生化大题汇总

生化大题汇总浓参与DNA复制的主要酶和蛋白因子有哪些？各有什么功能？拓扑异构酶：松解DNA的超螺旋。解链酶：打开DNA的双链。引物酶：在DNA复制起始处以DNA为模板，催化合成互补的RNA短片断。DNA聚合酶：以DNA为模板、dNTP为原料，合成互补的DNA新链。连接酶：连接DNA片断。DNA结合蛋白：结合在打开的DNA单链上，稳定单链。浓DNA复制有何主要特点？半保留复制，半不连续合成、需RNA引物，以dNTP（A，T，C，G）为原料，新链合成方向总是5’->3’，依赖DNA的DNA聚合酶（DDDP）浓DNA复制的高保真性主要取决于哪些因素？DNA复制的高保真性取决于三个方面：1、DNA双链碱基的严格配对与DNA聚合酶对配对碱基的严格选择性；2、5’->3’外切核酸酶的即时校读作用；3、对DNA分子中的错误或损伤的修复机制。浓真核生物DNA复制在何处进行？如何进行？在细胞核内。复制分为以下几个阶段：1、起始阶段（DNA解旋解链及引物合成）：DNa拓扑异构酶、解链酶分别使DNA解旋、解链，形成复制叉，在起始点由引物酶催化合成RNA引物；2、DNA合成阶段：以DNA的两条链分别作为模板，dNTP为原料按碱基互补原则（A-T，C-G）在RNa引物引导下，由DNA聚合酶催化合成DNA新链（分前导链和随从链）；3、终止阶段：水解RNa引物（polI），填补空缺（polI），连接DNA片断（连接酶）。浓何谓反转录？在哪些情况下发生反转录？写出主要酶促反应过程。以RNA为模板在反转录酶的作用下合成DNA的过程叫做反转录。反转录可发生于：1、在RNA病毒感染宿主细胞甚至致癌过程中；2、在基因工程中，以mRNA为模板合成cDNA。病毒RNA（反转录酶dNTP）—>RNA-DNA杂化链（RNA酶活性）一>cDNA单链（DNA聚合酶活性）一>cDNA双链浓概述DNA的生物合成。DNA的生物合成包括DNA半保留复制，DNA损伤后的修复合成和反转录DNA复制是以DNa的两条链分别作为模板，以dNTP为原料，在DNA聚合酶作用下按照碱基配对原则合成互补新链，这样形成的两个子代DNA分子与原来DNa分子完全相同，一条链来自亲代，另一条链是新合成的，故称为半保留复制。在某些梨花、生物学因素作用下DNa链发生碱基突变、缺失、交联或链的断裂等损伤后，可进行修复。修复方式有光修复、切除修复、重组修复与SOS修复等。切除修复：1、核酸内切酶从损伤处的5’端切开，出现正常的3’端；2、核酸外切酶水解已打开的损伤DNA段;3DNA聚合酶以互补的DNA链为模板，dNTP为原料，5’->3’方向合成新的DNa片段；4、连接酶连接形成完整的DNA链。以RNA为模板在反转录酶的作用下合成DNA的过程叫做反转录。反转录在病毒致癌过程中起重要作用；在基因工程中可用于以mRNA为模板合成cDNA的实验。浓催化磷酸二酯键形成的酶有哪些？比较各自不同特点。有DNA聚合酶、RNA聚合酶、引物酶、反转录酶、连接酶和拓扑异构酶。酶反应时限底物反应结果DNA聚合酶DNA复制或修复合成模板DNA、引物、dNTP合成互补DNA新链RNA聚合酶转录或RNA复制DNA/RNA模板、NTP合成RNA新链引物酶复制起始阶段起始点DNA模板、NTP合成RNA引物反转录酶反转录RNA模板、dNTP合成互补DNA连接酶DNa复制或修复合成双链DNA中相邻片段合成DNA长链拓扑异构酶DNA复制起始超螺旋DNA解旋DNA复制后松弛态DNA重新形成螺旋浓比较复制与转录的异同模板均为DNA，都需要聚合酶催化反应，聚合过程都是在核苷酸之间形成3’,5’-磷酸二酯键，合成方向都是5’->3’，都遵从碱基配对规则。