《细胞生物学》-细胞2章 细胞生物学研究方法雨课堂23

前测题2.显微镜的分辨率与放大倍数无关（）2.显微镜的分辨率与放大倍数无关（）√×AB提交单选题10分Chapter2.TechniquesinCellBiologyPreparatoryobserve

putforwardtheoreticsDesigncontroltestsCollectdataExplainresultsDeviseconclusion

Refertoknowledge

本章内容提要第一节细胞形态结构的观察方法第二节细胞及其组分的分析方法第三节细胞培养与细胞工程第四节细胞及生物大分子的动态变化第五节模式生物与功能基因组的研究第一节细胞形态结构的观察方法一、光学显微镜(lightmicroscopy)

二、电子显微镜(Electromicroscopy)三、扫描隧道显微镜(scanningtunnelingmicroscope)几种显微镜可观察的样品大小（箭头之间的范围）及其分辨能力（右侧箭头所指位置）分辨率(resolution)：能区分开两个质点间的最小距离眼睛、光学显微镜和电子显微镜的分辨率分别为：0.2mm、0.2μm和0.2nm一、光学显微镜(lightmicroscopy)（一）、普通复式光学显微镜（二）、相差显微镜和微分干涉显微镜（三）、荧光显微镜（四）、激光扫描共焦显微镜（一）、普通复式光学显微镜普通光学显微镜成像示意图光学显微镜（最大分辨率为0.2µm），主要由三部分组成：①光学放大系统，即目镜和物镜；②照明系统，包括光源和聚光镜③镜架及样品调节系统。放大倍数：目镜的放大倍数х物镜的放大倍数随堂练习1.关于光镜的使用，下列正确的是（）A.观察标本时，应双眼同时睁开，双手并用B.按照从低倍镜到高倍镜到油镜的顺序进行操作C.使用油镜时，需在标本上滴香柏油，将聚光器降至最低，光圈关至最小D.使用油镜时，不可一边在目镜中观察，一边下降镜筒或上升载物台1.关于光镜的使用,下列正确的是()观察标本时,应双眼同时睁开,双手并用A按照从低倍镜到高倍镜到油镜的顺序进行操作B使用油镜时,需在标本上滴香柏油,将聚光器降至最低,光圈关至最小C使用油镜时,不可一边在目镜中观察,一边下降镜筒或上升载物台D提交多选题10分决定光学显微镜的分辨率（resolution）的要素

D＝0.61λ∕［N·sin(α/2］D:分辨率λ：入射光的波长(最短400nm)N：介质的折射率（1或1.5）α：物镜的镜口角(最大140°）生物样品的制备过程：①固定：可使生物大分子交联，蛋白质成分凝固，防止细胞自溶和破坏而产生人工假象。常用固定剂：甲醛、戊二醛、乙醇②包埋：为了便于切片，防止样品移位常用包埋剂：石蜡③切片：由于生物样品太厚，不能直接用光镜观察，需切成1-10µm的薄片④细胞不同成分的选择性染色细胞总重量的70%是水，对可见光来说几乎是透明的，因此未经处理的细胞在普通光镜下几乎是看不见的，为使细胞成为可见的常用方法就是染色。常用的染料：苏木素对负电荷分子有亲和力，可显示细胞内核酸的分布(蓝紫色）；伊红可使细胞质染色（红色）。石蜡切片的制备程序随堂练习3.标本常用的固定液为（）A.20%甲醛B.40%甲醛C.10%福尔马林D.20%福尔马林E.75%酒精3.标本常用的固定液为()20%甲醛A40%甲醛B10%福尔马林C20%福尔马林D75%酒精E提交单选题10分随堂练习4.切片的常规染色方法是（）A.苏木素染色B.伊红染色C.瑞氏染色D.巴氏染色E.苏木素-伊红染色 4.切片的常规染色方法是()苏木素染色A伊红染色B瑞氏染色C巴氏染色D苏木素-伊红染色E提交单选题10分

（二）、相差显微镜和微分干涉显微镜

只有光线通过染色的标本时其波长、振幅发生变化，人眼才能看见，但活细胞和未染色的标本由于光波长和振幅不发生变化，人眼看不到，但其相位有变化，因此利用光的干涉和衍射效应把透过标本不同区域的光波程差转变成振幅差，使细胞内各种结构之间呈现清晰可见的明暗对比。两束光波之间的相互干涉A：相位相同时B:相位相反时

