抗微生物药物和敏感性试验

抗微生物药物敏感实验1整理ppt第一节临床常用抗菌药物一、抗细菌药物二、抗厌氧菌药物2整理ppt抗菌药物是指具有杀菌或抑菌活性的抗生素和化学合成药物。前者是真菌、放线菌、细菌等的代谢产物，后者是经化学改造的半合成抗生素和化学合成药物。3整理ppt（一）β-内酰胺类1.青霉素类2.头孢菌素类3.单环类4.头霉素类5.碳青霉烯类6.β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂

4整理ppt（二）糖肽类

（三）氯霉素

（四）氨基糖苷类

（五）大环内酯类

（六）四环素类（七）氟喹诺酮类（八）磺胺类

5整理ppt（九）利福霉素类（十）林可酰胺类

（十一）恶唑烷酮类（十二）链阳菌素类（十三）抗分枝杆菌药物

返回6整理ppt二、抗厌氧菌药物硝基咪唑类甲硝唑（Metronidazole）替硝唑（Tinidazole）奥硝唑（ornidazole）返回7整理ppt第二节体外抗菌药物敏感试验8整理ppt一、抗菌药物敏感性试验

（antimicrobialsusceptibilitytest,AST）（一）定义：AST是一个检测细菌耐药性的体外抑菌试验（ART）9整理pptAST（二）目的检出细菌对抗生素的耐药性，预测临床治疗结果预测不是指体外测得的数据，强调对数据的解释临床不是指体外AST的结果，强调病人用药后的疗效治疗结果用成功或失败衡量，强调实验室与临床的统一10整理ppt实验室

临床

评价

S成功正确的预测R失败正确的预测S（FS？）失败错误的预测AST11整理pptAST体外R≈体内R，对R的结果可以相信体外S≠体内S，对S的结果应持怀疑态度12整理ppt（三）重要性如果没有细菌耐药性检测治疗过度：用药不当，过度使用高档抗生素治疗错误：用药错误，危重患者丧失抢救时机增加不必要的副作用增加不必要的费用增加细菌的耐药性降低医疗服务的质量13整理ppt（四）方法（1）手工试验1.纸片扩散法（S，I，R）2.稀释法（MIC）3.Etest（MIC）（2）自动仪器Vitek，Microscan，Phoenix（3）分子试验PCR直接检测mecA基因（4）酶试验Nitrocefin、ESBL检测14整理ppt（五）结果的解释和报告R、I、S、MIC时间依赖性：β-内酰胺类，缩短投药间隔浓度依赖性：氨基糖苷类，日剂量1次应用15整理ppt三要素药物、机体、病原菌相关性体外和体内，抑菌和杀菌，单独和联合预测性耐药表型(个体)→耐药机制→耐药表型(同类)(预测药物)(同类药物)重点监测的耐药菌株：MRS,PRP,VRE,ESBL发出有选择、有解释的报告，与医师直接对话16整理ppt小结药敏试验

ASTART，用体外试验预测体内结果未经解释、就事论事的报告经过解释、全面的报告表型的检测耐药机制的检测、耐药流行病学分析临床用药

MedicalchoiceBacteriologicalchoice

17整理ppt二、AST的意义***可预测抗菌药物治疗的效果，即AST实验“敏感”时，治疗可能有效；实验结果为耐药时，使用该药物治疗肯定失败；指导临床医生选择使用抗生素，AST的结果往往在给予病人经验性治疗24～48h之后，若AST结果为“敏感”，该治疗有效，若结果为“耐药”，即应更换药物；提供所选用药物的依据；监测耐药性，分析耐药菌的变迁，掌握耐药菌感染病流行病学，控制和预防耐药菌感染的发生和流行。18整理ppt第三节抗菌药物的敏感性试验19整理ppt一、抗菌药物的选择

在标准中分成A、B、C、U四组,A组所列的抗生素为常规首选药敏试验药物,B组为临床使用主要抗生素,尤其在医院感染时使用的抗生素，可在下列情况下使用：①对A组同类抗生素耐药；②标本来源不同时，如三代头孢菌素使用于脑脊液中的肠杆菌，磺胺甲恶唑使用于尿道分离的细菌；20整理ppt③多种微生物感染；④多部位感染；⑤感染流行的控制；⑤对A组抗生素过敏、耐受或无反应。C组药物用于对A组药物耐药的流行菌株或对A组药物过敏的病人和某些不常见的细菌（如肠外分离的沙门菌属或耐万古霉素肠球菌）。U组仅用于尿道中分离的细菌，不作为尿道外分离菌的常规药敏试验。21整理ppt(一）非苛养菌药敏试验抗生素的选用

