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文档简介

TailGenDNABuffer15Buffer15Buffer13Buffer15Buffer1525ProteinaseKStorage1.25SpinColumn本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的小鼠或大鼠鼠尾中提取高纯度的总DNA。该试剂盒提供的方法简单易行，纯化过程无需苯酚或氯仿抽提，可获得最大为0b的DNA0尾样本，优化的缓冲体系使裂解鼠尾后产生的DNA高效结合到硅基质吸附柱上，而其他污染物可流过膜；PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可得到高纯度的DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、、e、文库构建、enBlot、分子标记等下游实验。向ProteinaseK中加入1.25mlProteinaseKStorageBuffer使其溶解，-20℃保存。配制好的ProteinaseK勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。RNaseA（100mg/ml），RNaseA本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订心管（自备）中。加入180μlBufferGTT，振荡混匀。 注意：1）如果孵育和涡旋震荡后仍然有胶状物质，必要时过夜消化或再加入20μlProteinaseK消2）如需去除RNA，在上述步骤完成后加入4μl100mg/ml的RNaseA溶液（货号：CW0601），加入200μlBufferGL，涡旋震荡，充分混匀。加入200μl无水乙醇将步骤5中所得溶液全部加入到已装入收集管（CollectionTube）的吸附柱（SpinColumnDM）中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。10,000rpm（～11,500 注意：1）如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5（可以用NaOH将水的pH值调到此范围）

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