实验诊断学课件：临床常用免疫学检查

2023/9/171临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查2023/9/17临床常用免疫学检查2临床常用免疫学检查免疫功能检查*血清免疫球蛋白检测*血清补体检测*细胞免疫检测病毒肝炎血清标志物检查感染免疫检查

细菌感染免疫检测病毒感染免疫检测其它（寄生虫感染、性病等）肿瘤标志物检查

蛋白质类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物酶类肿瘤标志物2023/9/17临床常用免疫学检查3临床常用免疫学检查自身抗体检查*抗核抗体检测*类风湿因子测定*抗心磷脂抗体测定*抗中性粒细胞胞浆抗体测定抗某种组织/细胞的抗体检测

移植免疫检查细胞因子检查*IL-2、6、8、10*TNFIFN

2023/9/17临床常用免疫学检查4免疫功能检查*血清免疫球蛋白检测

*血清补体检测*细胞免疫检测2023/9/17临床常用免疫学检查5体液免疫检查

（一）免疫球蛋白

（Immunoglobulin,Ig）

免疫球蛋白指具有活性的抗体活性和抗体样结构的球蛋白，由浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一些细胞膜上。2023/9/17临床常用免疫学检查6免疫球蛋白

用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白分为五类：

IgG最多、占70%~80%抗体活性

IgA血清型和分泌型两种

IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子

IgD功能尚不完全清楚

IgE与变态反应有关2023/9/17临床常用免疫学检查7免疫球蛋白

2023/9/17临床常用免疫学检查8

2023/9/17临床常用免疫学检查9正常值：

单向免疫扩散法—IgG7.0~16.6g/LIgA0.7~3.5g/LIgM0.5~2.6g/L

ELISA法—IgE0.1~0.9mg/L2023/9/17临床常用免疫学检查10

多克隆增高:IgGIgAIgM均增高单克隆增高:仅某一种Ig增高而其他种不增高

2023/9/17临床常用免疫学检查11临床意义

增高：多克隆性增高—慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病单克隆性增高—免疫增殖性疾病

2023/9/17临床常用免疫学检查12临床意义

减低：

先天性—先天性无（低）丙种球蛋白血症、重链病、轻链病

后天性—肾病综合征、病毒感染、免疫抑制剂应用

2023/9/17临床常用免疫学检查13IgG亚类测定（单向免疫扩散或ELISA）

IgG160%~70%临床意义

IgG214%~20%

IgG亚类缺陷：儿童中以IgG2缺陷

IgG34%~8%

常见，成人以IgG1和IgG3缺陷常见。

IgG42%~6%

IgG亚类缺陷患者常表现为反复感染如呼吸道感染、腹泻、中耳炎、鼻窦炎等。

IgG亚类异常增高主要见于变态反应疾病。2023/9/17临床常用免疫学检查14IgE测定

IgE为亲细胞抗体，在Ⅰ型变态反应性疾病的发病中起重要作用。临床意义增高Ⅰ型变态反应性疾病，如支气管哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎、荨麻疹等；非过敏性疾病如寄生虫病、肝炎、SLE、类风湿关节炎及多发性骨髓瘤（IgE型）等。

2023/9/17临床常用免疫学检查15M蛋白（Monocolonalprotein）:

M蛋白是一种单克隆B淋巴细胞（浆细胞）异常增殖时产生的免疫球蛋白分子或其片段（如轻链、重链等），它们与正常免疫球蛋白相同结构和电泳迁移速度，但不具有抗体活性。临床意义多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)

巨球蛋白血症（Waldenstrom症）重链病、轻链病、半分子病其它：恶性淋巴瘤（lymphoma）、良性M蛋白血症2023/9/17临床常用免疫学检查16免疫功能检查*血清免疫球蛋白检测*血清补体检测

*细胞免疫检测2023/9/17临床常用免疫学检查17（二）血清补体（complement,C）

参与灭活病原体的免疫反应也可破坏自身组织或自身细胞造成免疫损伤2023/9/17临床常用免疫学检查18

2023/9/17临床常用免疫学检查19

总补体溶血活性检测（totalhemolyticcomplementactivity,CH50）

正常值：50~100ku/L

临床意义：减低—肾小球肾炎、自身免疫性疾病（如系统性红斑狼疮Systemiclupuserythematosis,SLE）、感染性心内膜炎（subacuteinfecitiveendocarditis,SBE）、肝病等