不同点包括：复制使子代保留亲代的全部遗传信息，方式为半保留不连续复制；转录只是按照生存的需要表达部分遗传信息，方式为不对称转录。聚合酶分别是DNApol和RNApol，原料分别是dNTP和NTP，碱基配对RNA将A->T改为A->U，复制产物分别为DNA和RNA。浓何谓不对称转录？用实验证明之在双链DNA中只有一股单链作为模板；另外在同一条单链上可以交错出现模板链或编码链。用核酸杂交方法：用热变性将DNA双链打开，并分离成两股单链分别与转录产物RNA杂交，由此鉴定出哪条链上的特异区段是转录模板。另外可以进行核酸序列测定。浓试比较原核生物与真核生物RNA聚合酶有何异同？浓举例说明转录后加工的主要类型。mRNA中主要有：1、剪接一去除内含子拼接外显子；2、末端添加核苷酸：5’端加7甲基鸟嘌吟核苷三磷酸，3’端加多聚腺苷酸尾；3、化学修饰：甲基化；4、RNA编辑：某些mRNA转录后还进行插入、删除和取代一些核苷酸残基方能生成具有正确翻译功能的模板。浓讨论原核生物RNA聚合酶各亚基的功能和在转录中的作用。原核生物RNApol有a、B、B'、o、3亚基，还有一个p因子。。亚基和P因子分别是起始和终止因子；a亚基决定哪些基因转录；B亚基在转录过程中起催化作用；B'亚基结合DNA模板起开链作用。转录起始时需全酶结合模板，这种结合十分稳定。转录延长只要核心酶，且与模板结合较松弛以利于酶向模板下游移动。浓参与原核RNA转录的成分有哪些？它们的作用？四种核糖核苷酸：RNA合成的原料。。因子：辨认DNA上转录起始点。RNA聚合酶核心酶：以DNA为模板，催化四种核糖核苷酸按碱基互补配对原则形成磷酸二酯键。P因子识别某些RNA上转录终止部位。浓蛋白质生物合成体系由哪些物质组成，各起何作用？蛋白质合成过程就是mRNA翻译的过程，需要mRNA作模板，氨基酸为原料，tRNA作搬运氨基酸的特异工具，核糖体作装配机。核糖体大亚基具有转肽酶活性，可催化肽键形成。这一合成体系还需各种氨基酰tRNA合成酶对氨基酸进行活化；起始因子、肽链延长因子、终止因子RF等多种蛋白质因子参与核糖体循环；ATP、GTP供给能量；Mg、K等无机离子参与合成。浓何谓遗传密码？哪些密码子不代表氨基酸？在mRNA任何部位的AUG是否都代表起始信号？mRNA分子内，每三个相互邻近的氨基酸构成的三联体，按其特定排列顺序，在蛋白质生物合成中可被体现为氨基酸或肽链合成的终止信号者，统称遗传密码。其单个密码字，称为密码子。密码子共有六十四个，六十一个密码子分别代表各种氨基酸。另有三个密码子（UAA、UAG、UGA）为肽链合成的终止信号，不代表任何氨基酸。密码子AUG不仅代表蛋氨酸，而且位于mRNA起始部位的AUG，有事肽链合成的起始信号。作为起始信号的AUG，位于5’端，其周围核苷酸序列有一定特点，可使得AUG容易被核糖体接触，免受碱基配对区的封闭。浓起始作用的tRNA与一般的蛋氨酸tRNA有何差别？真核生物的tRNA与原核生物的有何不同？起始tRNA与普通蛋氨酸tRNA不同，是一种特殊蛋氨酸tRNA，用甲基化标志f来表示。起始tRNA能特异识别作为起始信号的密码子AUG。在原核生物和真核生物，此tRNA首先都携带Met形成Met-tRNA。