祛风止咳颗粒抗非免疫性接触性荨麻疹的实验研究

祛风止咳颗粒抗非免疫性接触性荨麻疹的实验研究

风琴手是风琴手、黄鼠尾草制成的制剂。具有清热凉血、除湿、防风止痒的功效。临床上主要用于治疗风热慢性皮疹、水分积聚不良导致的皮肤瘙痒和水分性热损伤引起的慢性湿疹。本文对其抗过敏、止痒及抗炎作用进行实验研究,为临床应用提供理论依据。11.1为用于清园药物,把合成制剂纳入“前后”祛风止痒颗粒,由东方药林药业有限公司提供;皮敏消胶囊,沈阳澳华制药有限公司,批号:090305;扑尔敏,广州康和药业有限公司,批号:081001;醋酸地塞米松,浙江仙据制药股份有限公司,批号:090268。1.2sd大鼠、弘扬鸡马立克氏针、国家汉鼠的血压fps昆明种小鼠,SPF级,18～22g,雌雄各半。SD大鼠,SPF级,160-200g,雌雄各半。SD大鼠,SPF级,90～100g,雄性。豚鼠,清洁级,200～300g,雌雄各半。以上动物均由南方医科大学实验动物中心提供,合格证(SCXK粤2006-0015)。1.3化学试剂及试剂右旋糖酐-40,广州市齐云生物技术有限公司,批号:CH0306B508Y。磷酸组胺,广州盈信生物技术有限公司,批号:A0165。4-氨基吡啶,美国IL公司,批号:415710。二甲基亚砜,天津市富宇精细化工有限公司,批号:090813。桂皮酸,国药集团化学试剂有限公司,批号:F20090915。卵清白蛋白,Sigma,批号:A5378。吸附百白破联合疫苗,武汉生物制品研究所,批号:20081007-5。1.41.4.1非选择性接触性皮疹的影响豚鼠120只,灌胃给药或蒸馏水,连续3d。于末次给药或蒸馏水30min后,实验方法见参考文献1.4.2对大鼠血清学和细菌毒力的检测抗血清制备:取雄性大鼠10只,于每只大鼠两腿肌注1%卵白蛋白0.5ml,腹腔注射百白破疫苗0.5ml致敏,13d后取血,离心并分离血清,用生理盐水稀释,-20℃保存备用。给药与被动皮肤致敏:另取大鼠60只,给药第4天,各组大鼠头部皮下注射抗血清,0.1ml/只。抗原攻击:注射48h后,大鼠尾静脉注射1%卵白蛋白-0.5%伊文思蓝溶液,30min后处死动物,制作颅骨骨膜切片,置显微镜下观察,计算每100个肥大细胞脱颗粒率2～3处,取平均值。脱颗粒率(%)=脱颗粒肥大细胞数/肥大细胞总数×100%1.4.3小鼠嘴唇咀嚼及咀嚼指标小鼠84只随机分成空白组,模型组,皮敏消胶囊组,扑尔敏组,祛风止痒颗粒高、中、低剂量组,每组12只。灌胃给药或蒸馏水连续7d。末次给药或蒸馏水30min后,各组小鼠尾静脉注射生理盐水或者右旋糖酐(16mg/kg)。以小鼠前爪搔抓头部,后抓搔抓躯干,嘴咬全身各部位作为瘙痒指标。观察记录30min内小鼠搔痒次数及搔痒持续总时间。1.4.4影响大鼠皮肤瘙痒的组织胺取豚鼠60只,灌胃给药或蒸馏水,连续3d。末次灌胃给药或蒸馏水30min后,实验方法见文献1.4.5小鼠血清大力降低窝虾体反应取72只小鼠,灌胃给药或蒸馏水,连续5d。灌胃给药或蒸馏水30min后,于剃毛处皮下注射4-氨基吡啶1mg/kg,记录10min内小鼠舔体反应次数及舔体反应持续时间。1.4.6皮敏消胶囊组模型对大鼠毛细血管通透性的影响取大鼠60只,随机分为6组,即模型组,皮敏消胶囊组,扑尔敏组,祛风止痒颗粒高、中、低剂量组,每组10只。