增高—急性炎症、组织损伤、肿瘤等2023/9/17临床常用免疫学检查20补体C3检测：

C3在补体系统各成分中含量最多，是传统途径和旁路途径被激活的关键物质正常值：0.8~1.5g/L补体C4检测：

C4代表补体传统活化途径，在补体活化、促进吞噬、防止免疫复合物沉着和中和病毒等方面发挥作用正常值：0.2~0.6g/L2023/9/17临床常用免疫学检查21临床意义：参见CH50减低和增高的临床意义

C3增高在急性炎性反应更敏感

C4对判断免疫复合物形成时补体消耗性减低更有意义2023/9/17临床常用免疫学检查22免疫功能检查*血清免疫球蛋白检测*血清补体检测*细胞免疫检测2023/9/17临床常用免疫学检查23细胞免疫检测T细胞免疫检测B细胞免疫检测自然杀伤细胞检测中性粒细胞吞噬、杀菌功能检测2023/9/17临床常用免疫学检查24

T细胞分化抗原测定

(免疫荧光法）

CD3—总T细胞正常值：

61%～85%

CD4—T辅助细胞（TH）正常值：

28%～58%

CD8—T抑制细胞（TS）正常值：

19%～48%

CD4/CD81.66±0.33

（＞1）2023/9/17临床常用免疫学检查25流式细胞仪检测T细胞亚群2023/9/17临床常用免疫学检查26临床意义：CD3

降低—自身免疫性疾病（SLE、类风湿关节炎）

CD4/CD8增高—自身免疫性疾病（如SLE、类风湿关节炎、多发性硬化症等）及器官移植后排异反应

CD4/CD8减低—见于艾滋病、恶性肿瘤、传染性单核细胞增多症、巨细胞病毒感染、血吸虫病等。

CD3CD4CD8均增高—T细胞型淋巴细胞恶性疾病2023/9/17临床常用免疫学检查27

B细胞分化抗原测定：

应用CD19、CD20、CD21、CD22

和CD40等单克隆抗体标记单个核细胞—B细胞，通过免疫荧光或流式细胞术进行检测。

CD19

为全部B细胞共有的表面标志，B细胞活化后不消失，是最重要的B细胞标记分子。

CD22为成熟B细胞的表面标志。

参考值：CD1911.74±3.73%

2023/9/17临床常用免疫学检查28临床意义升高—B细胞型急性淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞白血病、Burkitt淋巴瘤等

减低—无丙种球蛋白血症、长期免疫抑制剂应用后2023/9/17临床常用免疫学检查29

自然杀伤细胞免疫检测它不依赖抗体和补体即能杀伤靶细胞自然杀伤细胞（NK）介导天然免疫应答，自然杀伤细胞（NK）活性可作为判断机体抗肿瘤和抗病毒感染的指标之一

2023/9/17临床常用免疫学检查30

参考值：

NK细胞活性（自然杀伤）47.6%～76.8%

临床意义：

升高：常见于病毒感染早期，Down综合症，器官移植后，使用免疫增强剂（如干扰素）治疗后。

减低：常见于恶性肿瘤，重症联合免疫缺陷病，AIDS和免疫抑制剂使用者等。2023/9/17临床常用免疫学检查31中性粒细胞吞噬、杀菌功能检测硝基四氮唑蓝还原试验（NBT）

参考值：阳性细胞75%～95%

临床意义：NBT↑--细菌感染

1.有助于鉴别细菌感染/病毒感染

NBT不高--病毒感染

2.

NBT↓为白细胞吞噬功能缺陷，见于先天性慢性肉牙肿、中性粒细胞异常缺陷综合症、先天性丙种球蛋白缺乏症等，及长期使用免疫抑制剂时。2023/9/17临床常用免疫学检查32自身免疫检测

*类风湿因子测定、*抗核抗体检测、*组织和细胞抗体检测

2023/9/17临床常用免疫学检查33自身抗体检查类风湿因子（rheumatoidfactor,RF）

RF是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿关节炎患者的血清和关节液内。

RF可分为IgM型、IgG型、IgA型等，用胶乳凝集法测出的主要是IgM型，用ELISA法可进一步检出其它型2023/9/17临床常用免疫学检查34RF-IgGRF-IgARF-IgM2023/9/17临床常用免疫学检查35参考值：