（二）、相差显微镜和微分干涉显微镜

相差显微镜（phase-contrastmicroscope）：

一种将相位差转变成振幅差（明暗差）的显微镜，可观察不染色的活细胞。

微分干涉显微镜（differential-interferencemicroscope）

一种将样品厚度上的微小区别转化成明暗区别相差显微镜。相差显微镜相差显微镜比普通光镜多了2个部件：（1）在聚光器上增加一个环形光阑（annulardiaphragm）：位于光源与聚光器之间（一个光圈，只有光圈的能透过，其他地方的光都被挡住了）（2）在物镜后焦面增加一个相板（annularphaseplate）：

，相板上有一个环形区，通过环形区的光比从其他区域透过的光超前或滞后1/4λ，这样就使通过标本不同区域光波的相位差转变为振幅差。

相差显微镜可观察活细胞的各种运动，如细胞迁移、分裂、运动等。甚至研究细胞核、线粒体等细胞器的动态。

体外培养的MDCK细胞的图像A：普通显微镜所拍B：相差显微镜所拍随堂练习5.关于相差显微镜的叙述，下列正确的是（）A.用于观察活细胞和未染色的生物标本B.细胞各部分细微结构的折射率和厚度不同，光波通过时，波长和振幅并不发生变化，仅相位发生变化（振幅差），这种振幅差肉眼无法观察C.相差显微镜通过改变相位差，并利用光的衍射和干涉现象，把相位差变为振幅差来观察活细胞和未染色的标本D.可以用于超微结构的观察5.关于相差显微镜的叙述,下列正确的是()用于观察活细胞和未染色的生物标本A细胞各部分细微结构的折射率和厚度不同,光波通过时,波长和振幅并不发生变化,仅相位发生变化(振幅差),这种振幅差肉眼无法观察B相差显微镜通过改变相位差,并利用光的衍射和干涉现象,把相位差变为振幅差来观察活细胞和未染色的标本C可以用于超微结构的观察D提交多选题10分微分干涉显微镜微分干涉显微镜用的是偏振光，偏振光经合成后，使样品中厚度上的微小区别转化成明暗区别，增加了样品反差且具有立体感。适于研究活细胞中较大的细胞器。1952年，Nomarski发明，利用两组平面偏振光的干涉，加强影像的明暗效果，能显示结构的三维立体投影。标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强硅藻（三）、荧光显微镜（fluorescencemicroscopy）

细胞中有些物质，如叶绿素等，受紫外线照射后发出可见光线，称为荧光；自发荧光：由细胞本身存在的物质经紫外线照射后发出的荧光。诱发荧光：另有一些物质本身虽不能发荧光，但如果用荧光染料（酸性品红、甲基绿、吖啶橙等荧光色素）或荧光抗体染色后，经紫外线照射亦可发荧光，这种荧光叫诱发荧光。荧光显微镜可对这类物质进行定性和定量研究。光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜。是目前在光镜水平用于特异蛋白质等生物大分子的定性定位最有力的工具。荧光显微镜技术主要是用于检测细胞上的特异荧光材料，与普通光学显微镜不同的是荧光显微镜增加了两套滤光片。第一套称为激发光滤片，装在光源和样品之间，只有那些能激发荧光材料发光的特定波长的光才能通过。第二套称为阻断滤片，装在物镜和目镜之间，只让染料所发出的荧光通过。在黑暗背景的衬托下，发出荧光的样品很容易被观察。

不同荧光素所需激发波长与所产生的荧光波长比较在有丝分裂中期中，纺锤体微管呈绿色中期染色体呈蓝色原纤维状蛋白呈红色利用GFP进行的蛋白质的

基因工程化改造随堂练习6.绿色荧光蛋白GFP（GreenFluorescentProtein）基因与目的基因融合后，转入细胞后可以（）A.检测融合蛋白质在细胞中的准确定位B.检测目的基因所编码的蛋白在细胞中的含量C.检测目的基因所编码的蛋白在细胞中的分子结构D.检测目的蛋白质在细胞中的表达量6.绿色荧光蛋白GFP(GreenFluorescentProtein)基因与目的基因融合后,转入细胞后可以()检测融合蛋白质在细胞中的准确定位A检测目的基因所编码的蛋白在细胞中的含量B检测目的基因所编码的蛋白在细胞中的分子结构C检测目的蛋白质在细胞中的表达量D提交多选题10分（四）、激光扫描共焦显微镜

