法医学-生物性检材的个体识别

生物性检材的个体识别1.概述2.血痕检验3.精液斑检验4.唾液斑检验5.毛发检验6.骨骼检验7.牙齿检验8.其他组织检验9.个体识别结果评估个体识别（Personalidentification）

应用医学和生物学的理论和技术判断生物性检材是否同一来源。一、概述生物性检材的个体识别意义生物性检材通常细小且分布范围广罪犯难以彻底毁掉或掩盖身份不明的尸体、活体或检材辨明身份为侦查提供线索为审判提供证据

生物性检材是经历了环境调节作用的人体组织与器官或人体体液、分泌物、排泄物及由它们形成的生物性斑痕，由于环境的作用使生物性检材具有不确定性，对法医鉴定人是一个严峻的考验。生物性检材的法医学特点常见生物性检材种类血痕精斑（混合斑）毛发唾液和唾液斑软组织硬组织（骨和牙齿）低温或晾干保存，尽快送检纸带、纱布或玻璃容器包装或存放，勿用塑料膜袋包装物外注明物品名称、来源、数量、采集日期等送检同时附必要的对照样本，如被害人或嫌疑人的血液、唾液必须附有委托书，且写明送检机关和联系人、送检物品清单、案情介绍、送检目的要求等。包装和送检生物性检材的个体识别过程肉眼检查预试验确证试验种属鉴定个体识别二、血痕(bloodstains)血痕检验的目的：1．是否血痕2．是人血还是动物血3．血痕的个人识别4．与案情有关的其他问题1.肉眼观察现场地面、墙壁、家具、衣服、凶器、指甲缝等。黑暗现场用鲁米诺喷射（发出荧光）。需要观察血痕的数量、分布、位置、大小、形状、范围、色泽、相互关系，从而达到推断案情的目的。颜色：鲜红色暗红色红褐色褐色绿褐色灰褐色腐败：淡绿褐色、污绿色区别：酱油、油漆、色素、颜料、染料形状滴状：因高度及方向而异；同等量血液落下时，落差越高，形成的斑点越大，周缘的小突起也越多。锯齿状突起指示行走方向，突起大小多少---行走速度流柱状：血液从身体高位流向低位时形成，一般由静脉出血引起----体位喷溅状：似感叹号，尖端是喷射方向---受伤时位置擦拭状：染有血液的物体或出血部位与其他物体接触磨擦后形成----死后移尸血印痕：染有血液的部位直接与某物体接触形成。血指纹、血掌纹、血鞋印、血足印、凶器印痕血泊：原始现场距地50cm，70度距地50cm，25度距地100cm，70度距地100cm，25度现场奔走血痕现场血痕现场拖血痕现场擦拭血痕血痕的提取血痕：必须同时取周边无斑痕部分做对照新鲜血：活体，静脉血，EDTA抗凝；尸体，末梢血管血。4℃保存或干净纱布、滤纸上晾干小件物品整件提取大件物品切割、刮取泥土上整块取下，衬以消毒棉花于盒内以防震碎2.预试验

预试验即筛选试验，特点：是血痕一定呈阳性反应，预试验阴性即可认定不是血痕或血痕已被破坏。所需的检材量少，灵敏度高，即使肉眼看不见，也呈阳性反应。操作简便快速。联苯胺试验Benzidinetest原理:H2O2

Hb/hamatinPoH2O+

无色[O]蓝色联苯胺联苯胺蓝灵敏度20~30万倍，极微量血痕即可出现阳性（+）,阴性（-）可否定血痕/血痕已被完全破坏3.确证试验

特异性强，灵敏度不高阴性不能否定血痕，只能说未发现血痕。血色原结晶试验方法：氯化血红素结晶试验光谱分析血色原结晶试验原理：血红蛋白在碱性溶液中分解为正铁血红素和变性珠蛋白，在还原剂作用下，正铁血红素还原为血红素，后者与变性珠蛋白或其他含氮化合物（如吡啶烟碱）等结合，形成血色原结晶。试剂：高山氏试剂

10%NaOH3ml混合置棕色瓶中

30%葡萄糖10ml

吡啶3ml

试剂配置好第二日使用较好，久置则反应缓慢，甚至失效。操作结果桃红色的星状、菊花状或针状结晶4.种属检验(Speciesidentification)