然后原核生物的该复合物在转甲基酰基酶作用下甲酰化，称为甲酰蛋氨酰tRNA后，才发挥功能。真核生物的Met-tRNA无需甲酰化即可发挥作用。与起始tRNA不同，普通的蛋氨酸tRNA能够识别密码子AUG，所携蛋氨酰不甲酰化，只能识别非起始信号的AUG，所携的蛋氨酰只形成多肽链内部的氨基酸残基。浓真核生物与原核生物的蛋白质合成体系及过程有何不同？哪些物质可以特异的抑制真核生物的蛋白质合成？真核生物的mRNA有帽有尾，无“SD”序列，为单作用子。原核生物mRNA无帽无尾，在起始信号的5’存在富含嘌吟的“SD”序列，为多作用子。真核生物的mRNA代谢慢，原核的代谢快。真核生物的核糖体（80S）由40S小亚基和60S大亚基构成，比原核由30S和50S组成的70S核糖体大，含rRNA与蛋白质多。原核生物的大亚基只有两种rRNA（5S，23S），真核有三种（28S，5.8S，5S）。真核生物中的起始氨基酰tRNA复合体的蛋氨酸不用甲酰化，而原核必需。原核生物的起始因子有三种，真核有十种以上。翻译所需要的蛋白质因子，两者也有所不同。合成过程的起始阶段真核生物额外需要ATP,需要更多的起始因子（如帽结合蛋白）。肽链延长阶段，真核生物种催化氨基酰tRNA进入受位的肽链延长因子只有一种（EFT1），而原核生物有两种（EFTu与EETs）。真核生物种促进移位的肽链延长因子EFT2，可被白喉毒素所抑制。原核生物的相应因子EFG不受白喉毒素影响。终止阶段，真核生物只需一种终止因子RF，可识别三种终止密码子；原核生物的终止因子有三种。可抑制蛋白质合成的物质很多，但是只抑制真核生物蛋白质合成的物质不多，包括可与60S亚基结合，破坏28SrRNA的蓖麻蛋白等植物蛋白。浓试述肽链合成的起始、肽链延长及终止的重要步骤°IF2、IF3与肽链延长因子在其中起何作用？蛋白质合成的全过程包括氨基酸的活化、转运与核糖体循环。核糖体循环分为起始、延长和终止三个阶段，其中起始阶段为翻译调控的主要环节。原核生物中情况如下：核糖体循环的起始阶段是起始复合体的形成阶段。1、核糖体小亚基在起始因子IF3与IF1的促进下与mRNA的起始部位结合，在起始因子IF2的促进下与起始tRNA以及GTP结合形成亚基＞mRNA与起始tRNA共同组成的30S起始复合体。2、30S起始复合体形成后IF3脱落，50S亚基随之与此复合体结合，GTP分解，IF1、IF2脱落，形成大小亚基、mRNA、fMet-tRNA（给位）共同构成的起始复合体。真核生物需要更多起始因子，小亚基和mRNA结合需要ATP。起始阶段，IF3可对抗大小亚基缔合，使核糖体30S亚基不与50S亚基结合而与mRNa结合。IF2具有促进30S亚基与fMet-tRNA结合的作用，在核糖体存在时有GTP酶活性。IF1对前两者有辅助作用。核糖体循环的肽链延长阶段，每增加一个氨基酸，按进位、转肽、脱落、移位四步重复进行。1、氨基酰tRNA进入受位。需要延长因子EFTu、EFTs及GTP、Mg2+；2、50S大亚基存在转肽酶，催化肽键形成，需要Mg2+和K+；3、给位上的脱去氨基酰的tRNA从核糖体脱落；4、核糖体向mRNA的3’端移动一个密码子，同时携肽链的tRNA由受位移到给位，此步需要延长因子EFG、GTP与Mg2+。原核生物延长因子EFTu和EFTs相当于真核生物的EFT1,为氨基酰tRNA进入受位必需；EFG相当于真核生物的EFT2,促进携由肽链的tRNA移位。在终止阶段，在与核糖体受位对应的mRNA所在位置，转为终止密码子。