(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM)

用激光作光源，逐点、逐行、逐面快速扫描。能显示细胞样品的立体结构。分辨力是普通光学显微镜的3倍。用途类似荧光显微镜，但能扫描不同层次，形成立体图像。激光扫描共焦显微镜的原理图激光束经双色镜反射后，通过物镜汇聚到样品某一焦点；从焦点发射的荧光经透镜汇聚成像，被检测器检出；样品其他部位发射的荧光不会聚焦成像，因而检测器不能检出。荧光显微镜（A）和激光扫描共焦显微镜（B）所观察图像的比较随堂练习7.关于激光扫描共焦显微镜的叙述，错误的是（）A.共焦点是指物镜和聚光镜同时聚焦到一个小点B.可以自动改变观察的焦平面而且纵向分辨率得到改善C.可以通过光学切片观察样品的内部结构，并可重构三维图像D.相比普通荧光显微镜分辨率提高50倍7.关于激光扫描共焦显微镜的叙述,错误的是()共焦点是指物镜和聚光镜同时聚焦到一个小点A可以自动改变观察的焦平面而且纵向分辨率得到改善B可以通过光学切片观察样品的内部结构,并可重构三维图像C相比普通荧光显微镜分辨率提高50倍D提交单选题10分二、电子显微镜(Electromicroscopy)（一）、电子显微镜的基本知识

1.电子显微镜与光学显微镜的基本区别

2.电子显微镜的分辨本领与有效放大倍数

3.电子显微镜的基本构造（二）、主要电镜制样技术

1.超薄切片技术

2.负染色技术

3.冷冻蚀刻技术

4.电镜三维重构与低温电镜技术

5.扫描电镜技术（一）、电子显微镜的基本知识1.电子显微镜与光学显微镜的基本区别2.电子显微镜的分辨本领与有效放大倍数3.电子显微镜的基本构造1.电子显微镜与光学显微镜的基本区别2.电子显微镜的分辨本领与有效放大倍数光学显微镜的分辨率为0.2μm左右，其放大倍数为0.2mm/0.2μm，即1000倍电子显微镜的分辨率可达0.2nm，其放大倍数为106倍上述放大倍数称之为有效放大倍数电镜的分辨本领:是指电镜处于最佳状态下的分辨率电镜的实际分辨率常常受到生物制样技术本身的限制电子显微镜的基本结构（A）和成像原理（B）3.电子显微镜的基本构造电镜的基本构造包括：①电子束照明系统；②电磁透镜成像系统；③真空系统；④记录系统；4、1932年Ruska制备第一台电子显微镜。1935年法国的卡诺尔提出扫描电镜的设计思想和工作原理。1942年剑桥大学的马伦首次制成世界第一台扫描电镜5、分类：透射电镜（TransmissionelectronMicroscope,TEM）扫描电镜（ScanningelectronMicroscope,SEM）（二）、主要电镜制样技术1.超薄切片技术：切片厚度一般仅为40～50nm2.负染色技术：用重金属盐对电镜样品进行染色的技术，使得重金属盐沉积在样品周围，而样品不被染色，从而衬托出样品的精细结构。3.冷冻蚀刻技术：样品经冷冻断裂后，在真空中短暂暴露，使断裂面上的一层薄冰升华，暴露出蚀刻面，以便在电子显微镜下进行观察。4.电镜三维重构与低温电镜技术5.扫描电镜技术：利用电子在样品表面扫描产生二次电子成像的显微镜。1.超薄切片技术（ultrathinsection)超薄切片技术显示的动物细胞超微结构随堂练习8.用电子显微镜观察的生物样品会有一些特殊要求，如要求样品很薄及更好地保持样品的精细结构（）8.用电子显微镜观察的生物样品会有一些特殊要求，如要求样品很薄及更好地保持样品的精细结构（）√×AB提交单选题10分2.负染色技术(negativestaining)家蚕细小病毒负染色电镜照片（病毒直径20nm）3.冷冻蚀刻技术(freezeetching)随堂练习9.经冷冻蚀刻技术处理后的样品，在电子显微镜下所观察到的图像是样品本身所形成的（）9.经冷冻蚀刻技术处理后的样品,在电子显微镜下所观察到的图像是样品本身所形成的()AB提交√×单选题10分4.电镜三维重构与低温电镜技术电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的具有重要应用前景的一门新技术。电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振分析技术相结合，是当前在结构生物学（StructuralBiology）领域用于研究生物大分子空间结构及其相互关系的主要实验手段。低温电子显微技术：其样品不经固定、染色和干燥，直接包被在约100nm厚的冰膜中，在电镜内-160℃低温下利用相位衬度成像；研究生物大分子及其复合物表面与内部的空间结构。单颗粒技术：研究核糖体的三维结构及在蛋白质合成中的动态变化电子扫描断层成像技术：研究细胞核细胞器三维精细结构电子扫描断层成像技术显示细菌的部分鞭毛及其复杂的基部结构（箭头所指）5.扫描电镜技术（Scanningelectronmicroscope，SEM）

