100.500.405.4~22170.240.382.001.782.4~14210.361.028苯甲醛土壤0.200.146.5~22180.060.090.500.369.6~26170.200.242.001.562.3~26150.680.88沉积物0.200.186.1~27140.090.110.500.407.7~25120.140.212.001.766.1~148.60.560.619异戊醛土壤0.200.156.9~18180.050.090.500.378.0~23150.160.212.001.504.4~18130.510.70沉积物0.200.174.8~21120.080.090.500.405.7~17150.120.202.001.772.7~126.70.370.4710戊醛土壤0.200.145.7~18120.050.070.500.378.3~25170.180.252.001.524.8~23140.630.83沉积物0.200.166.2~21180.050.090.500.392.9~13150.100.182.001.783.3~109.40.350.5311邻-甲基苯甲醛土壤0.200.155.0~20180.070.090.500.385.8~18140.150.202.001.615.0~23150.680.90沉积物0.200.175.5~26180.070.090.500.406.5~21190.160.2311序号化合物名称样品类型加标浓度（mg/kg）均值（mg/kg）实验室内相对标准偏差实验室间相对标准（%）重复性限r（mg/kg）再现性限2.001.767.3~148.20.530.6112间-甲基苯甲醛土壤0.200.145.3~21200.070.100.500.365.2~27180.160.232.001.634.3~15150.480.83沉积物0.200.166.9~27110.070.080.500.387.5~18140.150.202.001.686.2~19120.580.7113对-甲基苯甲醛土壤0.200.154.8~24140.070.090.500.408.2~25160.160.212.001.645.2~18120.520.72沉积物0.200.164.8~24210.050.100.500.407.0~21110.180.192.001.697.6~20120.640.7914己醛土壤0.200.146.9~17140.050.070.500.367.5~33150.190.222.001.495.5~21130.570.76沉积物0.200.164.9~25180.060.090.500.395.0~15140.120.192.001.673.7~12110.420.62152,5-二甲基苯甲醛土壤0.200.156.3~29130.070.080.500.404.3~20180.150.242.001.664.4~18120.550.71沉积物0.200.174.1~27110.060.080.500.414.6~15120.140.182.001.834.2~17150.510.9112表C.2 方法的准确度汇总表序号化合物名称样品类型加标浓度（mg/kg）加标回收率范围（%）（%）（%）（%）1甲醛土壤0.2079.0~10187.010.287.0±20.40.5076.7~98.785.68.885.6±17.62.0078.1~10088.77.488.7±14.8沉积物0.2074.1~98.386.512.586.5±25.00.5081.2~11290.513.190.5±26.22.0080.7~11094.512.194.5±24.22乙醛土壤0.2055.3~94.379.516.279.5±32.40.5066.3~89.476.210.076.2±20.02.0064.0~88.378.98.778.9±17.4沉积物0.2061.2~96.983.715.783.7±31.40.5061.7~96.183.512.783.5±25.42.0074.2~10491.315.091.3±30.03丙烯醛土壤0.2050.7~75.665.612.865.6±25.60.5056.7~84.667.510.667.5±21.22.0053.3~89.870.415.170.4±30.2沉积物0.2060.4~93.872.613.072.6±26.00.5051.2~76.666.29.366.2±18.62.0052.4~83.572.312.572.3±25.04丙酮土壤0.2043.5~66.956.39.556.3±19.00.5041.5~64.751.210.751.2±21.42.0042.0~64.450.813.350.8±26.6沉积物0.2046.3~65.954.57.754.5±15.40.5040.8~64.347.911.447.9±22.82.0041.3~59.645.410.345.2±20.65丙醛土壤0.2060.8~81.669.310.069.3±20.00.5065.3~81.474.76.674.7±13.22.0070.9~94.281.27.981.2±15.8沉积物0.2070.7~10087.012.787.0±25.40.5064.7~90.182.010.482.0±20.82.0074.8~10694.716.094.7±32.06丁烯醛土壤0.2056.0~89.371.117.671.1±35.20.5049.7~99.077.217.677.2±35.22.0050.9~88.771.016.771.0±33.4沉积物0.2064.5~10281.416.481.4±32.80.5052.3~96.073.315.873.3±31.613序号化合物名称样品类型加标浓度（mg/kg）加标回收率范围（%）（%）（%）（%）2.0063.4~10878.716.978.7±33.87丁醛土壤0.2058.3~88.369.316.269.3±32.40.5061.3~90.072.715.072.7±30.02.0068.2~92.477.812.877.8±25.6沉积物0.2064.3~10682.218.382.2±36.60.5047.0~10680.823.380.8±46.62.0058.2~10288.919.288.9±38.48苯甲醛土壤0.2052.7~84.870.415.870.4±31.60.5053.2~92.972.016.172.0±32.22.0062.6~96.577.913.877.9±27.6沉积物0.2067.2~11291.215.291.2±30.40.5064.3~97.280.111.280.1±22.42.0078.2~10187.89.287.8±18.49异戊醛土壤0.2057.1~93.372.516.672.5±33.20.5060.5~95.674.214.474.2±28.82.0060.6~84.774.910.274.9±20.4沉积物0.2065.0~10684.813.784.8±27.40.5065.6~88.483.812.983.8±25.82.0077.3~94.788.38.188.3±16.210戊醛土壤0.2061.3~81.571.311.571.3±23.00.5060.3~95.476.115.576.1±31.02.0058.7~89.976.212.876.2±25.6沉积物0.2064.5~10479.118.979.1±37.80.5068.0~93.378.313.078.3±26.02.0079.0~10189.19.889.1±19.611邻-甲基苯甲醛土壤0.2061.9~97.274.917.474.9±34.80.5063.5~87.575.01