气相色谱-质谱法测定干紫菜中16种多环芳烃

气相色谱-质谱法测定干紫菜中16种多环芳烃

紫色是水生藻类的总称。它富含维生素、矿物质、氨基酸和其他养分，深受人们喜爱。中国是紫菜生产大国也是出口大国,约七成干紫菜出口,各国质量标准要求越来越严格,紫菜中污染物测定也受到越来越多的关注目前测定食品中PAHs的前处理方法有固相萃取法、加速溶剂萃取法、凝胶渗透色谱法等,其测定方法有气相色谱法1试验部分1.1均质和混合器7890A-5975C型气相色谱-质谱联用仪,配电子轰击离子源;TDL-40B型离心机;FastPrep-24型生物样品均质器;XW-80A型漩涡混合器。16种PAHs混合标准储备溶液:萘、苊烯、苊、芴、菲、蒽、荧蒽、芘、苯并[a]蒽、5种内标混合溶液:萘-D正己烷、乙腈、丙酮为色谱纯,硫酸为优级纯,无水硫酸镁、氯化钠为分析纯;试验用水为超纯水。1.2质谱条件选择1)色谱条件HP-5MS毛细管色谱柱(30m×0.25mm,0.25μm);进样口温度280℃;载气为高纯氦气,流量1.0mL·min2)质谱条件电子轰击离子源(EI),电离能量70eV,离子源温度230℃;四极杆温度150℃;GC-MS接口温度280℃;溶剂延迟时间5min;选择离子监测(SIM)扫描模式。16种PAHs的保留时间、监测离子及对应的内标物的信息见表1,其中“*”为定量离子。1.3测试方法称取2.00g粉碎均匀的干紫菜样品于50mL离心管中,加入1.00mg·L2结果与讨论2.1铬行为16种PAHs和5种内标的混合标准溶液的色谱图见图1。2.2样口温度的选择对16种PAHs进行质谱全扫描,根据离子丰度确定定量离子和定性离子,同时确定5种内标物的监测离子,见表1。气相色谱条件会影响多环芳烃的分离和响应,试验考察了进样口温度(260,270,280,290℃)对测定结果的影响。结果表明:16种PAHs在进样口温度为280,290℃时响应值较大。其中苯并[k]荧蒽、苯并[a]芘、茚并[1,2,3-cd]芘、二苯并[a,h]蒽、苯并[g,h,i]苝在进样口温度为280,290℃时响应值相当,而其他11种PAHs在进样口温度为280℃时的响应值大于进样口温度为290℃的响应值。试验选择进样口温度为280℃。试验还考察了载气流量和柱升温程序对测定结果的影响,选择的仪器工作条件见1.2节。2.3水用量的影响干紫菜样品通常为鲜紫菜脱水后的加工产品,含水率低。干紫菜中直接加有机溶剂不容易分散,提取多环芳烃非常困难,需要加入一定量的水浸润后再提取。在2.00g紫菜样品中分别加入0,2,4,6mL水,试验考察了水用量对提取效率的影响,结果见表2。由表2可知:不加水时各化合物的提取量明显小于加水后的提取量;随着水用量的增加,各化合物的提取量也在增加,当加水量为4,6mL时,各化合物的提取量较大,且相差不大,说明水用量为4mL时已满足试验要求。试验选择水用量为4mL。2.4提取剂为正己烷-1/1的混合液多环芳烃极性较小,易溶于正己烷等非极性或弱极性的溶剂。试验考察了乙腈、正己烷、丙酮-正己烷(7+3)混合液和丙酮-正己烷(1+1)混合液等提取剂对提取效果的影响。结果表明:各化合物的回收率相差不大,但以乙腈、丙酮-正己烷(7+3)混合液、丙酮-正己烷(1+1)混合液为提取剂时提取液颜色较深,紫菜中极性较大的色素等杂质同时被提取出,给净化带来困难,而以正己烷为提取剂时,只有少部分的色素进入提取液,提取剂颜色较浅。试验选择的提取剂为正己烷。2.5净化方法的优化紫菜中主要有色素、蛋白质、氨基酸等杂质,目前对于紫菜样品的净化方法主要有硫酸磺化法、分散固相萃取法等。试验考察了硫酸磺化法和分散固相萃取法对样品的净化效果。结果表明:分散固相萃取法处理后的样品色谱图干扰峰数量更少、强度更小。试验选择样品净化方式为分散固相萃取法。2.6psa用量的确定试验考察了PSA用量(0,50,100,150,200mg)对净化效果的影响,样品的色谱图见图2。由图2可知:随着PSA用量的增加,主要干扰峰强度逐渐变小;当PSA用量为100mg时,主要干扰峰强度最小;继续增加PSA用量,净化效果没有明显提高。试验选择PSA用量为100mg。2.7己烷不断稀释将16种PAHs混合标准储备溶液用正己烷逐级稀释,配制成1.00,2.00,4.00,10.0,20.0,50.0,100μg·L2.8加标回收率和测定值的相对标准偏差向紫菜样品中分别添加不同浓度水平的16种PAHs混合标准溶液,平行测定6次,回收率和测定值的相对标准偏差(RSD)见表4。由表4可知:16种PAHs的回收率为78.3%~109%,RSD为1.2%~14%,满足食品理化检测的要求。2.9质量分数的测定按试验方法对5批干紫菜样品进行分析,结果表明:5批样品中16种PA