沉淀环试验抗原抗体反应琼脂凝胶免疫扩散试验免疫电渗电泳酶联免疫吸附试验----ELISA法

胶体金标记McAb-Hb试纸法

血清学方法细胞学方法生化方法血红蛋白等电聚焦抗-人球蛋白消耗试验胶体金标记McAb-Hb试纸法血痕血型测定红细胞血型：ABO、MNSs、Rh、Kell、Kidd、Duffy等红细胞酶型：EsD(酯酶D）、EAP（红细胞酸性磷酸酶）、PGM1（磷酸葡萄糖变位酶）、GLOI（乙二醛酶I）、ADA（腺苷脱氨酶）、GPT（谷丙转氨酶）等血清型：Hp、Gc、Gm、Km白细胞型：HLA-A、B5.血痕的个体识别血痕的DNA分析

DNA指纹图技术STR-PCR技术

各种各样的生物检材分泌物获得检材中细胞经物理化学作用释放DNA经过一系列实验操作及仪器分析得到分型结果应用PCR反应的对DNA进行几何级数放大统计学计算得出结论DNA分型的应用以人找物

发现犯罪嫌疑人在先，获取证实及犯罪事实的物证在后。以物找人

发现证实犯罪的物证在先，获取犯罪嫌疑人再后。以物找物

对发生在不同时间、不同地点的案件所获取的犯罪物证进行串并。（如精斑、血迹、毛发等检材的串并）以人找人

尸源的寻找与认定。（如无名尸、碎尸、空难、焚尸等的认定）血痕其它检验

出血部位出血时间出血量出血者年龄出血者性别两份血的同一认定

三、精液斑(seminalstain)案情强奸猥亵非法性关系离婚检材

裤头卫生纸床单毛巾阴道拭子新鲜精液鉴定

是否精斑个人识别生育能力鉴定一、精液的组成精子精浆

精浆水90%

有机物精素黄素胆碱卵磷脂蛋白质氨基酸酶离子Na+K+Ca++P++Cl-Zn+SO42-特有蛋白P30

β—MSPβ—SM

α2

–SGP血型物质ABH

Gc

TfGmKm

AcpPGM1DIA3

精子的形态正常精子分头、体、尾三部分，长50－60um,外形似蝌蚪。头部正面观呈卵圆形，侧面观呈扁平形，由细胞核和顶体组成。头长3-5um，宽2-3um，厚1-2um。颈部圆柱形，长约6um。尾部细长而弯曲，长达40-50um。HE染色：精子头呈蓝色，头前半部不着色或浅染，尾部呈红色。可见异型精子。精子在女性生殖道的检测时限性交后阴道内3-8H,宫颈2-5天，子宫、输卵管1-10天可检活精子。阴道内3-5天，宫颈14天可检见死精子。精子检出时限与被害人的体位、活动情况有关。精子检出率的高低与阴道内容物的提取部位有关，宫颈刮片和阴道后穹隆擦拭物的精子检出率较高。

三、精液检验

一般性状

乳白色，粘稠状液体,PH7.2—8.9

比重：1.021—1.040，渗透压：0.55—0.58数量

2-2.5ml/次，1-1.5亿个/ml，总数4-6亿个形态、活动度。

头、体、尾，50-60um。

不正常的标准

数量：<0.6亿/ml，总数<1亿总量<1.5ml

活动不良的精子>40%

畸型精子>15%四、精斑检验一）肉眼检查

二）预实验三）确证实验四）血型测定和DNA检测

1.肉眼观察可附于衣裤、被褥、草纸、被害人腹壁、大腿和阴毛上。必要时用紫外线照射（银白色带淡紫晕的荧光）2.提取方法奸杀或死因不明女性尸体：取阴道内容物，必要时取肛门、会阴、口腔标本纸巾上的精斑精液样本被单上的精斑

内裤上的可疑斑痕3.精斑的预试验酸性磷酸酶检验原理

Acp

磷酸苯二钠萘酚

+

氨基安替比林结果铁氢化钾红色醌类特点阳性结果说明含有酸性磷酸酶，可能是精斑。阴性结果说明检材不是精斑或精斑酸性磷酸酶被破坏。由于酸性磷酸酶非前列腺独有，因此阳性结果不可轻易认定为精斑。室温条件下酸性磷酸酶较稳定。4.精斑的确证实验一）形态学检查精子的检出二）免疫学检验抗人精沉淀实验抗P30沉淀实验其他三）生化检验LDH—XGD—DAP

（甘氨酰脯氨酰二肽基氨肽酶）一）精子的检出方法结果

HE染色顶部不着色蓝颈红尾品红-美蓝红头蓝尾藻红染色红色确证标准一个完整的精子数个典型的精子头二）免疫学方法抗人精血清沉淀实验抗P30血清沉淀实验高度的种属特异性与器官特异性无精子的精斑亦可为阳性

