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技能点27鸡法氏囊高免蛋卵黄抗体效价的测定技能点27鸡法氏囊高免蛋卵黄抗体效价的测定主要内容：一、目的要求二、仪器及材料三、方法与步骤主要内容：一、目的要求一、目的要求掌握传染性法氏囊病的卵黄抗体效价的测定方法和判定标准，明确此试验在生产中的应用。一、目的要求掌握传染性法氏囊病的卵黄抗体效价的测定方法和判定知识拓展-传染性法氏囊病主要危害法氏囊肿胀、出血、后期萎缩发病率可达100%，死亡率约20%~30%知识拓展-传染性法氏囊病主要危害法氏囊肿胀、出血、后期萎缩发卵黄抗体效价测定的意义制备高免卵黄抗体时需测定抗体效价，待卵黄琼扩反应效价达1∶128以上即可收蛋。琼扩抗体效价应≥1∶32，才具有良好的治疗及预防作用。卵黄抗体效价测定的意义琼脂扩散试验定性检测定量检测是以2的倍数稀释琼脂扩散试验二、仪器材料氯化钠、琼脂粉、培养皿、打孔器、酒精灯、高免卵黄抗体、96孔血凝板、微量移液器、烧杯、带盖瓷盘、注射器、生理盐水、蒸馏水、标准抗原等。二、仪器材料氯化钠、琼脂粉、培养皿、打孔器、酒精灯、高免卵黄三、方法与步骤（一）1%琼脂平板制备（二）稀释卵黄（三）加样（四）反应（五）结果判定及结论三、方法与步骤（一）1%琼脂平板制备（一）

1%琼脂平板制备及打孔1.制板用8～10%氯化钠溶液配制1%琼脂溶液，电炉加热使之充分溶化后，倒入直径90mm培养皿，制成厚度为2.5～3mm琼脂平板；平置，在室温下冷却凝固后打孔。（一）1%琼脂平板制备及打孔1.制板2.打孔在琼脂板上按7孔一组的梅花形打孔（中间1孔，周围6孔），孔径5mm，孔距2～5mm，将孔内的琼脂用8号针头斜面向上轻轻将琼脂挑出，勿伤边缘或使琼脂层脱离皿底。一般打两组孔。2.打孔在琼脂板上按7孔一组的梅花形打孔（中间1孔，周围6孔3.封底用酒精灯轻烤平皿底部至琼脂板底部刚刚要溶化（手背感觉微烫手）为止，封闭孔底部，以防侧漏。3.封底用酒精灯轻烤平皿底部至琼脂板底部刚刚要溶化（手背感觉4.编号在平皿底用蜡笔编号，第一组编号1～6，第二组编号7～12。4.编号在平皿底用蜡笔编号，第一组编号1～6，第二组编号7～（二）卵黄稀释用微量移液器在96孔血凝板加生理盐水，每孔50微升，共加1~12孔；再于第一孔加50微升卵黄，倍比稀释至12孔。（二）卵黄稀释用微量移液器在96孔血凝板加生理盐水，每孔50（三）加样中央孔加入传染性法氏囊病病毒标准抗原，外周孔分别加稀释的卵黄，血凝板孔号与琼扩板孔号要一一对应，加样从低浓度开始加样，每加一个浓度，吸嘴尽量喷干净。加样量以“满而不溢”为原则。（三）加样中央孔加入传染性法氏囊病病毒标准抗原，外周孔分别加技能点27鸡法氏囊高免蛋卵黄抗体效价的测定课件（四）反应加样完毕后，静置5～10min，然后将平皿轻轻倒置放入湿盒内，37℃温箱中扩散24～48。（四）反应加样完毕后，静置5～10min，然后将平皿轻轻倒置（五）结果判定

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