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元谋县人民医院
检验科
微生物室肠球菌属检验标准操作规程文件编号:元谋县人民医院
检验科
微生物室肠球菌属检验标准操作规程生效日期:2011-11-01文件版本:第一版文件页码:1/2概述肠球菌属包括粪肠球菌、屎肠球菌、鸟肠球菌、类鸟肠球菌、棉子糖肠球菌等21个种。标本类型血液、尿液、痰、穿刺液、脓液等标本。鉴定3.1形态与染色革兰阳性球菌,单个、成双或短链排列。3.2培养特性在血琼脂平板上35°C培养18〜24小时,形成较小、灰白色,有a溶血或丫溶血环的菌落。在康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。3.3生化反应触酶试验阴性,分解甘露醇,胆汁七叶苷试验阳性,在含6.5%NaCl肉汤中生长,多数菌株PYR试验阳性,对杆菌肽耐药。3.4鉴别要点3.4.1本菌属特征革兰阳性球菌,触酶阴性,在含6.5%NaCl肉汤中生长,胆汁七叶苷和耐盐试验阳性,45C生长。3.4.2与链球菌属和乳球菌属的鉴别肠球菌属能在pH9.6肉汤和45C生长,胆汁七叶甘和耐盐试验阳性,而链球菌属和乳球菌属则相反。3.4.3粪肠球菌与屎肠球菌、鸟肠球菌的鉴别粪肠球菌不分解L-阿拉伯糖,分解山梨醇。屎肠球菌能分解L-阿拉伯糖,不分解山梨醇。鸟肠球菌分解L-阿拉伯糖和山梨醇。3.5操作步骤3.5.1涂片、染色观察菌落特征,挑取可疑菌落,涂片染色镜检。3.5.2触酶试验参见《触酶试验标准操作规程》3.5.3鉴定从血琼脂平板上挑取纯菌落,用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。药敏参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSIM100-S19最新版本文件。质量控制参见《质量管理程序》。检验结果解释与分析在卩-内酰胺酶阴性肠球菌中,氨苄西林药敏试验结果可预测阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等敏感性。青霉素药敏试验可预测氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林-他唑巴坦等药敏结果。粪肠球菌中氨苄西林药敏结果可以预测亚胺培南的药敏结果。对于血培养和脑脊液培养分离出的肠球菌需做卩-内酰胺酶检测,若卩-内酰胺酶阳性,则对氨基青霉素、羧基青霉素和脲基青霉素均耐药。为耐万古霉素肠球菌(VRE)加做氯霉素、红霉素、四环素和利福平药敏试验,根据结果进行治疗。氨基糖苷类高水平耐药株HLAR可用庆大霉素120yg/ml纸片筛选,无抑菌环为耐药,抑菌环三10mm为非HLAR,对于抑菌环在7-9mm之间的菌株需用稀释法确认。对于肠球菌属,头抱菌素类、氨基糖苷类(仅筛选高水平耐药性)、磺胺甲恶唑、甲氧苄啶和克林霉素在体外可能有活性(敏感),但在临床上耐药,所以不能报告肠球菌对这些药物敏感。7•临床意义粪肠球菌和屎肠球菌主要引起医院感染,最常见为尿道感染(大部分与尿道器械操作、导尿等有关),其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科术后感染。近年来,肠球菌属氨苄西
元谋县人民医院检验科微生物室肠球菌属检验标准操作规程文件编号:生效日期:2011-11-01文件版本:第一版文件页码:2/2林耐药菌株和庆大霉素高耐药株逐渐增多,耐万古霉素的肠球菌国外也有较多报道,已使肠球菌所致重症感染的治疗成为临床棘手的问题。8.鉴定流程参考文献中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.2008周庭银编著•临床微生物学诊断与图解•第二版•上海:上海科学技术出版社,2007叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第3版.南京:东南大学出版社,2006MurrayPR.ManualofCinicalM
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