终止因子RF识别此终止信号，进入受位，需GTP。RF使给位的转肽酶发挥水解作用，肽链水解释放。核糖体从mRNA上脱落解离，需要IF3的参与和GTP作用。浓肽链合成时，每合成一个肽键，需消耗多少高能磷酸键？说明在哪个步骤，以什么形式消耗的。肽链合成时，每合成一个肽键，需要消耗四个高能磷酸键。氨基酸活化时，在氨基酰tRNA合成酶催化下，ATP分解为焦磷酸与AMP；AMP、酶及氨基酸三者结合成为一种中间复合体，此步消耗两个高能磷酸键。此复合体的活化氨基酸转移到tRNA，由此生成氨基酸tRNA。另外两个高能磷酸键分别消耗在肽链延长阶段的氨基酰tRNA进位，以及携有肽链的tRNA的移位。浓简述基因表达的生物学意义要点：1、对所有生物均有适应环境和维持生长的作用；2、对多细胞生物有维持个体发育与分化。浓举例说明基因表达的时间特异性和空间特异性要点：1、解释基因表达的时间特异性和空间特异性；2、举例：血红蛋白只在红细胞表达一一空间特异性;血红蛋白只在成熟或比较成熟的红细胞表达一一阶段特异性。浓如何理解基因表达调控是多级水平发生的事件要点：一个基因表达产物受基因激活、转录起始、转录后加工、mRNA降解、蛋白质翻译、翻译后加工修饰及蛋白质降解等过程影响，但转录起始是基因表达的基本控制点。浓以乳糖操纵子为例，说明原核基因表达调节机制要点：1、叙述乳糖操纵子结构，说明各结构的功能；2、说明不同葡萄糖/乳糖浓度条件下乳糖操纵子工作原理。浓什么是目的基因？其主要来源或途径是什么？DNA重组的目的是：1、获得足够的特异基因或DNA序列以便分析、改造；2、获得某一基因的表达产物蛋白质。这些使我们感兴趣的基因或者DNA序列就是目的基因，来源为cDNA和基因组DNA。浓何谓基因克隆？简述其基本过程。基因克隆又称为DNA克隆，是指应用酶学的方法，在体外将各种不同来源的DNA与载体DNA连接成具有自我复制能力的DNA分子，进而通过转化或传染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转化子，再进行扩增、提取获得大量同一的DNA分子。例如，以质粒为载体进行DNA克隆的过程包括：目的基因的获取、基因载体的选择与构建、目的基因与载体的连接、重组DNA分子导入受体细胞、筛选并无性繁殖含重组分子的受体细胞。浓什么是限制性核酸内切酶？大多数限制性核酸内切酶识别的DNA序列的结构特点是什么？指识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。限制性核酸内切酶存在于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制一修饰体系，限制外源DNA，保护自身DNA，对细菌遗传性状的稳定遗传具有重要意义。限制性内切酶分为三类。重组DNA技术中常用的限制性内切酶为II类酶。识别的DNA序列呈回文结构。浓简述E.coli和真核细胞表达体系各自的优点和缺点。原核表达体系如E.coli是当前采用最多的原核表达体系，其优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模生产工艺，不足之处是只能表达克隆的cDNA，不宜表达真核基因组DNA，表达的真核蛋白质不能形成适当的折叠或进行糖基化修饰并常常形成不溶性的包涵体。与原核表达体系比较，真核表达体系如酵母、昆虫及哺乳类动物细胞，不仅可表达克隆的cDNA，而且还可表达真核基因组DNA。