A组一级试验并常规报告的抗微生物药,如葡萄球菌属用苯唑西林和青霉素。B组一级试验有选择报告的抗微生物药,如肠球菌属用万古霉素。C组补充试验有选择报告的抗微生物药，如葡萄球菌属用氯霉素。U组仅用于泌尿道的补充实验的抗微生物药，如葡萄球菌属用洛美沙星和诺氟沙星。22整理ppt(二）苛养菌药敏试验抗生素的选用A组一级试验并常规报告的抗微生物药,如肺炎链球菌用红霉素和青霉素。B组一级试验有选择报告的抗微生物药,如肺炎链球菌用头孢噻肟或头孢曲松。C组补充试验有选择报告的抗微生物药，如肺炎链球菌用头孢呋辛

。23整理ppt返回二、纸片扩散法***（Kirby-Bauer法）***24整理ppt（一）实验原理将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中水分溶解后不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌浓度范围内测试菌的生长被抑制，从而形成无菌生长的透明圈即为抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的MIC呈负相关。25整理ppt26整理ppt27整理ppt(二)培养基和抗菌药物纸片【抗菌药物纸片】

直径为6.35mm，吸水量为20μl的专用药敏纸片.含药纸片密封贮存2℃～8℃且不超过1周。【培养基】水解酪蛋白（MH）培养基，pH为7.2~7.4，琼脂厚度为4mm,4℃保存。28整理ppt（三）实验方法29整理ppt1.将在约56℃恒温的无菌M-H琼脂倾注直径为90mm的平板，其厚度4mm。30整理ppt2.无菌挑取孵育16～24h的血平板上4~5个菌落。31整理ppt3.置于无菌生理盐水中，校正其浊度于0.5McFarland氏比浊管浓度，细菌数量约为1.5×108cfu/ml32整理ppt4.用无菌棉签浸入细菌悬液中，将拭子在试管上壁轻轻挤压以挤去过多的菌液。33整理ppt4.棉签在三个方向均匀抹琼脂表面（每次转60℃）使菌液均匀分布，最后沿平板内缘涂抹一周。34整理ppt5.根据选择的菌株挑选相应的抗菌纸片。肠杆菌科：氨苄西林、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟、环丙沙星、亚胺培南、氨曲南、庆大霉素；铜绿假单胞菌：头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林、阿米卡星、环丙沙星、头孢吡肟、亚胺培南；葡萄球菌属：头孢西丁、青霉素、红霉素、万古霉素、环丙沙星、庆大霉素、利福平；35整理ppt肠球菌属：青霉素、万古霉素、甲氧苄啶/磺胺异噁唑、庆大霉素、环丙沙星、红霉素、氨苄西林不动杆菌属：头孢他啶、亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、头孢曲松、环丙沙星、米诺环素；洋葱伯克霍德菌：头孢他啶、米诺环素、甲氧苄啶/磺胺异噁唑、美罗培南；36整理ppt嗜麦芽窄食单胞菌：甲氧苄啶/磺胺异噁唑、左氧氟沙星、米诺环素；嗜血杆菌属：氨苄西林、甲氧苄啶/磺胺异噁唑、头孢他啶、美罗培南、阿奇霉素、环丙沙星、头孢克洛；淋病奈瑟菌：头孢曲松、环丙沙星、青霉素、大观霉素、四环素；肺炎链球菌：红霉素、苯唑西林、甲氧苄啶/磺胺异噁唑、克林霉素、左氧氟沙星、四环素、万古霉素；除肺炎链球菌外的其他链球菌：红霉素、青霉素、克林霉素、万古霉素、头孢曲松、左氧氟沙星。37整理ppt6.用无菌镊子或纸片分配器将抗菌纸片粘贴于M-H琼脂的表面，一旦纸片贴上，不能移动；各抗菌纸片中心距离应大于24mm，纸片距平板内缘应大于15mm。38整理ppt7.经过35℃16～24h孵育。39整理ppt（四