电子“探针”扫描，激发样品表面放出二次电子，探测器收集二次电子成像。CO2临界点干燥法防止引起样品变形的表面张力问题图像为立体形象，反映了样品的表面形貌。为了使标本表面发射出次级电子，标本在固定、脱水后，要喷镀一层金膜，重金属在电子束的轰击下发出次级电子信号扫描电镜原理示意图（A），

扫描电镜下可清晰地显示原生动物四膜虫表面的纤毛和口器（B）人类血细胞SEM照片随堂练习10.扫描电子显微镜主要用于观察

，常常采用

对生物样品进行干燥。为了得到良好的表面导电性，样品在观察前还需要

。10.扫描电子显微镜主要用于观察[填空1]，常常采用[填空2]对生物样品进行干燥。为了得到良好的表面导电性，样品在观察前还需要[填空3]。作答正常使用填空题需3.0以上版本雨课堂填空题30分随堂练习11.透射或扫描电子显微镜不能用于观察活细胞，而相差显微镜或倒置相差显微镜可以用于观察活细胞（）11.透射或扫描电子显微镜不能用于观察活细胞,而相差显微镜或倒置相差显微镜可以用于观察活细胞()正确A错误B提交单选题10分

三、扫描隧道显微镜

(scanningtunnelingmicroscope，STM)

一种利用隧道效应来探测微观世界物质表面形貌的显微镜。第二节细胞及其组分的分析方法一、用超离心技术分离细胞组分二、细胞成分的细胞化学显示方法三、特异蛋白抗原的定位与定性四、细胞内特异核酸的定位与定性五、定量细胞化学分析与细胞分选技术

一、用超离心技术分离细胞组分

原理：利用颗粒大小的不同：差速离心法；速度区带离心法；利用颗粒密度的不同：等密度离心法用途：离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体等细胞器，以及各种大分子基本手段。一般认为，转速为10000-25000r/min的离心机称为高速离心机；转速超过25000r/min，离心力大于89Kｇ者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达80000r/min，离心力超过500Kg。高速台式冷冻离心机台式高速离心机贝克曼超速离心机RCF(relative

centrifugal

field)即表示相对离心场，以重力加速度g（980.66cm/s2）的倍数来表示rpm(revolution

per

minute，或r/min)表示离心机每分钟的转数r

表示离心机转轴中心与离心管中心的距离（如下图所示），单位为cm。由于离心管的位置由转子（rotor）决定，因此r

必须由查阅相关转子的参数而得。用差速离心法分离细胞匀浆中的各种细胞组分用密度梯度离心分离细胞组分示意图二、细胞成分的细胞化学显示方法为了测定蛋白质、核酸、多糖和脂质等细胞组分，通常利用一些显色剂与所检测物质中一些特殊基团特异性结合（反应）的特征，通过显色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断某种物质在细胞中的分布和相对含量。