哺乳类细胞表达的蛋白质通常总是被适当修饰，因此表达产物直接就可以具有功能。缺点是操作技术难、费时、不经济。浓血浆清蛋白主要在什么组织合成？清蛋白的主要功能是什么？清蛋白是人血浆中的主要蛋白质，主要在肝合成，肝每天合成清蛋白量约为12g。清蛋白起初是以前清蛋白形式合成的，进入rER之后其信号肽被切除，随后N末端的一个六肽片断在分泌过程中也被切除。清蛋白的主要功能之一是维持血浆胶体渗透压。血浆胶体渗透压的75%〜80%取决于清蛋白的浓度。当血浆中的清蛋白浓度过低时，血浆胶体渗透压下降，导致水分在组织间隙驻留，出现水肿。清蛋白的另一主要功能是结合多种配体，如游离脂肪酸、甲状腺素、皮质醇、血红素、胆红素、钙离子、铜离子以及一些药物等。清蛋白与这些物质的结合增加了这类物质血浆中的溶解性，并在这些物质的转运中起着十分重要的作用。浓血红素生物合成受哪些因素调节？血红素的合成受到多种因素的调节，其中最主要的是ALA的生成。ALA合酶是血红素合成过程的限速酶，其活性受下列因素影响。1、 血红素：血红素对ALA合酶有反馈抑制作用。过量的血红素可以抑制ALA合酶的合成，并别构抑制ALA合酶的活性。另外还通过氧化生成高铁血红素强烈抑制ALA合酶，从而减慢血红素的生成速度。2、 促红细胞生成素：促红细胞生成素可诱导ALA合酶的合成，从而促进血红素的合成。3、 某些固醇类激素：雄激素及雌二醇等都是血红素合成的促进剂。4、 杀虫剂、致癌物质及药物：这些物质可诱导ALA合酶的合成，从而促进血红素及细胞色素P450合成，使这些物质更好的进行生物转化。5、 此外，铅可抑制ALA脱水酶及亚铁螯合酶，导致血红素生成抑制。浓成熟红细胞糖代谢有何特点？红细胞内的葡萄糖，90%〜95%用于糖酵解通路合2,3-二磷酸甘油酸支路进行代谢，5%〜10%通过磷酸戊糖途径进行代谢。红细胞内糖酵解的基本反应和其他组织相同。糖酵解是红细胞获得能量唯一途径。红细胞糖酵解的特点是存在2.3-DPG支路，产生大量的2,3-DPGo2,3-DPG是红细胞内能量的储存形式，并调节血红蛋白的运氧功能，可降低血红蛋白对O2的亲和力。红细胞磷酸戊糖途径的生理意义是为红细胞提供NADPH，用于维持GSH还原系统和高铁血红蛋白的还原。1、GSH的还原：GSH的重要功能是保护红细胞膜蛋白、血红蛋白及酶的硫基能够免受氧化剂的毒害，从而维持细胞的正常功能。由NADPH作为供氢体，GSSG在GSH还原酶的催化下，可还原成GSH。2、高铁血红蛋白的还原：高铁血红蛋白含Fe3+，无携氧能力，磷酸戊糖途径提供的NADPH可使Fe3+还原为Fe2+，恢复血红蛋白的运氧功能。浓肝病严重时，为什么会出现浮肿、餐后高血糖、脂肪泻、夜盲症及蜘蛛痣？多种激素在发挥调节作用后，主要在肝中转化，降解或失去活性，这一过程称为激素灭活。肝病严重时，由于激素的灭活功能降低，体内的雌激素、醛固酮、抗利尿激素等水平升高，可出现蜘蛛痣；清蛋白的合成降低，不能维持血浆胶体渗透压，水分渗出滞留等现象；导致胆汁酸的合成减少及肝肠循环障碍时，影响脂类的消化吸收出现脂肪泻；会出现肝糖原合成障碍，出现餐后高血糖；脂溶性维生素A吸收障碍出现夜盲症。浓试述结合胆红素与游离胆红素的区别。结合胆红素也称为肝胆红素或直接胆红素，是胆红素在肝中与葡萄糖醛酸结合后的产物，分子量小，水溶性强，可随尿排出，不能透过细胞膜进入脑产生毒性作用；游离胆红素又称