阴性<30U/L临床意义：

类风湿关节炎（阳性率70%）其它自身免疫性疾病（SLE、干燥综合症等）可阳性

慢性活动性肝炎、某些感染性疾病（传染性单核细胞增多症、结核病感染性心内膜炎等）也可出现阳性2023/9/17临床常用免疫学检查36（二）抗核抗体检测

1.抗核抗体（antinuclearantibody,ANA）

抗核抗体是一种泛指抗各种细胞核成分的自身抗体的总称（ANAS），这种抗体无器官和种族的特异性2023/9/17临床常用免疫学检查37

免疫荧光法

以鼠肝细胞核或人喉癌细胞（Hep-2细胞）作抗原时该抗体（1抗）可与之结合，再加入荧光标记抗人IgG（2抗）后可产生黄绿色荧光2023/9/17临床常用免疫学检查38血清抗体荧光素标记的抗免疫球蛋白细胞核细胞浆载片间接免疫荧光检测的原理2023/9/17临床常用免疫学检查39

根据细胞核着染荧光的图像可分为:

均质型DNP核蛋白边缘型DNA

颗粒型ENA

核仁型RNA

2023/9/17临床常用免疫学检查40抗核抗体：弥散型2023/9/17临床常用免疫学检查41抗核抗体：周边型2023/9/17临床常用免疫学检查42抗核抗体：斑点型2023/9/17临床常用免疫学检查43抗核抗体：核仁型2023/9/17临床常用免疫学检查44

参考值：

免疫荧光法为阴性血清滴度>1：40为阳性

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临床意义：

ANA阳性最多见于未治疗的SLE，阳性率达80%—100%（活动期几乎100%阳性）

ANA阳性是结缔组织病的标志，如:混合性结缔组织病（mixedconnectivetissuedisease,MCTD）100%阳性

系统性硬化病（systemicsclerosis,SSc）85%—95%阳性、多发性肌炎（polymyositis,PM）30%—50%阳性,

此外,类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)、干燥综合症（SjogrenSyndrom,SS）等可出现阳性

其它疾病,如原发性胆汁性肝硬化、慢性肝病、慢性感染、肿瘤等也可出现阳性2023/9/17临床常用免疫学检查462.抗脱氧核糖核酸抗体（anti-DNAantibody，抗DNA）

其中抗双链DNA（doublestranded-DNA,ds-DNA）抗体的靶抗原是细胞核中的DNA双螺旋结构，它的检测有临床的重要性

正常结果：阴性

临床意义：抗ds-DNA抗体阳性见于活动期SLE，阳性率70%—90%，为SLE特异性抗体，特别在并发狼疮性肾炎时起重要作用，其它风湿病中抗ds-DNA抗体也可阳性2023/9/17临床常用免疫学检查47

3.可提取性核抗原多肽抗体谱

ENA（extractableantinuclearantigen）由多种相对分子质量不同的多肽构成，利用免疫印迹试验可对这些抗原的自身抗体进行检测

2023/9/17临床常用免疫学检查48

抗体靶抗原意义方法SmRNA和核蛋白SLE标记抗体，阳性20~40%双向免疫扩散U1RNP小核糖核蛋白MCTD阳性>90%;SLE﹑SS﹑SSc﹑PM/DMDID;EIASSA(Ro)小细胞质核糖核蛋白PSS40~95%;SCLE70~90%DID;EIASSB(La)小细胞核核糖核蛋白SS高度特异性DID;EIArRNP60S核糖体大亚基SLE高度特异性抗体，阳性10~40%。与脑病有关。EIAScl-70拓扑异构酶1SSc特异性抗体,预后不良。EIAJo-1tRNA合成酶PM/DM标记抗体20~30%DID,IB

ENA多肽7项是目前临床最多应用于风湿病检查的项目

2023/9/17临床常用免疫学检查49抗心磷脂抗体（anticardiolipinantibody,ACA）

抗磷脂抗体是一组针对各种带负电荷磷脂的自身抗体，其中以ACA可作为代表。

正常参考：阴性ELISA法测定≥2.1为阳性

临床意义：ACA阳性见于SLE、类风湿关节炎、干燥综合症等风湿病，抗磷脂综合症，以及肿瘤、感染等。2023/9/17临床常用免疫学检查50抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)

（anti-neutrophilcytoplasmicantibody）

ANCA是存在于系统性血管炎患者血清中的一种自身抗体，可分为胞浆型（C-ANCA）和核周型（P-ANCA）2023/9/17