福尔根(Feulgen)反应可特异显示DNA的存在部位。

PAS（高碘酸-希夫）反应可确定多糖的存在。四氧化锇可证明脂肪滴的存在。苏丹Ⅲ和苏丹黑也常用于脂肪的鉴定。米伦反应及重氮反应等用来测定蛋白质。检测和定位酶的技术是基于细胞或组织切片与适宜底物共同孵育，通过一定方法使产物显示出来。例如检测碱性磷酸酶的格莫瑞方法。三、特异蛋白抗原的定位与定性（一）、免疫荧光技术（二）、免疫电镜技术（一）、免疫荧光技术免疫荧光技术就是将免疫学方法与荧光标记技术相结合研究特异蛋白质抗原在细胞内分布的方法。包括直接和间接免疫荧光技术实验步骤：荧光抗体的制备、标本的处理（组织切片、冷冻切片、整装细胞）、免疫染色、观察记录等优点：快速、灵敏、有特异性，但其分辨率有限直接免疫荧光标记与间接免疫荧光标记技术直接免疫荧光标记技术：利用偶联荧光分子的抗体与细胞或细胞切片进行孵育，使抗体和相应抗原结合，在荧光显微镜下对抗原进行定位的技术。间接免疫荧光标记技术：即不带荧光标记的第一抗体与相应抗原孵育形成复合物后，再用荧光标记的第二抗体识别第一抗体，从而显示抗原所在位置。（二）、免疫电镜技术免疫电镜技术使特异蛋白的定位与超微结构结合起来，使抗原定位更准确。如蛋白分泌的研究胞内酶的研究；一些结构蛋白的研究。免疫铁蛋白技术：铁蛋白是含铁离子的蛋白质，在电镜下铁离子可显黑色；免疫胶体金技术

:即金的水溶液，具有一般溶液的特性，用它与抗体标记后，经抗原抗体反应可定位抗原的存在。应用：通过对分泌蛋白的定位，可以确定某种蛋白的分泌动态；胞内酶的研究；膜蛋白的定位与骨架蛋白的定位等免疫酶标技术：酶联免疫吸附剂测定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA），辣根过氧化物酶（HRP）免疫铁蛋白电镜技术（铁蛋白分子量大，应用在膜上）免疫胶体金电镜技术（胶体金分子量非常小，可穿透细胞膜，应用在溶酶体等）

免疫胶体金电镜原位杂交技术的基本原理与应用（膀胱上皮细胞膜蛋白的分布：箭头所指）ELISA蛋白电泳(SDS）与

免疫印迹反应(Western-Blot)基本原理：通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。DYCZ-24DN型

迷你双垂直电泳仪(槽)（小号）

DYCZ-40D型

迷你转印电泳仪(槽)

问题：B图和C图分别是用什么染色，灵敏度分别是大于多少ng?A图B图C图实验方案？双向电泳（2D电泳）单向SDS电泳分辨率差，只能分开50左右种的蛋白。双向电泳可分辨1000种以上的蛋白质，一般为2000-15000种

步骤：1、等电聚焦电泳；2、在垂直于第一次电泳的方向上进行SDS电泳四、细胞内特异核酸的定位与定性原位杂交（insituhybridization）：通过单链RNA或DNA探针对细胞或组织中的基因或mRNA进行定位的技术。光镜水平的原位杂交技术（同位素标记或荧光素标记的探针）电镜水平的原位杂交技术（生物素标记的探针与抗生物素抗体相连的胶体金标记结合）

把凝胶电泳分离开的DNA片段，通过扩散或电泳转移到硝酸纤维素膜上，做成一个凝胶的复制品，这个过程叫做印迹。将硝酸纤维素膜与带有放射性标记的探针杂交，通过放射自显影就可以辨认出与探针互补的特殊的核苷酸序列。利用标记的DNA探针检测某一特定的DNA序列的方法称为Southernblot，检测特定RNA序列的方法称为Northernblot。

PCR技术和DNA测序方法用原位杂交技术显示Z13基因在受精后1d的斑马鱼胚胎的体节、眼和松果体中的表达（箭头所指）放射自显影技术

原理：利用同位素的放射自显影，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究；应用：实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究步骤：掺入、制片、敷胶、曝光、显影、镜检