P30性质稳定检出时间长其他抗β—微精蛋白沉淀实验抗P30单克隆抗体ELISA法抗人前列腺特异性抗原p30的胶体金标记试纸法精斑预实验和确证实验结果5.精斑的个人识别ABO血型酶型血清型DNA多态性STR

Y-STR混合斑三）DNA分型

混合斑（精子、阴道上皮细胞

SDS、蛋白酶K完整精子DNA（阴道上皮细胞）

DDT二次消化SDS、蛋白酶DNA（精子）Y-STR基因座的特点1.呈单倍型父系遗传

2.突变率低

3.特别适用于法医学中混合斑的分析和父系家族成员的亲权鉴定NSampleDYS393DYS19DYS389ⅡDYS390DYS391DYS3854嫌犯甲131729231012/18嫌犯乙121630231012/19精斑121630231012/195嫌犯131531231013/17卫生纸131531231013/176嫌犯121528231113/13受害人内裤121528231113/137嫌犯121629231011/16受害人内裤121629231011/168嫌犯甲121529231012/12嫌犯乙121428241013/21嫌犯丙131528231012/12混合斑12/131528/29231012/12刑事案件的Y-STR分型结果四、唾液和唾液斑(salivarystain)

唾液：现场烟头、口香糖、牙签、饮料容器及咬痕上唾液斑在白色背景上常呈淡黄色，在紫外下发出淡青色荧光唾液斑的证明淀粉酶的检测唾液斑的个体识别五、毛发

常见于地面、被褥、凶器上；死者手中、口中和衣服；强奸案被害人内衣、外阴和大腿间提取时注意要用镊子提取，不能损坏其附着物需要解决的问题有：是毛发还是纤维；是人毛还是动物毛；毛发来自人体何部位；是自然脱落还是暴力拔脱，推断致伤物；毛发的个人识别。毛发的个体识别形态学观察仪器分析分子生物学方法STR分析mtDNA测序序列多态性母系遗传六、骨骼检验（一）骨的确定1．肉眼检查2．显微镜检查骨小管、骨板、哈佛氏管等骨组织学特征。3．焚烧试验可用烧灼方法做初步的检查。

（二）种属鉴定头颅、DNA检测（三）一人骨或多人骨的鉴别骨骼的解剖学特征、DNA分析（四）个人特征1．形态观察方法（1）性别骨骼的性别差异以骨盆最为明显，其次是颅骨，其他如胸骨、锁骨、肩胛骨、四肢长骨等亦有一定的性别差异。（2）年龄未成年骨骼的年龄鉴定主要根据四肢骨骨化中心的出现时间及骨伤的愈合程度。20岁以后以耻骨联合的年龄变化最有价值，其他骨骼年龄鉴定有较大误差。（3）身高2．图像分析方法（1）面貌复原又称复容法(facialreconstruction)，根据颅骨的解剖学特点，用科学的方法重建与死者生前面貌相似的形象。（2）颅像重合颅像重合技术(superimpoingtechnique)是将颅骨用X线拍片，将失踪人的照片放大至同样大小，再以颅骨照片与生前照片重叠在一起，观察外形轮廓与眼、耳、口、鼻是否吻合,并按一定的标志点和审定线进行重合，观察审定线是否全部重合一致，判断两者是否同一。3.分子生物学方法骨骼可用PCR进行DNA分析。七、牙齿检验牙齿是人体最坚硬的组织和保存时间最长的器官，不易受环境与理化因素的影响。不同个体的牙齿发育状况及排列方式不同，随着牙齿的使用、磨损而出现的局部缺损特征，使牙齿具有了唯一性。这在法医学个人识别中有重要意义。（一）种属鉴定人与动物的牙齿差别较大。食肉类动物尖牙发达，食草类动物侧切牙、磨牙发达。（二）年龄推断1．根据牙齿的萌出顺序推断年龄2．根据牙齿的磨耗程度推断年龄2334444444433将上述牙磨耗度代入方程牙磨耗度值

733.6263-54-444.19343.28248.2714-8.12147.59243.6634-44-3.9253-63-725.0615.25+32.75推断年龄48（岁）实际年龄50（岁）误差2（岁）11111111111100

牙磨耗度值

70-3.7161-1.6651-2.3341-31-2.7121-1.48119.6611-3.1921-31-6.0441-51-2.67613.1871-13