灌胃给药或蒸馏水,连续5d。实验方法见文献,在波长610nm处测量各组吸光度值。1.4.7多次给药及大鼠右耳后水肿模型的建立取小鼠72只,随机分为6组,即模型组,皮敏消胶囊组,醋酸地塞米松组,祛风止痒颗粒高、中、低剂量组,每组12只。灌胃给药或蒸馏水,连续7d。末次给药30min后,用30l二甲苯涂于小鼠右耳前后两面致耳肿胀模型,45min后将小鼠处死,分别在两耳同一部位打下圆耳片,以两耳片重量之差表示肿胀度作为炎症指标,并计算肿胀抑制率。抑制率/%=(模型组肿胀度-实验组肿胀度)/模型组肿胀度×100%。22.1甲基亚所致猪耳水肿的抑制剂和剂量与模型组比较,皮敏消胶囊组、扑尔敏组和祛风止痒颗粒高、中、低剂量可抑制二甲基亚砜所致的豚鼠耳肿胀,结果见表1。2.2各组大鼠耳水肿的比较与模型组比较,皮敏消胶囊组、扑尔敏组和祛风止痒颗粒高、中、低剂量能抑制桂皮酸致豚鼠耳肿胀,结果见表2。2.3骨膜肥大细胞脱颗粒与模型组比较,皮敏消胶囊组、扑尔敏组和祛风止痒颗粒高、中、低剂量组均可抑制抗血清所致的大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒,结果见表3。2.4不同剂量低剂量对右旋糖酐所致小鼠全血药浓度的影响与模型组比较,皮敏消胶囊组、扑尔敏组和祛风止痒颗粒高,中,低剂量可减少右旋糖酐所致的小鼠搔痒次数、缩短搔痒持续时间,结果见表4。2.5不同剂量下的麻黄、瞳胶质颗粒对证据的影响与模型组比较,皮敏消胶囊组、扑尔敏组和祛风止痒颗粒高、中、低剂量能够增加组胺涂抹次数及组胺用量,结果见表5。2.6对皮肤嘴唇嘴唇痒量的影响与模型组比较,皮敏消胶囊组、扑尔敏组和祛风止痒颗粒高、中、低剂量可减少4-氨基吡啶所致的小鼠皮肤搔痒次数,缩短搔痒持续总时间,结果见表6。2.7抗病剂用量对大鼠毛细管透气性的影响与模型组比较,皮敏消胶囊组、扑尔敏组和祛风止痒颗粒高,中,低剂量能够拮抗组胺所致的大鼠毛细血管通透性增加,结果见表7。2.8私家车外施麻黄颗粒高剂量对抗二甲苯致小鼠耳水肿作用的影响与模型组比较,皮敏消胶囊组、扑尔敏组和祛风止痒颗粒高剂量具有抗二甲苯致小鼠耳肿胀的作用(P﹤0.05,P﹤0.01),其余剂量组无显著性差异。结果见表8。3嘴唇嘴唇保鲜慢性荨麻疹和湿疹等皮肤病在临床上发病率很高,大约15～20%的人一生中得过至少一次。其发病机制复杂,尚不完全清楚,但多与变态反应和炎症机制相关。目前临床常使用抗过敏药物或激素类药物治疗,但西药治疗存在很多不足,如副作用大、长期服用疗效不佳等。中医认为,这类皮肤病多属于风湿热邪郁于腠理致血热引起,常用祛风止痒、清热凉血、祛湿为主要功效的中药制剂,取得较好疗效。祛风止痒颗粒是由中医皮肤科专家长期使用的临床效方开发而成,由防风,蝉蜕,地肤子等十一味中药组成。本实验选用了几种经典常用的不同动物的过敏反应模型、皮肤瘙痒模型及炎症反应模型,对祛风止痒颗粒进行药效学评价。本研究结果发现,祛风止痒颗粒可减轻二甲基亚砜及桂皮酸所致的豚鼠耳肿胀程度,减少大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒率,抗过敏作用显著;能减少右旋糖酐致小鼠皮肤搔痒次数并延长搔痒总时间,增加组织胺致豚鼠