五、定量细胞化学分析与细胞分选技术流式细胞术（flowcytometer,FCM）：一种用于核酸、蛋白质、染色体和细胞等的定量、分离和分选的技术。特点：测量速度快，几万个细胞/秒；可进行多参数测量，并具有明显的统计学意义；综合了多学科的科技成果；既是细胞分析技术，又是精确的分选技术；应用：用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量；测定细胞群体中不同时相细胞的数量；从细胞群体中分离某些特异染色的细胞；分离DNA含量不同的中期染色体。

流式细胞仪的工作原理第三节细胞培养与细胞工程一、细胞培养二、细胞工程一、细胞培养（一）、动物细胞培养（二）、植物细胞培养原代培养：用直接从生物体获得的细胞所进行的培养。传代培养：在体外培养条件下对细胞一代接一代的持续培养。细胞系（cellline）：来源于动物或植物细胞，能够在体外培养过程中无限增殖的细胞群体。

体外培养的细胞A：正在生长分裂的HeLe（宫颈瘤）细胞B:长满单层的CHO（中国仓鼠卵巢）原代细胞二、细胞工程（一）、细胞融合与单克隆抗体技术（二）、显微操作技术与动物的克隆细胞融合(cellfusion)：两个细胞通过质膜的接触并相互融合形成一个细胞的过程。融合后的细胞只有一个连续的细胞质膜。单克隆抗体(monoclonalantibody)：来自单个细胞克隆所分泌的抗体分子。杂交瘤技术(hybridomastechniques)：由一个正常的产生抗体的B淋巴细胞与一个恶性骨髓瘤细胞融合产生的杂种细胞系。具有无限增殖和产生单克隆抗体的特性。细胞拆合(Celldivisionandcombination

)：即先把细胞核与细胞质分离开来，然后把不同来源的核体和胞质体相互融合，形成核-质杂交细胞。单克隆抗体制备过程示意图应用显微注射技术进行细胞核移植第四节细胞及生物大分子的动态变化一、荧光漂白恢复技术二、单分子技术与细胞生命活动的研究三、酵母双杂交技术四、荧光共振能量转移技术五、放射自显影技术一、荧光漂白恢复技术荧光漂白恢复技术：一种研究膜组分流动性的技术。通过膜组分与荧光染料连接，用激光不可逆地漂白膜上的某一荧光区域，然后根据漂白区荧光恢复的速度，研究膜的流动性。荧光漂白恢复技术原理示意图二、单分子技术与细胞生命活动的研究单分子技术：一种在细胞内实时观测单一生物分子运动规律的技术，可在纳米空间尺度和毫秒时间尺度上精确测量单分子的距离、位置、指向、分布、结构以及各种动态过程。利用光镊来研究生物单分子体系三、酵母双杂交技术酵母双杂交技术：一种利用酵母基因表达系统在体内分析蛋白质-蛋白质相互作用的技术。用于检测蛋白质-蛋白质互作的

酵母双杂交技术原理示意图四、荧光共振能量转移技术荧光共振能量转移技术：一种用来检测活细胞内两种蛋白质分子是否直接相互作用的技术。荧光共振能量转移原理图五、放射自显影技术放射自显影技术：通过检测放射性标记物质在细胞内的定位来观察某一特定生化反应过程的技术。在含有放射性同位素的组织切片上涂一薄层感光乳胶，乳胶经组织发出的射线曝光、显影，在显微镜下通过观察银颗粒定位，可以获知细胞中有放射性信号的位点。常用放射性同位素的基本特点电镜放射自显影图片（显示RNA合成部位）N：细胞核Nu：核仁SG：银颗粒第五节模式生物与功能基因组的研究一、细胞生物学研究常用的模式生物二、突变体制备技术三、蛋白质组学技术一、细胞生物学研究常用的模式生物（一）、大肠杆菌（二）、酵母（三）、线虫（四）、果蝇（五）、斑马鱼（六）、小鼠（七）、拟南芥二、突变体制备技术RNA干扰（RNAi）：一种把双链小分子（或单链反义）RNA导入细胞或模式生物体中使某mRNA降解或抑制其翻译活性的技术。